大鼠骨髓造血干细胞体外定向诱导、扩增树突状细胞及其功能鉴定

目的 :以大鼠骨髓造血干细胞为来源 ,建立体外诱导、扩增树突状细胞 (dendriticcells,DC)的方法 ,并进行表型鉴定及功能检测。 方法 :从大鼠骨髓细胞中分离出造血干细胞 ,加入rGM CSF、rIL 4和nrhTNF α培养 1 2天获得大量DC ,经标抗大鼠OX6 2单抗免疫磁珠分离纯化后的DC ,进行形态学观察、表型检测及刺激T细胞增殖能力分析。 结果 :大鼠骨髓造血干细胞经诱导培养 1 2天后 ,倒置显微镜和电镜下显示典型的DC形态和超微结构 ;流式细胞术分析显示细胞表面抗原高表达 ,其中OX6 2为 6 2 .1 9% ;MHCⅠ为 70 .4 0 % ;MHCⅡ为 78.2 8% ;CD80为 5 5 .5 8% ;CD86为 6 8.38% ,是典型的大鼠DC表型特征 ,同种混合淋巴细胞反应结果显示 ,DC具有高效的刺激T淋巴细胞活化增殖的能力。 结论 :大鼠骨髓造血干细胞可成功诱导为具有典型形态特征及功能的DC ,为进一步研究其在肿瘤免疫治疗中的应用打下基础。

人骨形成蛋白-7基因在人骨髓间充质干细胞中的表达和对其分化表型的影响

目的 :观察人骨形成蛋白 7(BMP 7)基因在人骨髓间充质干细胞 (hMSC)中的表达及对其成骨表型的影响。 方法 :利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP 7基因表达腺病毒AdB7V ,体外感染hMSC后观察绿色荧光蛋白(GFP)表达及RT PCR、免疫组化方法鉴定外源基因的表达 ,通过对感染细胞的碱性磷酸酶 (ALP)染色和钙盐染色鉴定其成骨分化表型。 结果 :hMSC经AdB7V感染后 72h可观察到GFP表达 ,RT PCR、免疫细胞化学方法证实外源性BMP 7在hMSC中表达 ,感染细胞的ALP染色和钙盐染色均为阳性。 结论 :外源性的人BMP

明胶对自固化磷酸钙骨水泥性能的影响

目的:了解明胶对自固化磷酸钙骨水泥(CPC)物理性能、超微结构及生物相容性的影响。方法:分别以50g/L明胶和蒸馏水为液相,制备CPC试样,通过测定初步凝结时间和抗压强度,扫描电镜观察凝固体超微形态及大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)表面种植试验,比较两者差异。结果:复合明胶的CPC初步凝结时间为(5.31±1.18)min,抗压强度为(9.04±1.35)MPa;对照组初步凝结时间为(20.72±4.13)min,抗压强度为(4.38±1.33)MPa,与实验组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。扫描电镜发现固化体表面为颗粒状晶体,大小约10μm,添加明胶后晶体仍呈颗粒状,互相连接,孔隙较对照组少。细胞可在水泥盘上贴附、生长,实验组细胞数较多。结论:添加明胶可缩短自固化CPC的固化时间,提高抗压强度及生物相容性。