芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠单个核细胞中细胞间黏附分子1及血管细胞黏附分子1mRNA表达的影响

目的:黏附分子的表达与动脉粥样硬化的发生发展有关。观察芪丹通脉片对实验性动脉粥样硬化大鼠外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA表达的影响。方法:模型构建、样品采集与分析分别于2003-03/06,2003-06/09在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成。将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组:模型组、空白对照组、阳性对照辛伐他汀组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组,每组12只。采用高脂饮食配合口服维生素D3建立大鼠动脉粥样硬化模型,各组动物灌胃给药。采用半定量反转录聚合酶链反应的方法检测各组动物外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA的表达,分析造模及各药物组细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA表达的变化。结果:72只大鼠均纳入实验结果分析。细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1基因的表达:模型组比空白对照组明显增加(1.37±0.08,1.40±0.06,P=0.000);辛伐他汀组及各中药组均明显低于模型组(P=0.000),且芪丹通脉片高剂量组的作用明显优于芪丹通脉片低剂量组(0.40±0.06,0.40±0.05;0.61±0.07,0.67±0.05,P=0.003,0.007)。结论:高脂饮食能使细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达明显增加,而芪丹通脉片各剂量组可以不同程度地下调血管壁内细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达。而且芪丹通脉片高剂量组的作用效果明显优于低剂量组。

Survivin及其剪接变异体在脑胶质瘤中的表达

目的探讨凋亡蛋白抑制因子Survivin及其剪接变异体SurvivinΔex3、Survivin2B在脑胶质瘤发生发展中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测Survivin及其剪接变异体SurvivinΔex3、Survivin2BmRNA在62例脑胶质瘤和10例正常脑组织标本中的表达水平。结果Survivin、SurvivinΔex3及Survivin2BmRNA在脑胶质瘤中表达阳性率分别为67.7%、30.6%和17.7%,三者在正常脑组织中均无表达;Survivin和SurvivinΔex3mRNA表达阳性率在脑胶质瘤及正常脑组织之间分别具有极显著差异(P=0.000<0.01)和显著差异(P=0.010<0.05);SurvivinmRNA表达阳性率在低恶性度和高恶性度脑胶质瘤之间以及脑胶质瘤不同病理级别间分别具有极显著差异(P=0.002<0.01,P=0.004<0.01)。结论Survivin在脑胶质瘤发生发展过程中具有重要作用,其剪接变异体SurvivinΔex3、Survivin2B也发挥一定作用;Survivin可作为脑胶质瘤生物治疗的一个良好分子靶点。

转染bcl-2基因对心肌细胞活力的影响

目的 :研究转染抗凋亡基因bcl 2对心肌细胞活力的影响 .方法 :提取含有人bcl 2基因的逆转录病毒真核表达载体 pDOR -SB质粒 ,用脂质体介导的基因转染法分别将pDOR -SB质粒和pDOR质粒 (不含bcl 2基因 )转染心肌细胞 ,观察转染心肌细胞在缺氧环境下的存活能力 .结果 :①原位杂交可见bcl 2基因转染了心肌细胞 ; ②转染bcl 2基因能明显提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力 ,提高对缺氧的耐受力 .结论 :转染bcl

端粒酶RNA特异性核酶抑制卵巢癌细胞端粒酶的活性

目的 研究端粒酶 RNA特异性核酶对卵巢癌细胞活性的抑制作用 .方法 用脂质体法将构建好的核酶逆转录病毒载体转染至卵巢癌 HO- 8910细胞 ,以 MTT比色法检测细胞的生长 ,应用流式细胞仪分析细胞周期细胞 ,观察细胞的增殖情况 ,同时扩增端粒重复序列 ,结合杂交分析 ,检测细胞的端粒酶活性 .结果 MTT检测发现转染核酶后的细胞生长的潜伏期延长 (48→ 72 h) ,对数生长期减缓 (4→ 5 d) ,流式细胞仪结果显示其 G1期比例明显增高 (70 .0 %→ 80 .5 % ,P<0 .0 1) ,S期细胞比例明显降低 (19. 0 %→ 13. 7% ,P<0 .0 1) ,细胞增殖下降 ,细胞的端粒酶活性亦降低 .结论 端粒酶 RNA特异性核酶能抑制卵巢癌细胞端粒酶活性 ,抑制细胞增殖 .

端粒酶特异性核酶抑制宫颈癌细胞的作用

目的 :研究端粒酶RNA特异性核酶对宫颈癌细胞活性的影响。方法 :通过脂质体将核酶转染至宫颈癌Hela细胞 ,以G4 18筛选细胞 ,经斑点杂交提示转染成功后 ,检测细胞活力及细胞周期变化 ,测定细胞端粒酶活性 ,观察细胞的增殖情况。结果 :试验组细胞的活力较对照组明显减弱。转染后细胞受阻于G1期的细胞明显增多 ,S期细胞比例明显降低 ,P <0 0 1。转核酶细胞端粒酶活性较对照组明显减低 ,转染空载体的细胞端粒酶活性与未转染细胞比较则无明显变化。结论 :端粒酶RNA特异性核酶可抑制宫颈癌细胞端粒酶活性 ,抑制细胞增殖 。