多媒体结合PBL教学在八年制学员心血管外科临床实践中应用与探讨

心血管外科专业性强,涉及知识面广且抽象,医师学习曲线长,且患者病情变化快,死亡率相对较高,风险相对较大。由于上述特点,应用传统的讲述式的教学方法对处于临床实践阶段的八年制学员的教学效果不甚理想。近年将PBL教学结合多媒体直观教学法应用于八年制医学生的临床实践教学,使学员的临床思维能力、获取新知识能力、运用获取知识分析、解决实际问题的能力以及表达能力得到了全面的锻炼,取得了良好的教学效果。

组织工程瓣膜的种子细胞:犬隐静脉间质细胞体外钙化实验

目的:观察作为组织工程瓣膜种子细胞的隐静脉间质细胞的体外钙化机制。方法:实验于2003-05/2004-08在解放军第四军医大学全军心血管外科研究所实验室完成。分离培养并鉴定犬后肢隐静脉间质细胞,取3～6代细胞,分为钙化组和对照组。钙化组在钙化条件培养液中培养,对照组在标准培养液中培养。15d后,行vonkossa染色、钙沉积、碱性磷酸酶及上清液骨钙素测定。结果:犬隐静脉间质细胞经Ⅷ因子、α-SMA、Venmintin免疫组化染色鉴定,主要有平滑肌细胞、成纤维细胞和肌纤维母细胞组成。培养15d后,钙化组vonkossa染色呈强阳性,对照组呈弱阳性。钙化组钙沉积比对照组高27倍(5.384±0.443,0.192±0.024,P<0.01),碱性磷酸酶高2.13倍(9.611±0.639,3.069±0.178,P<0.01),骨钙素于培养第6天开始升高,至第12天到达高峰,然后有轻度下降。结论:体外培养的犬隐静脉间质细胞具有向成骨细胞表型转化的潜能,在钙化条件培养下具有成骨细胞的表型,有明显的钙化现象发生。

环氧氯丙烷处理生物瓣膜材料的体外钙沉积实验

目的:研究环氧氯丙烷(epoxychloropropane,EC)处理对生物瓣膜在体外钙沉积实验中的防钙化作用以及体外钙沉积实验和动物皮下包埋实验钙化模型的比较,探究EC处理生物瓣膜防钙化的机制。方法:实验于2003-03/2004-04在解放军第四军医大学西京医院全军心血管外科研究所实验室完成。采用体外钙沉积和大鼠皮下包埋两种钙化模型,对新鲜猪主动脉瓣膜(新鲜瓣膜组)、戊二醛处理(戊二醛处理组)、EC处理(EC处理组)以及戊二醛、EC联合处理(戊二醛+EC处理组)的猪主动脉瓣膜进行体内、体外钙化研究,体外钙沉积实验中采用1.5倍血浆离子浓度的液体进行模拟钙沉积实验,体内实验动物为SD大鼠24只,随机分为3组(2周组,4周组,6周组),每组8只,分别于脊柱两侧头端尾端4个部位包埋各组瓣膜各1例,分2,4,6周分别取出瓣膜,通过原子吸收法测定钙含量。结果:在体外钙沉积实验中各组瓣膜的钙化程度在第3,7,14天时递增,最终在第21天EC处理组和戊二醛处理组瓣膜的钙含量明显高于新鲜瓣膜组(t=5.662,16.436,P<0.05);EC处理组和戊二醛+EC处理组瓣膜的钙含量明显低于戊二醛处理组P<0.05)。大鼠皮下包(埋实验第6周戊二醛处理组和戊二醛+EC处理组瓣膜的钙化含量犤(380.8±67.3),(84.0±9.4)μmol/g犦明显高或低于新鲜瓣膜组犤(173.2±44.7)

新型人工心脏辅助装置材料组织炎症反应观察

目的观察用于制造人工心脏辅助装置的硬段相、软段相改性新型聚氨酯材料和未改性医用聚氨酯材料的组织炎症反应程度。方法选用材料硬度90A的硬段相改性医用聚氨酯(A组)、软段相改性医用聚氨酯(B组)和未改性医用聚氨酯材料(C组)组装成人工心脏辅助装置,建立犬心脏辅助转流模型。观察转流不同时间后心、肝、脾、肺、肾标本组织学变化,并测定不同转流时间后血液炎性因子(IL-6、IL-8、TNFα)含量。结果转流72 h后C组组织炎症充血、水肿,炎症反应明显强于A、B两组。48 h内体内IL-6、IL-8、TNFα炎性因子水平呈升高趋势,C组明显高于A、B组。48 h后各组炎性因子水平趋于稳定。结论硬段相改性医用聚氨酯材料比未改性的常见医用聚氨酯材料组织炎症反应轻微,具有良好的血液相容性,可作为人工心脏辅助装置的首选材料进一步推广应用。

环氧氯丙烷对组织工程瓣去细胞支架材料理化性质的影响

目的研究环氧氯丙烷(EC)处理对组织工程心脏瓣膜去细胞支架材料理化性质的影响。方法对EC处理的去细胞组织工程猪瓣支架材料进行胶原酶消化实验,茚三酮实验,血浆蛋白吸附率和血小板黏附率实验,与戊二醛(GA)处理的及未经处理的去细胞猪瓣支架材料进行对照研究,评价EC处理对生物材料理化性质的影响。结果胶原蛋白经EC或GA处理后,抗消化能力显著增加(P<0.01);GA处理后的胶原蛋白再经EC处理后,抗消化能力进一步增加(P<0.01)。胶原蛋白经EC和GA处理后,茚三酮值均明显下降(P<0.01),GA处理后的胶原蛋白经EC处理后,茚三酮值进一步下降(P<0.01)。EC和GA处理胶原蛋白的交联度增加,EC处理能使GA处理的胶原蛋白交联度进一步增加(P<0.01)。EC处理的组织工程瓣膜去细胞支架材料血浆中蛋白质吸附率和血小板黏附率均降低。结论EC处理能够进一步改善组织工程瓣膜去细胞支架材料的理化性质,有利于提高血液相容性和减缓钙化,是组织工程瓣生物支架材料很好的处理方法。

人工心脏辅助装置硬段相改性新型聚氨酯材料的血液相容性

目的:应用硬段相改性的新型聚氨酯材料建立犬心脏辅助转流模型,观察这种用于制造人工心脏辅助装置的新型材料与血液的相容性。方法:实验于2002-03/2004-12在西京医院完成。选取杂种成年犬12只,随机分为硬段相改性新型聚氨酯材料组和未改性医用聚氨酯材料组,6只/组。①两组动物采用戊巴比妥钠肌肉注射麻醉后,气管插管呼吸机辅助呼吸,股静脉置管测中心静脉压及输液,股动脉插入动脉测压管并接生理监护仪有创压换能器,四肢连接监护仪心电标准肢体导联电极。②犬仰卧位,正中切口开胸,悬吊心包,肝素化后于升主动脉插入人工辅助装置血泵主动脉供血管,于左心耳插入引流管,分别连接血泵出入口。为防止出现心律失常,给予利多卡因100mg静推,以自行研制的动力装置给予辅助装置动力支持。③硬段相改性新型聚氨酯材料组选用材料硬度90A的硬段相改性医用聚氨酯,未改性医用聚氨酯材料组选用未改性的医用聚氨酯材料建立犬心脏辅助转流模型,分别测定两组材料表面对血小板的黏附情况。④于左心辅助转流开始后0,1,4,12,24,48,72h检测两组动物游离血红蛋白含量的变化以及纤维蛋白原、白蛋白的吸附情况。结果:实验选取杂种成年犬12只,全部进入结果分析。①两组血小板黏附情况:与未改性医用聚氨酯材料组比较,硬段相改性新型聚氨酯材料组表面血小板黏附数量明显减少犤(12.5±2.7),(5.2±1.2)/视野,P<0.01犦。②两组左心辅助转流后不同时间点游离血红蛋白含量的变化:左心辅助转流4h前两组材料对血液破坏程度均较轻,组间比较基本相似(P>0.05)。4h后未改性医用聚氨酯材料组游离血红蛋白含量明显升高,而硬段相改性新型聚氨酯材料组游离血红蛋白含量上升趋势缓慢(P<0.05)。③两组左心辅助转流后不同时间点吸附纤维蛋白原吸光度值的比较:两组材料随转流时间的延长,对纤维蛋白原的吸附含量均逐渐增加,但硬段相改性新型聚氨酯材料组在左心辅助转流后各时间点吸附纤维蛋白原均低于未改性医用聚氨酯材料组(P<0.05)。④两组左心辅助转流后不同时间点吸附白蛋白吸光度值的比较:两组材料随转流时间的延长,对白蛋白的吸附含量均逐渐增加,但硬段相改性新型聚氨酯材料组在左心辅助转流后各时间点吸附白蛋白均高于未改性医用聚氨酯材料组(P<0.05)。结论:硬段相改性的新型医用聚氨酯材料比未改性的常见医用聚氨酯材料更具有良好的血液相容性,可作为人工心脏辅助装置的首选材料进一步推广应用。

扩张型心肌病纤维化心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原及相关血清指标的变化

目的 了解扩张型心肌病 (DCM)心肌纤维化 、 型胶原改建的病理基础及相关血清指标的变化 ,为防治该病提供新的理论依据 .方法 用病理染色、免疫组化对 7例扩张型心肌病行心脏移植的患者左室心肌和 7例正常心肌进行病理形态学和 、 型胶原免疫组化观察 ,放免法检测血清 型、 型前胶原 (P P、P P、层粘连蛋白 (L N)的含量 .结果 扩心病心肌细胞变性 ,肥大伴局灶性坏死 .心肌间质中胶原纤维弥漫增生 ,排列紊乱 .这是扩心病的主要病理特征 .免疫组化定位发现 、 型胶原在扩心病心肌间质呈明显增生分布 , 型胶原多于 型胶原 (P<0 .0 1) .心肌细胞内亦有 型胶原的阳性表达 .血清 P P,P P,L N均明显增高 (P<0 .0 5 ) .结论 心肌细胞变性、肥大 ,间质胶原大量增生改建是扩张型心肌病心肌纤维化的病理基础 ,也是心功能障碍的主要原因 .

碱性成纤维细胞生长因子对犬隐静脉间质细胞体外培养抗钙化作用

目的观察作为组织工程瓣间质种子细胞的犬隐静脉间质细胞体外培养钙化机制,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对犬隐静脉间质细胞体外培养钙化的抑制作用。方法分离培养犬隐静脉间质细胞,分为正常培养对照、促钙化培养和bFGF培养3组。2周后行von kossa染色,检测细胞层钙沉积、碱性磷酸酶(ALP)活性及上清液中骨钙素(OC)含量,细胞ALP、OC mR- NA表达。结果培养2周后,促钙化组及对照组均有细胞结节形成,bFGF组细胞呈极性密集生长,无结节形成。von kossa染色促钙化组呈强阳性,bFGF组及对照组呈弱阳性。促钙化组钙沉积及ALP活性比对照组均明显增高(5．384±0．443比2．198±0.173,P＜0.01),ALP高2．13倍(9．611±0．639比4.819±0．334,P＜0．01),bFGF使两者均显著降低(0．192±0．024比5．384±0.443,P＜0．01,3．069±0．178比9．611±0．639,P＜0．01)。促钙化组上清液OC含量于第6天始升高,至第12天到达高峰,然后有轻度下降。bFGF组及对照组均维持较低水平。结论体外培养的犬隐静脉间质细胞在促钙化条件下具有成骨细胞的表型,有明显的钙化现象发生,bFGF具有抑制其钙化的作用。