中药配伍对血清阿魏酸临床生物利用度的影响

目的 :研究中药配伍对方剂吸收入人体内成分生物利用度的影响。方法 :健康自愿者一次口服川芎汤 ( 1g/kg)、川芎芍药汤 ( 2g/kg ,两药之比为 1∶1)、冠心Ⅱ号汤 ( 3g/kg ,其中川芎为 0 5g/kg)后 ,用建立的HPLC法测定吸收入循环血中的阿魏酸 (FA)血药浓度—时间曲线 ,用梯形法计算血药浓度—时间曲线下面积 (AUC) ,然后比较AUC值。结果 :3组的血药浓度时间曲线均为双峰现象。与川芎汤的AUC〔( 15734 88± 7737 97)ng/ (min·ml)〕比较 ,川芎配伍芍药后AUC〔( 5717 92± 612 4 63)ng/ (min·ml)〕值明显降低 (P <0 0 5) ,而川芎配伍在冠心Ⅱ号 (川芎的剂量仅为川芎汤的 50 % )中的AUC〔( 80 72 0 0±4 4 2 4 31)ng/ (min·ml)〕相对不低。结论 :冠心Ⅱ号中药不影响FA的生物利用度 。

四君子汤灌胃大鼠甘草甜素血药浓度测定及其药代动力学研究

目的:观察四君子汤灌胃大鼠体内甘草甜素的药代动力学特征,为复方效应成分动力学研究提供实验依据。方法:建立反相HPLC测定大鼠血浆中甘草甜素含量的方法,不同时间点取大鼠四君子汤灌胃后血浆并分别测定其GL浓度,得其药时曲线,经3P87软件处理数据得其药动学参数。结果:大鼠血浆中 GL浓度在1.224 μg/ml至38.655 μg/ml,线性关系良好,四君子汤灌胃甘草甜素在大鼠体内药时过程符合二房室开放模型,吸收和分布较为迅速,排泄缓慢。结论:所建立的反相HPLC法灵敏、可靠、快速,可较好地用于甘草甜素体内的吸收代谢研究以及甘草制剂等的测定,本实验研究为甘草及其复方药动学研究奠定了基础。

甘草甜素在脾虚大鼠血浆中浓度测定的高效液相色谱法及其药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中甘草甜素反相高效液相色谱法（ＨＰＬＣ），并研究脾虚大鼠灌胃甘草甜素的药物动力学（ＰＫ）。方法以联苯为内标，流动相为：甲醇一水一醋酸（８０：１９：１，ｖ／ｖ），固定相为 ＯＤＳ－３色谱柱（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５μｍ），检测波长：２５０ｎｍ，流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ。Ｗｉｓｔａｒ大鼠利血中每日肌肉注射０．３ ｍｇ／ｋｇ，连续１４ ｄ造成脾虚模型。空腹１４ ｈ，灌胃甘草甜素并分别在５、１０、２０、３０、０、１２０和 １８０ ｍｉｎ取血，获得血浆，测定血药浓度一时间数据，以 ３Ｐ８７软件包进行拟合。结果本方法最低检测限为 ２ ｎｇ，日间和日内 ＣＶ％均＜ １０％，回收率在 ９６．２０％和 １０３，２１％之间，在 ４０．８～ １４６７． ８ μｇ／ｍＬ范围内符合良好的线性关系。ＰＫ属于开放性二室模型。结论本法简便、快速、灵敏而准确，适用于大鼠血浆ＧＬ的测定。

中药方剂药动学研究中亟待解决的三大问题

简要阐述目前方剂药动学研究中需要迫切解决的三个问题 :①选择合理的化学分析方法 ;②确定科学的血清预处理方法 ;③样本来源问题。

高效液相色谱直接测定沸水浴处理人血清中冠心Ⅱ号来源的阿魏酸

目的：探讨建立健康人口服冠心Ⅱ号后吸收入血清成分的临床药动学（ＰＫ）研究的新方法。方法：用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）直接测定５名健康人服冠心Ⅱ号后经沸水浴处理过的血清样品中的阿魏酸（ＦＡ）。分别用二维、三维ＨＰＬＣ和紫外分光光度法定性ＦＡ后，ＦＡ用内标（香豆精）法定量。结果：甲醇∶乙酸∶水（３８∶０３∶６１７）为流动相，Ｃ１８（ＯＤＳ２）柱（１５０ｍｍ×４６ｍｍ，５μｍ）为固定相时，ＦＡ的最低检测限６ｎｇ（Ｎ／Ｓ＝３）；沸水浴１０ｍｉｎ的最低检测血清浓度是２０２μｇ／Ｌ，线性范围３３７～２１５６８μｇ／Ｌ，ｒ＝０９９９３；方法平均回收率（９３５９±２３６）％，日间及日内精密度ＲＳＤ值均＜８４４％。结论：与乙睛法比较，本法灵敏、快速、简便、精确、专一、价廉、无毒和重复性好。

三维HPLC法同步测定犬血浆中的葛根素及阿魏酸

以对 羟基苯甲酸为内标 ,甲醇 水 醋酸 (5 6 2 5mol/L ) (39∶5 8∶3 ,v/v)为流动相 ,InertsilODS 3色谱柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为固定相 ,流速 0 9mL/min。以二极管阵列检测器同时获取 2 48nm和 32 1nm两个波长下的数据 ,并通过三维图观察其紫外吸收定性 ,以沸水浴法处理血浆样品。结果 :葛根素和内标及阿魏酸分离完全 ,葛根素在 0 2 35 4～ 1 883μmol/L范围内线性关系良好 (r =0 9943) ,变异系数 <10 % ,平均回收率为 10 1 0 2 % ,最低检测限为 0 33ng ,最低检测浓度为 0 0 396 μmol/L;阿魏酸则在 1 0 341～ 5 35 6 μmol/L范围内线性关系良好 (r =0 9942 ) ,变异系数 <10 % ,平均回收率为 10 0 88% ,最低检测限为 0 45ng ,最低检测浓度为1 115 9μmol/L。

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的甘草酸铵

目的 :建立反相高效液相色谱法测定甘草甜素粉剂和四君子汤灌胃大鼠血浆中的甘草酸铵。方法 :以联苯为内标 ,甲醇 -水 -醋酸 (80∶19∶1)为流动相 ,采用ODS - 3色谱柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,检测波长 :2 5 0nm ,流速 :1 0mL·min-1。结果 :最低检测限为 2ng ,最低检测浓度为 0 2 2 8μg·mL-1,日间和日内RSD <10 % ,回收率为 92 46 %～10 3 2 % ,RSD为 3 8%～ 6 0 % ,在 1 2 2 4～ 38 6 μg·mL-1和 40 8～ 146 8 8μg·mL-1范围内均呈良好的线性关系。结论 :本法简便、快速、灵敏而准确 ,适用于大鼠灌胃不同甘草酸铵制剂后血浆中甘草酸铵的测定 ,为“复方效应成分动力学”研究奠定了方法学基础。

中药对胃肠激素及胃肠运动的调节作用

中药对中医脾胃病的治疗有着极为丰富的经验和比较完整的理论,而中医脾胃病证有与西医的胃肠运动障碍疾病相似或相近的临床表现.近年来,对胃肠运动的研究迅速发展,中药对胃肠运动的实验研究已广泛开展,而胃肠激素又是调节胃肠运动的重要因素,人们在研究中药对胃肠运动的调节过程中,越来越关注胃肠激素在其中的作用,胃肠激素及其相应的胃肠激素受体可能是调理胃肠运动的新途径.1 中药与胃肠运动胃肠的正常功能有赖于其分泌、肌电活动及机械活动之间的协调,评估其运动功能包括测定胃肠排空。

RP-HPLC测定大鼠服用大川芎丸提取物后血浆中的天麻素

目的 建立测定大鼠血浆中天麻素的方法。方法 应用无水乙醇沉淀蛋白 ,醇溶液用N2 气流吹干后用RP -HPLC直接测定。以Diamonsil(TM)钻石C1 8色谱柱 (5 μm ,4 .6mm× 15 0mm)为固定相 ,乙腈 -水 -磷酸 (2 .6 4∶97.36∶0 .2 )为流动相 ,流速1.0ml·min- 1 ,检测波长 2 2 1nm。间苯三酚做内标。结果 天麻素的最低检测限为 0 .2ng ,最低血浆检测浓度为 4ng·ml- 1 ,线性范围 4～ 16 0 0 0ng·ml- 1 (r=0 .9988)。平均加样回收率 94 .6 %。结论 该方法灵敏、快速、简便。

中药药动学血样预处理方法回顾与展望

综述了以血药浓度法研究中药药动学中的血样预处理方法并作简要评价 ,特别介绍了水浴法作为方剂血样预处理的新方法 ,为中药药动学及中药药效物质基础研究提供参考。

HPLC法测定血瘀证患者口服川芎丹参煎剂后阿魏酸血药浓度

目的 对以往建立的人血清中阿魏酸浓度测定的 HPL C法加以改进 ,并测定了血瘀证患者口服川芎丹参煎剂后阿魏酸的血药浓度。方法 以香豆素为内标 ,甲醇 -水 -醋酸 (40∶ 5 9.7∶ 0 .3)为流动相 ,Diamonsil(TM)色谱柱 (15 0 m m× 4 .6 m m,5μm ) ,流速 1.0 m L / min,以二极管阵列检测器测定 32 2 nm波长下的数据 ,以沸水浴法加甲醇处理血清样品。结果 阿魏酸和内标分离完全 ,阿魏酸在 32 .18～ 96 5 .38ng/ m L 范围内线性关系良好 (r=0 .9981) ,日内和日间 RSD<10 % ,平均回收率为 (99.3± 5 .4 ) % ,最低检测限为 1.6 ng/ m L,最低检测浓度为 15 .7ng/ m L。结论 此法简单、快速、灵敏而准确 。

RP-HPLC法同时测定大鼠血中甘草甜素和甘草次酸

目的 建立一个同时测定甘草甜素、甘草次酸血浆浓度变化监测的方法 ,进一步用于“脾主药动学”假说的验证 .方法 采用内标定量的反相高效液相色谱法 ,以甲醇 -水 -醋酸 (88∶ 11∶ 1)为流动相 ,ODS- 3柱 (15 0 mm× 4.6 mm,5μm)为固定相 ,在紫外 2 5 0 nm检测 .结果 GL,GA在此线性范围内 ,线性关系良好、精密度较高 .结论 本方法具有简便、灵敏、快速而准确的特点 ,适用于注射 GL制剂或口服中药复方前后 GL和 GA的体内、体外的药代动力学研究 。

人血清中阿魏酸和川芎嗪同时测定的HPLC法

目的 为论证“方剂体内 /血清成分谱”概念 ,建立同步测定人血清中阿魏酸、川芎嗪的HPLC法。方法 以香豆素为内标 ,甲醇 水 醋酸 (40∶5 9.7∶0 .3 ,v/v)为流动相 ,InertsilODS 3色谱柱 (15 0mm× 4.6mm ,5 μm)为固定相 ,流速 1.0mL/min。以二极管阵列检测器同时获取 32 2nm和 2 79nm不同波长下的数据。结果 阿魏酸、川芎嗪和内标分离完全 ,阿魏酸在 (40 .16～ 80 32 )ng/mL范围内线性关系良好 (r=0 .9978) ,变异系数≤ 10 % ,平均回收率为 10 0 .3 % ,最低检测限为2 .5 1ng ,最低检测浓度为 2 5 .1ng/mL ;川芎嗪在 (39.4～ 7880 )ng/mL范围内线性关系良好 (r =0 .990 6 ) ,变异系数≤10 % ,平均回收率为 96 .37% ,最低检测限为 1.97ng ,最低检测浓度为 2 3.6 4ng/mL。

脾虚大鼠IMC-胃肠运动-Mot间的关系

目的探讨脾虚证大鼠 IMC-胃肠运动-Mot 含量间的关系,为脾虚证本质提供客观依据.方法用传感器和双极银丝电极同步、动态地观察7 d 和14 d 脾虚证(pixu)大鼠胃和十二指肠消化间期综合肌电(IMC)电活动的及其机械运动,以及用放射免疫分析法(RIA)分析下丘脑、胃窦、十二指肠组织及血浆中的胃动素(Mot)的含量.结果与对照组比较,脾虚早期十二指肠Ⅰ相时程缩短(1.9±0.7 vs 4.2±0.3 min),Ⅱ相时程延长(6.5±0.4 vs 4.3±0.7min),脾虚晚期十二指肠Ⅱ相时程缩短(1.1±0.3 min).脾虚早期十二指肠收缩振幅(103.5±9.7 vs 78.9±6.3 mV/min)和收缩频率(21.4±1.9 vs 17.3±0.9次/min)均明显高于正常大鼠,而脾虚晚期表现为十二指肠收缩振幅(106.9±10.3mV/min)明显高于正常大鼠,收缩频率(11.7±1.2次/min)则明显减低.无论脾虚早期或晚期胃 IMC Ⅰ相时程延长(8.2±0.9和6.2±1.1 vs 3.5±0.8 min,运动功能均减弱(9.2±1.8和5.2±0.2 vs 13.4±1.3次/min,75.2±10.1和42.4±9.1vs 110.2±9.8mV/min).脾虚早期下丘脑、胃窦、十二指肠、空肠组织及血浆中 Mot 的含量升高(76.4±8.0,37.2±7.3.51.2±1.9,63.2±2.2和99.8±6.5 vs 53.2±9.3,29.5±7.6,35.6±3.0,46.6±7.0和82.7±9.3 ng/L),而脾虚晚期却下降(32.5±5.5,21.6±6.2,27.9±1.7,32.3±5.1和64.5±5.4 ng/L,P<0.05～P<0.01).结论脾虚程度不同,其各部位的 Mot 含量,十二指肠 IMC 的Ⅰ,Ⅱ相持续时间及机械运动不同;脾虚时 IMC 十二指肠运动-Mot 含量间存在正相关关系(r=0.9937),而 IMC 一胃运动-Mot 含量间为负相关关系(r=-0.9986).此体现了脾虚证在发展过程中由轻到重、由初期到久病的不同阶段,为认识脾虚证提供了定性定量客观依据.

一种新概念药物:中药血清靶成分设想

在参考国内外相关研究的基础上，我们提出了将中药血清靶成分创制成新概念药物的设想。该设想继承了中药方剂疗效等中医药理论，并直接涉及了方剂药效物质基础的关键问题。新概念药物的多元性成分与其相应药效一致。

方剂体内/血清成分谱与靶成分概念的提出及意义

为了在方剂药效物质及其动力学研究中取得进展．在国内外相关研究和我们的有关理论与实验积累的基础上，分别提出和讨论了方剂进入体内成分状况的概念与意义．方剂体内／血清成分谱与靶成分这一术语，因为较吻合现代科学语汇，其涵义能较好解决该领域基本难题和能与中医药理论有机结合．该概念对于方剂药效物质及其动力学研究与发展具有重要意义．

小鼠p27^(Kip1)基因的克隆及与外周B细胞凋亡和生存的关系

目的:克隆小鼠的p27Kipl基因,并以此为探针分析p27Kipl在外周血B细胞中的表达,以及其在抗原受体和CD40介导的抑制和促进增殖信号中的作用。方法:从培养的B细胞中提取总RNA,用RT-PCR扩增并克隆p27Kipl基因。用流式细胞仪检测B细胞凋亡。用Northern blot观察p27Kipl mRNA的表达水平。结果:成功地克隆了小鼠的p27Kipl基因。发现抗原受体交联在引起外周血B细胞凋亡之前,出现p27Kipl表达上调,若同时激活CD40则使p27Kipl表达降低,B细胞也免于凋亡。用针对p27Kipl的反义寡核苷酸处理,可阻断抗原受体交联引 起的外周血B细胞凋亡。结论:p27Kipl可能在抗原受体信号 介导的B细胞凋亡和CD40信号介导的B细胞生存中发挥一 定的作用。

麻醉犬心房内注射复方川芎汤后血清中川芎嗪药时曲线双峰与血流动力学效应的关系

目的 探讨中药大复方体内作用规律 ,为“证治药动学”6要素中“定性定量论”提供进一步的实验依据 .方法 分别从冠状动脉定量狭窄犬和对照犬的右心房内给予复方川芎水提液 (0 .6 g· kg- 1 ) .结果 在动脉血药时 (c- t)曲线上出现了川芎嗪 (TMP)的双峰现象 ;冠状动脉狭窄犬的 TMP第 2峰显著地高于对照犬 ;而这种增高的第 2峰又与 TMP的血流动力学效应相关 .