B型超声对门脉高压症的诊断价值

目的应用Ｂ型超声（简称Ｂ超）测量肝脏回声、脾脏大小、门静脉主干直径（ＭＰＶＤ）及脾静脉直径（ＳＶＤ）等多项指标，以探讨更准确的诊断门脉高压症的方法．方法以电子内镜直接观察有无食管静脉曲张作为金指标，将患者分为门脉高压症组（Ａ组）１０４例，男８７例，女１７例，年龄１６岁～６６岁；对照组（Ｂ组）９１例，男８１例，女１０例，年龄１６岁～６５岁．再以Ｂ超测得的ＭＰＶＤ，ＳＶＤ，脾脏厚度及肝脏回声对两组进行分析、比较．结果诊断门脉高压症的可疑指标为：ＭＰＶＤ１３ｃｍ～１４ｃｍ，门脉高压症的阳性率为５４７％；脾脏厚度４６ｃｍ～５５ｃｍ，阳性率７１６％．诊断的有力指标为：ＭＰＶＤ≥１４ｃｍ，门脉高压症的阳性率９５４％；ＳＶＤ≥０９ｃｍ，阳性率９５６％；脾脏厚度≥５５ｃｍ，阳性率９５３％；肝脏回声２，３级，阳性率９６８％．诊断的确定指标：ＳＶＤ≥０９ｃｍ＋肝脏回声２，３级；ＭＰＶＤ≥１３ｃｍ＋肝脏回声２，３级；ＭＰＶＤ＋ＳＶＤ＋肝脏回声＋脾脏厚度≥４６ｃｍ；其阳性率均为１００％．结论ＳＶＤ及肝脏回声是Ｂ超诊断本病最重要的指标，４项综合分析比单项门静脉测量符合率更高．

丙型肝炎病毒核心蛋白基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达

目的：构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白（Ｃ）基因片段的重组真核表达载体，并在肝细胞癌细胞株７７２１细胞中表达。方法：将从ｐＢＲＴＭＨＣＶ１－３０１１质粒切下的ＨＣＶＣ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建真核表达质粒ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ，然后，采用脂质体转染技术，转染７７２１细胞进行瞬时表达，转染细胞裂解煮沸后，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达的核心抗原。结果：用限制性内切酶酶切后，片段大小与计算值相符。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实，表达抗原的Ｍｒ约为２２０００。结论：ＨＣＶＣ基因能够插入ｐｃＤＮＡ３真核表达载体，并使其在真核细胞中表达，为进一步ＨＣＶ基因疫苗的研制和探讨抗ＨＣＶ感染打下了基础。

双位点核酶对乙型肝炎病毒C基因体外转录物的剪切作用

为探讨双位点核酶对乙型肝炎病毒Ｃ基因体外转录物的剪切作用， 观察双位点核酶对单一核酶体外剪切的增强作用， 同时比较串联核酶和混合核酶的体外切割作用， 构建了核酶Ｒｚ１ ， Ｒｚ３ ， Ｒｚ１ 和Ｒｚ３ 的串联核酶（Ｒｚ１３） 体外转录载体， 经体外转录后切割靶ＲＮＡ． 结果表明： 双位点核酶， 无论是串联或混合核酶均可增强单一核酶的体外切割作用， 串联和混合核酶中的单一核酶可独立发挥作用； 当串联和混合数目为２ 个时， 两者的切割效率差别不大（ Ｐ＞ ０－０５） ．

丙型肝炎病毒核心基因免疫研究

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）基因免疫用于预防和治疗ＨＣＶ感染的可行性和有效性．方法将ＨＣＶＣ基因片段插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３质粒ＣＭＶ启动子的下游，在证实其可以在小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０（Ｈ２ｄ）中表达之后，将重组质粒注射ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ２ｄ）小鼠股四头肌，ＥＬＩＳＡ检测血清中抗体产生水平；３ＨＴｄＲ掺入法测定免疫小鼠淋巴细胞ＨＣＶＣ抗原特异性增殖能力，４ｈ５１Ｃｒ释放法检测免疫小鼠细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬｓ）体外杀伤功能．结果免疫小鼠２０只，初次免疫２ｗｋ后，血清中均出现了ＨＣＶＣ抗体，且增加免疫剂量可提高抗体滴度；淋巴细胞增殖指数为６１０，明显高于对照组（Ｐ＜００１），ＣＴＬｓ体外特异性杀伤率为６３１％，也高于对照组（Ｐ＜００１）．结论ＨＣＶＣ基因免疫不仅可以诱导机体产生特异性的体液免疫，而且产生特异性的细胞免疫，它可能是防治ＨＣＶ的有效方法．