慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调

目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型。痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象。旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为。进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调。结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高。提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关。

启发式思考题对医学本科分子生物学实验教学的促进作用

目的:通过自行设计的启发式思考题,让问题式学习伴随医学生分子生物学实验教学全程,利用实验课的教学互动环节发挥学生学习的主观能动性。方法:借鉴启发式教学经验和问题式教学方法,在实验的平时考核中增加了启发式思考题,针对教学内容设置拓展性问题,以开卷回答的方式引导学生通过自学寻找操作实践及其理论基础中潜在的知识内涵和科学规律。结果:思考题的引入在强化学生自主学习,锻炼思考和解决问题能力的同时也显示出了良好的区分度。思考题成绩以及以此为基础的平时成绩与实验理论考核成绩之间显示出了显著的相关性。结论:贯穿于实验课教学活动中的启发式思考题在拓展思维、提升学生自主学习能力的同时促进了实验课的教学效果。

节律分子Timeless调控糖代谢重编程促进肝癌细胞生长

目的探讨节律分子Timeless对肝癌细胞生长的影响及其分子机制。方法采用肝癌公共数据信息分析Timeless在肝癌及癌旁组织中的表达；在高表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97H和低表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97L中，分别用RNA干扰和真核表达质粒方法沉默或上调肝癌细胞中Timeless的表达后，采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测干扰和过表达Timeless的效果以及Timeless下游分子的表达。采用葡萄糖摄取实验、乳酸检测实验、细胞外液pI-I检测实验、细胞氧耗实验和MTS实验，分析Timeless对肝癌细胞糖酵解、氧化磷酸化和细胞生长的影响。结果肝癌组织中TimelesS的表达高于癌旁组织（P〈0．05）。敲低Timeless后．Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞葡萄糖相对摄取水平分别为0．510±0．119和0．508±0．099，与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）：Timeless过表达组细胞葡萄糖相对摄取水平为1．953±0．324，与空质粒组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞乳酸产生相对水平分别为0．579±0．096和0．550±0．120，与对照组比较．差异有统计学意义（P〈0．05）：Timeless过表达组细胞乳酸产生相对水平为1．463±0．179，与空质粒组比较，差异有统计学意义（P〈O．05）。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞外pH值为7．390＋0．035和7．370±0．060，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Timeless过表达组细胞外pH值为7．130±0．031，与空质粒组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞耗氧率分别为3．686±0．389和3．955±0．431，与对照组（1．690±0．297）比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Timeless过表达组细胞耗氧率为1．302＋0．336，与空质粒组（3．185±0．262）比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。Timeless抑制p53的表达。与Timeless＋p53对照组比较，Timeless＋p53干扰组细胞葡萄糖相对摄取水平、乳酸产生相对水平、细胞外培养液pH和细胞氧耗率差异均无统计学意义（均P〉0．05）；与Timeless＋p53空质粒组比较，Timeless＋p53过表达组细胞葡萄糖相对摄取水平、乳酸产生相对水平、细胞外培养液pH和细胞氧耗率差异均无统计学意义（均P〉0．05）。Timeless通过抑制p53的表达促进肝癌细胞生长。结论Timeless通过抑制p53的表达促进细胞糖酵解和抑制氧化磷酸化，进而促进肝癌细胞生长。

肿瘤过继免疫治疗的研究进展及展望

肿瘤免疫治疗因在肿瘤治疗中具有高效性已成为疗效显著的新型疗法,其中细胞介导的过继免疫治疗是当前研究的热点。与化疗、放疗、手术切除这些传统肿瘤治疗手段相比,由于能够直接杀伤或者激活免疫系统杀伤肿瘤细胞,过继免疫治疗展现出独特的优势和临床应用前景。近些年,研究人员在过继免疫治疗领域取得了大量的研究进展。本文将对肿瘤过继免疫治疗的现状与临床前景进行综述。