MAGE-E1a荧光真核表达载体的构建

目的 :构建MAGE -E1a与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体 ,为研究肿瘤疫苗中树突状细胞的作用奠定基础 .方法 :应用基因重组技术 ,将反转录PCR得到的MAGE -E1a基因克隆入荧光真核表达载体 pEGFP -N3中 ,用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌 ,阳性重组子经SalⅠ和KpnⅠ双酶切分析、PCR鉴定 .结果 :MAGE E1a基因成功地亚克隆至真核表达载体pEGFP -N3中 ,获得MAGE E1a/pEGFP N3重组质粒 .结论 :MAGE E1a基因克隆入pEGFP N3质粒 ,成功构建MAGE E1a/ pEGFP N3荧光真核表达载体 ,解决了MAGE E1a基因转染的定位问题 。