吸烟对T,B淋巴细胞的影响

目的 探讨长期吸烟对免疫系统影响的机制 .方法 分别于 3 m o和 9mo对吸烟组及对照组大鼠行抗体形成细胞 ( AFC)试验和抗 CD3抗体诱导的 T细胞增殖试验以测定其体液和细胞免疫 .结果 9mo后 ,吸烟组大鼠对绵羊红细胞的抗体形成细胞反应及抗 CD3抗体诱导的增殖反应均较对照组显著降低 ,而 3 mo时无显著差异 .结论 长期吸烟所引起的免疫抑制是与抗原刺激 T细胞后 ,T细胞不能有效地活化、增殖和分化有关 ,T细胞自身的细胞免疫受到损伤 ,也使得它不能有效地辅助 B细胞进行增殖及产生抗体 ,从而使体液免疫也变得无能 .

辛伐他汀诱导促进骨形成蛋白-7基因修饰的兔间充质干细胞的成骨转化

目的:研究辛伐他汀诱导对骨形成蛋白-7(BMP-7)基因修饰的间充质干细胞(MSCs)增殖和分化表型的影响。方法:将辛伐他汀诱导和未经诱导的兔MSCs分别转导BMP-7基因后,Westernblotting检测转导后细胞BMP-7的表达;通过观察细胞生长以及碱性磷酸酶活性和测定骨钙素含量,分析辛伐他汀诱导对BMP-7基因修饰的MSCs的增殖和分化表型的影响。结果:转导后BMP-7基因在诱导组和未诱导组MSCs中均有表达,诱导组细胞BMP-7表达量、碱性磷酸酶活性和骨钙素含量均比较未诱导组明显增高。结论:转导前辛伐他汀诱导能够促进BMP-7基因修饰的MSCs的成骨转化。

地塞米松诱导促进BMP-2基因转染的兔MSCs的成骨转化

目的: 研究地塞米松诱导对BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.方法: 将地塞米松诱导和未经诱导的兔MSCs分别转导BMP 2基因后,以RT PCR和免疫组化方法检测转导后细胞BMP 2的表达;通过观察细胞生长及碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的测定,分析地塞米松诱导对BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.结果: 转导后BMP 2基因在两组rMSCs中均有表达,定量分析显示诱导组细胞碱性磷酸酶活性 ( 134 36±8 84 )nkat/L较对照组(104 02±7 83)nkat/L明显增高;诱导组细胞骨钙素含量(14 68±0 73)μg/L较对照组(6 52±1 21)μg/L明显增高.结论: 转导前地塞米松诱导能够促进BMP 2基因修饰的rMSCs的增殖和成骨转化.

乙酰半胱氨酸及扎鲁斯特对急性肺损伤的防治作用

目的:观察乙酰半胱氨酸及扎鲁斯特对急性肺损伤的防治作用。方法:大耳白兔32只,随机分为对照组、致伤组、乙酰半胱氨酸治疗组和扎鲁司特治疗组,每组8只。致伤组经颈静脉注入脂多糖(LPS,1 ml/kg);对照组注入生理盐水(1 ml/kg);乙酰半胱氨酸治疗组在注入LPS(1 ml/kg)前2 min,经颈静脉注入乙酰半胱氨酸(300 mg/kg);扎鲁斯特治疗组在注入LPS(1 ml/kg)前1 h及0.5 h,胃内注入扎鲁司特(20 mg/kg)。测定各组肺动脉压、动脉血氧分压、外周血白细胞计数、肺泡灌洗液(BALF)NO2-浓度、肺系数(肺湿重/体重)及肺湿/干比。结果:乙酰半胱氨酸组肺动脉压及NO2-浓度与致伤组有显著差别(P<0.05),乙酰半胱氨酸及扎鲁斯特组氧分压均较致伤组明显改善(P<0.05),肺系数和肺湿/干比显著均低于致伤组(P<0.05),外周血白细胞高于致伤组(P<0.05)。结论:乙酰半胱氨酸和扎鲁斯特对兔内毒素急性肺损伤有一定的保护作用。

吸烟对大鼠肺动脉压和一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨长期吸烟对大鼠肺动脉压及一氧化氮合酶的影响。方法 :SD雄性大鼠 40只 ,随机分为吸烟组和对照组 ,吸烟组暴露于点燃之烟卷 ,每日 6 h,于 9个月时检测吸烟组及对照组大鼠的肺动脉平均压 (m PAP)、血清一氧化氮 (NO)、肺动脉结构型一氧化氮合酶 (c NOS)和诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)。结果 :吸烟组大鼠 m PAP明显高于对照组 ,血清 NO浓度与对照组相比明显减低 ,吸烟组肺细小动脉 c NOS平均吸光度值较对照组明显降低 ,吸烟组大鼠肺细小动脉 i NOS的平均吸光度值较对照组明显增高。结论 :烟雾可致肺动脉高压的形成 ,抑制肺细小动脉 c NOS表达、促进肺细小动脉 i NOS表达可能为其重要作用机制之一。

HCCR-2基因的克隆及原核表达

目的：克隆HCCR-2基因、原核表达并鉴定。方法：从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA，经RT—PCR获得HCCR-2基因。将该基因克隆到pGEM—T—Easy克隆载体中，测序、鉴定。将测序正确的HCCR-2基因亚克隆到pET-28a（＋）表达载体中，构建HCCR-2表达载体，IPTG诱导表达1～5h，做SDS—PAGE分析，鉴定HCCR-2蛋白的表达。结果：DNA测序证明，获得了HCCR-2基因，其序列与GenBank中报道序列完全一致。SDS—PAGE分析表明，HCCR-2蛋白获得高效表达，其相对分子质量为39kDa，表达量约占菌体总蛋白的25％。结论：HCCR-2基因的克隆和表达均获得了成功，为进一步探讨HCCR基因在骨肉瘤诊治中应用奠定了基础。

SRG基因的克隆及原核表达

目的克隆SRG基因、原核表达并鉴定。方法从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定。将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a+)表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h^6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达。结果DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致。SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25%。结论SRG基因的克隆和表达均获得了成功,为进一步探讨SRG基因在骨肉瘤诊治中应用奠定了基础。

不同前药联合HSV-tk自杀基因系统对喉癌细胞体外杀伤效应的比较研究

目的 观察并比较不同前药与自杀基因HSV -tk共同作用对喉癌细胞Hep -2的体外杀伤作用。方法 构建tk基因逆转录表达载体pL(tk)SN ,在LipofectAMINETM2 0 0 0介导下转染PA3 17包装细胞 ,G418筛选 ,直至出现抗性克隆 ,扩大培养 ,用NIH3T3测定病毒滴度 ,将重组病毒分别感染人喉癌细胞Hep -2 ,G418筛选出抗性克隆命名为Hep/tk ,以RT -PCR及Southernblot检测tk基因的整合及表达。通过观察tk基因修饰细胞生长状况及比较不同前药对喉癌细胞杀伤效应以探讨不同前药作用机理。结果 RT -PCR及Southernblot分析证明tk基因在人喉癌细胞系Hep -2中有整合及表达 ;Hep/tk与未转基因的原肿瘤细胞相比 ,二者生长速度及形态结构无明显差别 ;在不同前药敏感性试验中 ,Hep/tk显示出对GCV的高敏感性 ,而tk阳性和tk阴性细胞均显示对ACV和BVdU相对不敏感 ,tk基因修饰细胞与不同比例亲本细胞混合后经GCV治疗均显示出明显旁观者效应。结论 人喉癌细胞系Hep -2对HSV -tk/GCV系统高度敏感 ,并且有明显的旁观者效应 ,可望成为喉癌基因治疗的新途径。