hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响

目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hs-MAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Westernblot方法检测hsMAD2的表达情况。观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线,观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞周期的变化。然后观察在纺锤体阻滞剂50nmol/L Nocodazole作用下,hs-MAD2对HepG2细胞的影响。结果稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无变化;流式细胞仪检测结果显示HepG2-hsMAD2细胞周期G2、S期比例增加,而G1期细胞比例下降,但差异无显著性。经过nocodazole处理后,HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降,差异具有显著性,细胞周期出现G2期阻滞。相反,HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化。结论单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无影响。由于hsMAD2蛋白发挥了细胞周期关卡作用,使受到No-codazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞。

突变型Axin基因在神经胶质瘤细胞系C6中的功能研究

目的研究突变型Axin基因对C6细胞增殖及细胞周期的影响,以期揭示突变型Axin基因是否影响胶质瘤的发生。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法绘制细胞生长曲线,应用流式细胞仪(FCM)测定细胞周期的变化,并用平板克隆形成实验对细胞克隆形成能力进行了检测。采用SP法免疫细胞化学染色法检测Ki-67、cyclinD1表达。结果转染突变型Axin基因与转染野生型Axin基因的C6细胞在生长速度,克隆形成能力方面均显著降低,且组间无差别;C6、C6-Vector、C6-Vector-Axin、和C6-Vector-Axin806各组细胞经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为:27.2%、24.8%、18.9%和18.5%;Ki-67及cyclinD1在转染突变型Axin基因与转染野生型Axin基因的C6细胞中表达均降低,且组间无差别。结论突变型Axin基因明显抑制C6细胞的增殖能力,该位点突变可能并不是胶质瘤发生的关键因素。

外源性APMCF1基因转染对人肝癌细胞系细胞生长和细胞周期的影响

目的:探讨外源性APMCF1基因对人肝癌细胞系(HHCC)细胞生长和细胞周期的影响。方法:将人全长APMCF1基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HHCC细胞,经G418筛选获得转基因癌细胞克隆,采用半定量RT-PCR方法检测APMCF1的表达情况。通过单四唑(MTT)比色,绘制生长曲线,观察APMCF1基因对HHCC细胞生长的影响,流式细胞仪检测HHCC细胞周期的变化。结果:半定量RT-PCR结果显示,APMCF1基因被成功地转染至HHCC细胞。稳定表达外源性APMCF1基因的HHCC细胞生长速度明显慢于亲代细胞;细胞周期发生明显改变,G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显减少。结论:外源性APMCF1基因对HHCC细胞生长和细胞周期有明显的抑制作用,可能是一个细胞周期调节基因。

空肠血管淋巴管瘤1例报道及文献复习

目的:报道1例空肠血管淋巴管瘤,结合文献探讨其临床病理学特征及诊断要点。方法:对1例空肠血管淋巴管瘤进行临床病理分析及免疫组化观察。结果:空肠血管淋巴管瘤无特殊临床表现及肠镜特点,镜下黏膜及黏膜下层查见大量大小不一的薄壁管腔,腔内壁衬覆单层扁平内皮,部分管腔扩张充血,部分管腔内充满淋巴液并含有淋巴细胞。免疫组化表型:淋巴管瘤CD31、CD34和D2-40均阳性,而血管瘤CD31、CD34阳性、D2-40阴性。结论:血管淋巴管瘤是一种少见的良性肿瘤,发生于胃肠道尤其是空肠的血管淋巴管瘤极为少见,小肠镜检查及临床特征与恶性肿瘤难以鉴别,需要结合病理学检查确定诊断。