浅谈多媒体技术在医学细胞生物学教学中的应用

目前,我国高等医学教育既面临着新的挑战也肩负着重大的历史使命,这就要求进行教学改革,不仅进行教学内容的改革,教学方法也需要进行改革,而多媒体技术的引用,不仅使教学手段发生变革,其教学思想、教材内容和形式都发生了变化,尤其对医学细胞生物学这个微观领域的教学研究,注入了新的生命力。作为教师应熟练掌握多媒体技术,使教学信息更加逼真、生动、具体,进一步提高初学者对于知识的长期记忆;同时,合理进行教学设计,适当应用多媒体技术,使其成为形象、可视的教学工具,而不是转型的黑板,以尽快完善多媒体技术在医学细胞生物学教学中的运用。

医学本科生细胞生物学双语教学调查评价

目的总结对医学本科生开展细胞生物学双语教学的经验和方法.方法问卷调查及分类分析.结果①本科生公共英语水平均达到了接受双语教学的基本条件,专业英语水平表现出不均衡性,英语听力薄弱是多数学员存在的共同问题.②学员对教员的素质要求很高,期望教员具有丰富的专业知识和流利的口语.对课时比例、教材等具体教学手段,不同学员要求不同.③双语教学的教学效果基本上是理想的,但仍有许多地方需改进;双语教学成功与否关键在于教师备课及学员预习.结论必须大力提高教员素质与教学经验,因地制宜确定教学内容,强化学员对专业词汇和背景知识的学习.

研究生细胞生物学进展双语教学的调查分析

2001年9月教育部出台的关于加强高等学校教学质量的文件中,要求各高校积极推动使用外语进行公共课和专业课的教学,特别强调在信息技术、生物技术等国家发展急需的专业开展双语教学的意见[1].为了培养面向2l世纪的高素质医学人才,我校细胞生物学教研室从2000年始,在研究生细胞生物学进展课教学中首先开展了双语教学.经过四年的实践和摸索,我们在使用双语教学的过程中对教材、教学手段、教师素质及学生知识架构等相关方面积累了一些经验,也遇到了一些问题.为了进一步提高研究生细胞生物学双语教学的水平,现将历年调查资料总结如下以供同行参考.

不断更新教学内容深化细胞生物学教学改革

细胞生物学是生命科学的重要支柱和核心学科之一。21世纪的细胞生物学是生命科学前沿的一个活跃的、具有良好前景的一门基础必修学科。细胞生物学以细胞、亚细胞以及生物大分子的结构及其功能为研究对象，是从细胞和分子水平来研究生命本质的一门基础学科，是当前生命科学中发展较快，并正在与其他学科广泛交叉与渗透的前沿研究领域。

《医学细胞生物学》教学指导课教学方法初探

"教学指导课"的设置作为基础医学教学改革的一种尝试,在教学中起到了良好的作用.本文从<医学细胞生物学>教学指导课的实践中,初步探讨了该课程的教学目标、内容、形式与方法,并总结了体会.我们认为"教学指导课"是必要的,也是可行的,应作为教学的一个重要的环节.

提高生物技术专业细胞生物学教学质量的体会

生物技术专业是新开设的一个专业,该专业细胞生物学在课程设置、教学内容、教学方法和教学手段等方面均与原有医学专业细胞生物学有显著不同.在教学实践中结合一年来的教学经验,从以下几个方面入手,有效地提高了细胞生物学课程的教学质量:把最新的科技发展成果融化到教学内容中,提高教学内容先进性、科学性;采用灵活多样的教学方法和现代化教学手段,提高教学质量;强化实践性教学环节,加强学生动手能力和创造能力的培养.

免疫球蛋白超家族成员CD147与黑素瘤生物学特性的相关性研究进展

黑素瘤致死率高,尽管近年靶向治疗及免疫治疗取得了一定进展,但仍存在效率低等问题,因此,深入了解其生物学特性及内在机制,发现新的免疫治疗靶点具有重要意义。CD147是免疫球蛋白超家族成员,属于高度糖基化的1型跨膜蛋白,在黑素瘤中高表达,且在促进黑素瘤侵袭、转移、增殖、生存等生物学特性中发挥重要作用,提示CD147可能是潜在的黑素瘤治疗靶点。本文综述了近年CD147与黑素瘤生物学特性及其内在机制相关性的研究进展,旨在阐明CD147在黑素瘤发展进程中的作用,为黑素瘤临床治疗提供有前景的新型靶点分子。

军医大学本科生早期接触科研现状调查与对策探析

以本科生导师制为依托组织开展医学生早期科研训练,是军医大学本科教学改革的重要组成部分.本文以第四军医大学四年制、五年制和八年制不同专业本科生为调查对象,采用自编问卷匿名调查的方式,对学员早期接触科研的现状进行调查,分析其中存在的主要问题及其影响因素,探讨针对性的改进对策,为进一步深化军队院校教育教学改革,加强本科生科研能力和创新精神,培养全面发展的高素质军事医学人才提供依据.

肿瘤转移体外实验中细胞计数方法探讨

目的 :探讨肿瘤转移体外实验中最佳的细胞计数方法 .方法 :采用四唑盐 (MTT)比色法和结晶紫 (CV)比色法计数不同浓度培养细胞数 ;采用CV比色法和苏木素 伊红 (HE)染色法检测体外重组基底膜侵袭实验穿膜细胞数 ;采用MTT比色法和CV比色法测定肿瘤细胞与细胞外基质黏附实验细胞数 .结果 :MTT和CV比色法计数不同浓度培养细胞可分别准确计数到 2 .75× 1 0 4/mL和 4 .3× 1 0 2 /mL ;CV比色法无法准确计数重组基底膜侵袭实验中的细胞 ,可以计数黏附实验中的细胞 ;HE染色法可以计数重组基底膜侵袭实验中的细胞 .结论 :HE染色法计数细胞适用于体外重组基底膜侵袭实验 ;CV比色法计数细胞适用于肿瘤细胞与细胞外基质的黏附实验 .

siRNA对HepG2细胞mcl-1表达的影响

目的:探讨特异性siRNA对肝癌细胞系HepG2中mcl-1表达的影响.方法:将特异性siRNA经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2;半定量RT-PCR观察干扰前后mcl-1 mRNA水平变化,比较对应不同位点的两对siRNA片段对mcl-1的干扰效果,分析RNA干扰的特异性、时效性;Western Blot检测转染前后Mcl-1蛋白表达情况.结果:特异性siRNA片段能有效降低mcl-1 mRNA水平,最大干扰效率达67.25%,高于作为对照的非相关片段;对应不同位点的两对siRNA片段对mcl-1均可产生干扰作用,彼此间差别不大;干扰作用于转染后24h即可出现,48h达高峰,72h稍有降低;Western Blot证明转染siRNA-F1后Mcl-1蛋白表达下调.结论:RNA干扰技术可有效下调肝癌细胞系HepG2中mcl-1 mRNA水平,明显下调Mcl-1蛋白表达.

高表达CypA肝癌细胞系的建立及其功能初步研究

目的:构建含人全长CypA cDNA的真核表达质粒,建立高表达CypA蛋白的肝癌细胞系,为进一步研究CypA在肝癌中的功能和作用机制提供细胞模型。方法:将人全长CypA cDNA序列克隆后,连接至真核表达载体pcDNA3.1中,再将构建的真核表达载体转染至FHCC98肝癌细胞中,经G418加压筛选后获得稳定表达CypA的肝癌细胞株;免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况;MTT法测定细胞的增殖速率。结果:真核表达载体pcDNA3.1-CypA经酶切、测序鉴定,结果正确;免疫印迹结果显示,稳定转染后细胞的CypA表达水平显著高于空载体转染和未转染的细胞;与对照相比,稳定高表达CypA的细胞增殖速度加快。结论:成功构建了含有人全长CypA cDNA序列的真核表达载体pcDNA3.1-CypA;建立了稳定高表达CypA的FHCC-98肝癌细胞系;CypA的高表达可以促进FHCC98细胞的增殖。

14-3-3ζ对HL-60和HL-60/VCR细胞增殖的抑制作用

本研究旨在进一步探讨14-3-3ζ在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)敏感细胞HL-60和耐药细胞HL-60/VCR中的表达和作用。用半定量RT-PCR和Western blot分别检测多药耐药基因mdr1 mRNA和Pgp的表达以验证基因芯片的结果,用Western blot检测Pgp、14-3-3ζ以及抗凋亡分子BCL-2、MCL-1蛋白的表达;免疫荧光法和激光共聚焦法检测14-3-3ζ在HL-60和HL-60/VCR亚细胞中的定位。采用将小干扰RNA(siRNA)通过脂质体LipofectamineTM2000介导,瞬时转染HL-60和HL-60/VCR细胞,以观察细胞生长的变化。细胞增殖指标采用生长曲线和细胞周期测定法测定。采用RT-PCR和Western blot方法检测Pgp、14-3-3ζ以及抗凋亡分子BCL-2、MCL-1表达的变化。结果表明,mdr1 mRNA和Pgp仅在HL-60/VCR细胞中高表达。与HL-60细胞相比,除了14-3-3σ之外,其他14-3-3亚型均在HL-60/VCR细胞中高表达,尤其是14-3-3ζ同时伴有BCL-2和MCL-1高表达。另外,研究发现14-3-3ζ主要定位于细胞浆和核。通过RNA干涉抑制14-3-3ζ的表达能抑制HL-60和HL-60/VCR细胞的生长,下调BCL-2和MCL-1蛋白。结论:14-3-3ζ可能通过BCL-2和MCL-1介导调控HL-60和HL-60/VCR细胞的增殖,是治疗难治复发AML的潜在新靶点。

《细胞工程》教学面临的问题与教学改革尝试

针对细胞工程课程教学中存在着学员基础单一、课堂讲解印象浅、实验难度大、重点不易突出等问题。采取启发式教学、灵活调整课时、示教与动手结合、开展课堂讨论等方法．提高了教学效果。

细胞与组织培养教学改革实践与思考

细胞与组织培养是基础医学的基础课程之一,在医学的发展中,起着促进理论与实践、基础研究与临床应用之间相互转化的重要作用。总结近几年的教学改革实践,探讨了教学内容、教学手段、课时安排、实验课设计等课程要素在提高教学质量和学生科研实践能力方面的意义和效果。

次声作用对小鼠骨髓多染性红细胞微核的影响

目的 研究次声对小鼠骨髓细胞染色体的损伤效应 .方法 BAL B/ c小鼠经 16 Hz,12 0 d B,2 h· d- 1 的次声分别作用 1,3,7,10 d后取股骨 .通过 PCE- MNT法和骨髓细胞染色体制备 ,检测并观察多染性红细胞微核率和分裂相染色体的变化 .结果 与对照组 (雄鼠 :0 .2 6‰ ,0 .35‰ ,0 .41‰ ,0 .40‰ ;雌鼠 :0 .2 6‰ ,0 .32‰ ,0 .38‰ ,0 .33‰ )相比 ,次声组 (雄鼠 :0 .45‰ ,0 .6 0‰ ,0 .81‰ ,0 .85‰ ;雌鼠 :0 .42‰ ,0 .6 0‰ ,0 .92‰ ,0 .72‰ )的平均微核率增加显著(P<0 .0 5 ) .次声组平均微核率的增幅随作用天数的延长而显著增加 (P<0 .0 5 ) ;雌雄小鼠间的平均微核率无显著差异(P>0 .0 5 ) .骨髓细胞分裂相检测明显可见有染色体结构畸变现象 .结论 次声作用对小鼠骨髓多染性红细胞遗传损伤显著 .在本实验条件下 ,次声作用存在时间累积效应 ,雌雄小鼠对其反应敏感性相同 .

雷帕霉素对急性髓系白血病细胞系HL-60和HL-60/VCR生长的抑制作用

为了探讨mTOR抑制剂雷帕霉素对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia;AML)细胞的增殖和药物敏感性的影响。以AML细胞株HL-60和多药耐药HL-60/VCR细胞系为研究对象,采用MTT法测定生长曲线和流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测P糖蛋白(P-glycoprotein,Pgp)的表达。结果显示:与空白对照组细胞比较,雷帕霉素能抑制HL-60和HL-60/VCR细胞生长增殖(p<0.05),且随着浓度升高,增殖抑制率逐渐增高,24-72小时的细胞增殖抑制率随着时间的延长而有所增高(p<0.05),同时可阻滞细胞从G1期到S期的细胞周期转换。雷帕霉素抑制HL-60/VCR细胞的Pgp蛋白的表达。与柔红霉素单独应用相比,雷帕霉素50nmol/L、100nmol/L与柔红霉素联合应用使HL-60和HL-60/VCR细胞增殖抑制率明显增高(p<0.05),尤其是当先加雷帕霉素,而24小时后再加柔红霉素时。结论:mTOR抑制剂雷帕霉素对HL-60和多药耐药的HL-60/VCR细胞的生长均有抑制作用,除伴G0/G1期阻滞外,还增加细胞对柔红霉素的敏感性,这为临床难治性AML治疗提供新的治疗手段。

构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体并在HEK293-16工程细胞株中定点整合表达

目的:构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体,并在HEK293-16工程细胞株中定点整合表达。方法:用PCR法扩增肝癌相关抗原HAb18G胞外段基因,SacI/NotI双酶切后插入真核表达载体pCEL2f中,构建EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体基因的重组表达载体pCEL2f/HAb18GEF,并经酶切和测序验证。将此重组表达载体与POG44载体(按1∶9的比例混合后),在阳离子脂质体介导下共转染HEK293-16工程细胞,用潮霉素B筛选定点整合表达EpoR/LR-F3/HAb18GEFcDNA的细胞克隆。用间接免疫荧光染色法、流式细胞术及Zeocin致死试验,检测并验证稳定表达株中EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体的表达。结果:成功地构建pCEL2f/HAb18GEF真核重组表达载体,共转染后EpoR、HAb18GEF均高效表达于转染的HEK293-16细胞的胞膜上。经潮霉素B筛选得到12株可融合高表达EpoR/LR-F3/HAb18GEF的稳定株,其表达EpoR的阳性率为99.93%,平均荧光强度(MFI)为1036.39,表达HAb18GEF的阳性率为99.51%,MFI为652.72,且可被Zeocin致死。结论:成功地建立了表达EpoR/LR-F3/HAb18GEF嵌合受体的HEK293-16工程细胞株,为进一步利用哺乳动物蛋白质-蛋白质相互作用陷阱(MAPPIT)系统筛选HAb18G的作用受体奠定了基础。

转移抑制基因及其对肿瘤细胞信号转导的影响

转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因之一。肿瘤转移的机制还没有完全研究清楚。一类新的基因——转移抑制基因——成为肿瘤转移研究新的方面,并有可能成为新的治疗方法。目前已经确定了8个抑制肿瘤转移而不影响肿瘤发生的基因,它们影响一些重要的信号转导通路,包括MAPK,RHO,RAC和G蛋白耦联和酪氨酸激酶受体通路,对于肿瘤治疗具有重要的意义。

荧光显微成像在医学细胞生物学实验教学中的应用探索

医学细胞生物学是医学院校本科生的重要基础学科之一,其实验课程教学工作的改革与创新具有重要意义。本文深入分析了医学细胞生物学实验课程现状,认为课程普遍存在目的不明确、内容不新颖、缺乏整体性、临床联系少等问题。荧光显微成像技术是细胞生物学研究中的关键技术,利用这一技术设计具有整体性的科研实验对于培养医学生操作能力和科研素养具有重要意义。顺铂(cisplatin)为当前肿瘤联合化疗中最常用的药物之一,由于其抗癌机制涉及细胞增殖、细胞凋亡、细胞骨架等一系列细胞生物学知识,且与临床联系紧密,非常适合用于综合性实验设计。实验方案拟使用BrdU染色、Hoechst33258染色及鬼笔环肽染色法,分别检测人肺癌细胞系A549顺铂处理后细胞增殖、细胞凋亡及细胞骨架重排情况。实验完成后,鼓励学生通过查阅文献得出综合的实验结论。希望能够通过科研与教学相融合的方式,更好的激发医学生的学习热情,提高医学生的科研素质,培养全方位的医学人才。

免疫亲和层析纯化大肠癌相关抗原

目的 :从培养的大肠癌细胞Hce 86 93中分离纯化并鉴定大肠癌相关抗原。方法 :利用流式细胞术选择高表达大肠癌相关抗原的大肠癌细胞系 ,分别用单去污及三去污裂解液裂解细胞。然后用 5株抗大肠癌单克隆抗体 (mAb)CYL 1～CYL 5进行Westernblot,分析与大肠癌细胞结合反应最强的mAb。以此mAb作为配基进行亲和层析纯化大肠癌相关抗原 ,纯化结果利用Westernblot法进行鉴定。结果 :大肠癌细胞系Hce 86 93上相关抗原的表达量最高 ;抗大肠癌mAbCYL 2与Hce 86 93的结合力最强。纯化所获与CYL 2特异结合的大肠癌相关抗原 ,Mr 约为 13× 10 3 。该抗原由Mr 为 6 0× 10 3 和70× 10 3 两种亚基组成。结论 :利用mAbCYL 2进行亲和层析 ,从大肠癌细胞系Hce 86 93中获得纯化的肿瘤相关抗原。