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心钠素及其受体在不同年龄大鼠耳蜗中的表达
1
作者
曹增玉
高雪
邱建华
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第4期439-441,共3页
目的探讨心钠素(ANP)及利钠肽受体A(NPR-A)在不同年龄段大鼠耳蜗组织中的表达情况。方法分离不同年龄段大鼠耳蜗组织,采用RT-PCR方法检测ANP及其受体NPR-A的表达。结果在大鼠耳蜗组织中可以检测到ANP及NPR-A基因的表达,并发现随着大鼠...
目的探讨心钠素(ANP)及利钠肽受体A(NPR-A)在不同年龄段大鼠耳蜗组织中的表达情况。方法分离不同年龄段大鼠耳蜗组织,采用RT-PCR方法检测ANP及其受体NPR-A的表达。结果在大鼠耳蜗组织中可以检测到ANP及NPR-A基因的表达,并发现随着大鼠发育成熟其耳蜗组织中ANP表达出现明显降低甚至消失,而NPR-A的表达无明显变化。结论ANP及NPR-A基因在耳蜗组织中表达,提示耳蜗组织具有合成ANP及NPR-A的能力,但随着内耳的成熟,ANP的表达逐渐降低而NPR-A的表达没有明显变化,因而推断ANP可能在大鼠耳蜗发育过程中具有重要作用,成熟大鼠内耳ANP的来源主要是机体旁分泌至内耳而发挥作用的。
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关键词
心钠素
利钠肽受体A
逆转录聚合酶链反应
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职称材料
大鼠csrp2基因真核表达质粒的构建及表达
被引量:
1
2
作者
高雪
曹增玉
+2 位作者
查定军
王枫
邱建华
《科学技术与工程》
2008年第6期1410-1413,共4页
获得大鼠csrp2基因片段并构建真核表达载体。RT-PCR法从大鼠心脏组织中提取总DNA,并扩增出相应大小的csrp2 DNA片段,测序正确后克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后以阳离子聚合物转染Cos-7细胞,分别以RT-PCR方法检测...
获得大鼠csrp2基因片段并构建真核表达载体。RT-PCR法从大鼠心脏组织中提取总DNA,并扩增出相应大小的csrp2 DNA片段,测序正确后克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后以阳离子聚合物转染Cos-7细胞,分别以RT-PCR方法检测mRN-表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果构建了重组质粒pcDNA3.1(-)-csrp2,RTPCR结果证明csrp2可在Cos-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,表达有CRP2蛋白的细胞着染。成功构建了大鼠csrp2基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-csrp2,csrp2基因可以在Cos-7细胞中表达。
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关键词
csrp2
转染
真核表达
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职称材料
小鼠CSRP2基因的克隆、融合表达及蛋白的分离纯化
3
作者
高雪
薛赢
+1 位作者
孙景豫
邱建华
《生物技术通讯》
CAS
2007年第6期918-920,共3页
目的:获得小鼠CSRP2(cysteine rich protein 2)基因片段,高效表达、纯化CSRP2。方法:用RT-PCR技术从小鼠心脏组织中提取总DNA并扩增出相应大小的CSRP2 DNA片段,将其与pGEM-T-easy载体连接后测序,将测序正确的CSRP2从BamHⅠ和HindⅢ酶切...
目的:获得小鼠CSRP2(cysteine rich protein 2)基因片段,高效表达、纯化CSRP2。方法:用RT-PCR技术从小鼠心脏组织中提取总DNA并扩增出相应大小的CSRP2 DNA片段,将其与pGEM-T-easy载体连接后测序,将测序正确的CSRP2从BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET-A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,对重组融合蛋白通过镍柱进行纯化。结果与结论:PCR获得的CSRP2序列与GenBank报道的一致(为675 bp);重组载体在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达;融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子质量约24×103处有特异的蛋白条带,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的25%;重组蛋白经镍柱纯化后,得到了高纯度的CSRP2融合蛋白。
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关键词
CYSTEINE
RICH
PROTEIN
2
RT-PCR
表达
纯化
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职称材料
大鼠CRIP2蛋白的表达和分离纯化
4
作者
高雪
王枫
邱建华
《生物技术通讯》
CAS
2012年第2期201-203,共3页
目的:获得大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌中表达、纯化大鼠CRIP2(cysteine-rich intestinal protein 2)蛋白。方法:从大鼠主动脉组织中提取总DNA,RT-PCR扩增出相应大小的crip2 DNA片段,与pGEM-T-easy载体连接后测序;将测序正确的crip2...
目的:获得大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌中表达、纯化大鼠CRIP2(cysteine-rich intestinal protein 2)蛋白。方法:从大鼠主动脉组织中提取总DNA,RT-PCR扩增出相应大小的crip2 DNA片段,与pGEM-T-easy载体连接后测序;将测序正确的crip2按照BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,通过镍柱进行纯化。结果:PCR获得的crip2序列与GenBank报道的一致(为707 bp);重组融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析,在相对分子质量为27×103处有特异的蛋白条带,经镍柱纯化后,得到了高纯度的CRIP2融合蛋白。结论:克隆了大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌BL21中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度的CRIP2融合蛋白。
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关键词
CRIP2蛋白
大鼠
表达
纯化
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职称材料
题名
心钠素及其受体在不同年龄大鼠耳蜗中的表达
1
作者
曹增玉
高雪
邱建华
机构
第四军医大学西京医院耳鼻喉-头颈外科
出处
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007年第4期439-441,共3页
文摘
目的探讨心钠素(ANP)及利钠肽受体A(NPR-A)在不同年龄段大鼠耳蜗组织中的表达情况。方法分离不同年龄段大鼠耳蜗组织,采用RT-PCR方法检测ANP及其受体NPR-A的表达。结果在大鼠耳蜗组织中可以检测到ANP及NPR-A基因的表达,并发现随着大鼠发育成熟其耳蜗组织中ANP表达出现明显降低甚至消失,而NPR-A的表达无明显变化。结论ANP及NPR-A基因在耳蜗组织中表达,提示耳蜗组织具有合成ANP及NPR-A的能力,但随着内耳的成熟,ANP的表达逐渐降低而NPR-A的表达没有明显变化,因而推断ANP可能在大鼠耳蜗发育过程中具有重要作用,成熟大鼠内耳ANP的来源主要是机体旁分泌至内耳而发挥作用的。
关键词
心钠素
利钠肽受体A
逆转录聚合酶链反应
Keywords
Atrial natriuretic polypeptide (ANP)
Natriuretic polypeptide
receptor-A(NPR-A)
RT-PCR
分类号
R339.16 [医药卫生—人体生理学]
R335.9 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
大鼠csrp2基因真核表达质粒的构建及表达
被引量:
1
2
作者
高雪
曹增玉
查定军
王枫
邱建华
机构
第四军医大学西京医院耳鼻喉-头颈外科
出处
《科学技术与工程》
2008年第6期1410-1413,共4页
文摘
获得大鼠csrp2基因片段并构建真核表达载体。RT-PCR法从大鼠心脏组织中提取总DNA,并扩增出相应大小的csrp2 DNA片段,测序正确后克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后以阳离子聚合物转染Cos-7细胞,分别以RT-PCR方法检测mRN-表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果构建了重组质粒pcDNA3.1(-)-csrp2,RTPCR结果证明csrp2可在Cos-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,表达有CRP2蛋白的细胞着染。成功构建了大鼠csrp2基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-csrp2,csrp2基因可以在Cos-7细胞中表达。
关键词
csrp2
转染
真核表达
Keywords
csrp2 gene cloning eukaryotic expression
分类号
Q754 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
小鼠CSRP2基因的克隆、融合表达及蛋白的分离纯化
3
作者
高雪
薛赢
孙景豫
邱建华
机构
第四军医大学西京医院耳鼻喉-头颈外科
第四军医大学西京医院
放疗科
出处
《生物技术通讯》
CAS
2007年第6期918-920,共3页
文摘
目的:获得小鼠CSRP2(cysteine rich protein 2)基因片段,高效表达、纯化CSRP2。方法:用RT-PCR技术从小鼠心脏组织中提取总DNA并扩增出相应大小的CSRP2 DNA片段,将其与pGEM-T-easy载体连接后测序,将测序正确的CSRP2从BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET-A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,对重组融合蛋白通过镍柱进行纯化。结果与结论:PCR获得的CSRP2序列与GenBank报道的一致(为675 bp);重组载体在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达;融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子质量约24×103处有特异的蛋白条带,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的25%;重组蛋白经镍柱纯化后,得到了高纯度的CSRP2融合蛋白。
关键词
CYSTEINE
RICH
PROTEIN
2
RT-PCR
表达
纯化
Keywords
cysteine rich protein 2
cloning
expression
purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
大鼠CRIP2蛋白的表达和分离纯化
4
作者
高雪
王枫
邱建华
机构
二炮总
医院
耳
鼻
喉
科
空军总
医院
耳
鼻
喉
科
第四军医大学西京医院耳鼻喉-头颈外科
出处
《生物技术通讯》
CAS
2012年第2期201-203,共3页
文摘
目的:获得大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌中表达、纯化大鼠CRIP2(cysteine-rich intestinal protein 2)蛋白。方法:从大鼠主动脉组织中提取总DNA,RT-PCR扩增出相应大小的crip2 DNA片段,与pGEM-T-easy载体连接后测序;将测序正确的crip2按照BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,通过镍柱进行纯化。结果:PCR获得的crip2序列与GenBank报道的一致(为707 bp);重组融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析,在相对分子质量为27×103处有特异的蛋白条带,经镍柱纯化后,得到了高纯度的CRIP2融合蛋白。结论:克隆了大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌BL21中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度的CRIP2融合蛋白。
关键词
CRIP2蛋白
大鼠
表达
纯化
Keywords
cysteine-rich intestinal protein 2
rat
expression
purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
心钠素及其受体在不同年龄大鼠耳蜗中的表达
曹增玉
高雪
邱建华
《中华耳科学杂志》
CSCD
2007
0
下载PDF
职称材料
2
大鼠csrp2基因真核表达质粒的构建及表达
高雪
曹增玉
查定军
王枫
邱建华
《科学技术与工程》
2008
1
下载PDF
职称材料
3
小鼠CSRP2基因的克隆、融合表达及蛋白的分离纯化
高雪
薛赢
孙景豫
邱建华
《生物技术通讯》
CAS
2007
0
下载PDF
职称材料
4
大鼠CRIP2蛋白的表达和分离纯化
高雪
王枫
邱建华
《生物技术通讯》
CAS
2012
0
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职称材料
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