骨髓来源间充质干细胞培养上清液减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:观察经尾静脉输注骨髓间充质干细胞培养上清液(MSCs CdM)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制。方法:采用全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代时观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志,并且收集上清液用超滤离心管进行离心。30只BALB/c小鼠随机分为对照组、LPS模型组和MSCs CdM治疗组。对照组腹腔内注射生理盐水(0.01 mL/g),LPS组和MSCs CdM治疗组腹腔内注射LPS(5 mg/kg,0.01 mL/g)制备急性肺损伤模型。造模1 h后经尾静脉输注MSCs CdM(MSCs CdM治疗组)或生理盐水(LPS组或对照组)300μL。6 h后处死小鼠,留取标本检测肺组织病理形态学、肺组织湿干重比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、血清及BALF中细胞因子水平和肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与对照组比较,LPS处理后肺组织病理损伤严重,BALF中蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著升高。与LPS组比较,MSCs CdM治疗组肺组织病理损伤程度减轻,BALF中蛋白、血清TNF-α和IL-6含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著降低,而BALF中白细胞介素10(IL-10)和角质细胞生长因子(KGF)水平显著高于LPS组和对照组。结论:骨髓间充质干细胞培养上清液可有效减轻LPS诱导的急性肺损伤,其作用机制可能与其调节肺部TNF-α、IL-6、IL-10和KGF的水平有关。

白藜芦醇对脂多糖诱导的急性肺损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对脂多糖(LPS)造成的急性肺损伤的保护作用及其分子机制。方法用LPS气管内滴注构建小鼠急性肺损伤的模型。HE染色法观察肺病理形态学变化,ELISA法检测小鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量,用Real-time PCR和ELISA分别检测硫氧还蛋白mRNA和蛋白水平表达。结果病理形态学显示白藜芦醇可明显减轻LPS诱导的肺损伤,并显著减少TNF-α,IL-6的含量。细胞水平白藜芦醇在50～100μg/ml范围内可以明显提高LPS刺激后的细胞活力。Real-time PCR和ELISA检测结果表明:白藜芦醇能明显提高动物肺组织和细胞中硫氧还蛋白的mRNA和蛋白水平。结论白藜芦醇可以减轻LPS诱导的肺损伤,其机制可能与提高Trx1有关。

AngⅡ及其受体AT1在海水吸入型肺损伤中的作用及机制的研究

目的 观察海水吸入型肺损伤大鼠肺组织中的血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）及其受体血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1）的变化情况,以及核因子κB（NF-κB）信号传导通路在海水吸入型肺损伤中的作用及其机制.方法 40只SD大鼠随机分为正常组、海水处理3h组、海水处理6h组和海水处理12 h组,每组10只,采用气管内滴注海水（3 ml/kg）的方法制造海水吸入型肺损伤模型.分别用放射免疫分析方法和ELISA法检测肺组织中AngⅡ、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-1β的含量,并且用RT-PCR和Western blot方法检测肺组织中AT1和NF-κB的表达情况.结果 肺组织病理检查结果显示,不同时间的海水处理后可造成严重的肺损伤,其中海水处理6h后大鼠肺部损伤最严重.海水处理后AngⅡ的含量和AT1的表达明显升高;NF-κB在正常组表达很少,海水处理后明显升高.与此同时,IL-1β和TNF-α在海水处理3h后含量迅速增加,在海水处理6h后达高峰.结论 海水吸入可引起急性肺损伤,AngⅡ通过激活AT1和NF-κB引起炎症反应参与海水吸入型肺损伤的发生发展.