以人乳头瘤病毒16 L1为载体的流感通用疫苗初步研究

目的构建以人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）16 L1为载体的甲型流感病毒M2基因胞外区（M2e）通用疫苗杆粒，利用昆虫细胞杆状病毒表达系统，进行初步的蛋白表达。方法利用PCR技术将甲型流感病毒M2e基因序列与HPV16 L1相连。经酶切、酶联将融合基因插入pFastBac HTA载体，在DH10Bac细胞中进行同源重组，经测序鉴定后构建M2e-HPV16 L1杆粒，脂质体转染sf9昆虫细胞，收获并扩增含有M2e-HPV16 L1的杆状病毒，经扩增后获得高效价的重组杆状病毒，用SDS-PAGE、免疫荧光法和电镜检测目的蛋白的表达。结果构建了以HPV16 L1为载体的M2e通用疫苗杆粒，通过转染sf9昆虫细胞得到初步M2e-HPV16 L1融合蛋白表达。结论成功构建了HPV16 L1与甲型流感病毒M2e融合蛋白的病毒样颗粒，为流感通用疫苗的研制奠定了基础。