人骨髓间充质干细胞体外培养及生物特性的观察

目的 :观察人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)在体外培养的生物学特性和作为组织工程的种子细胞的可能性 .方法 :将人骨髓MSCs自骨髓中分离、纯化和培养 ,观察原代和传代培养的增殖及生长特征 .结果 :原代培养及传代培养显示 ,在体外培养条件下人骨髓MSCS有活跃的增殖能力 .结论 :体外获得的人骨髓MSCs的生物年龄较为年轻 。

儿童喉乳头状瘤细胞的原代培养及生物学特性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒 (humanpapillomavirus,HPV)感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞在体外培养的生物学特性。方法 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 1年 4月采用组织块培养法培养 10例 12例次喉乳头状瘤患儿手术的标本———HPV感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞 ,观察其生长情况 ,计数法绘制细胞生长曲线 ,运用共同引物聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)法及核酸分子斑点杂交方法对喉乳头状瘤细胞在培养前后的HPVDNA进行检测。结果 HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长时间可长达 6周 ,培养前后细胞内均含有HPV的DNA。细胞生长分为 3期 ,延缓期、生长期及停滞期。培养前 1～ 4d细胞从组织块中大量游出 ,5～ 7d为延缓期 ,此期间细胞渐渐开始贴壁 ,8～ 18d为生长期 ,细胞数目迅速增多 ,生长速度很快 ,继而进入停滞期 ,细胞数目增长缓慢 ,细胞空泡化明显 ,渐渐走向死亡。结论 HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长情况良好 。

紫杉醇对人喉癌细胞系Hep-2的抑制作用研究

目的 :通过体外实验评价紫杉醇对人喉癌细胞系Hep 2的抑制作用。方法 :应用人喉癌细胞系Hep 2 ,将细胞暴露于不同浓度紫杉醇下 ,分别于 6、12、2 4、4 8、72h收集标本 ,进行细胞形态观察 ;流式细胞仪细胞周期分析 ;MTT法检测细胞生长情况 ,绘制细胞生长曲线 ;应用琼脂糖凝胶电泳进行检测和观察。结果 :人喉癌细胞系Hep 2在紫杉醇的作用下 ,细胞分裂阻滞在分裂期的中期 ,并诱导细胞发生凋亡 ;凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质凝聚或者断裂 ;细胞DNA裂解片段呈现典型的“阶梯状”排列的条带 ;紫杉醇对Hep 2的细胞毒性与剂量和时间有依赖关系。结论 :紫杉醇诱发人喉癌细胞凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关 ,随浓度和时间延长 ,G2