定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法的建立及在胃癌早期诊断中的预警价值

建立定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法及研究其在胃癌早期诊断中的预警价值。采用定量免疫PCR技术检测43例胃癌、37例健康献血员血清中MGAgs的含量。研究显示,血清MGAgs含量在健康对照组与胃癌组组间存在显著差异(P<0.01),应用定量免疫PCR方法检测50μL血清MGAgs的截断值相当于为5972个MKN45细胞裂解所得抗原。研究表明,定量免疫PCR技术检测血清MGAgs抗原具有较高的灵敏性和稳定性,通过对胃癌患者血清中MGAgs进行定量检测,可能用于胃癌的诊断和鉴别诊断。

肝癌患者门静脉高压症静脉曲张破裂出血的TIPS治疗

目的探讨经颈内静脉肝内门腔静脉分流术(TIPS)治疗肝癌患者门静脉高压症静脉曲张破裂出血的有效性和安全性及TIPS术前的病例选择。方法回顾性分析48例肝癌合并门静脉高压症静脉曲张破裂出血病例,评估手术技术成功率、术后情况、术后肝性脑病、再出血、死亡原因等;将病例的生存期资料行Kaplan-Meier生存分析,分析肝功能Child-Pugh分级与术后生存时间的关系。结果 48例患者全部成功行TIPS治疗,门静脉压力平均较术前降低约10.6 mmHg(1mmHg=0.133 kPa),静脉曲张出血有效控制,腹水、腹胀、腹泻等症状明显缓解。术后中位生存时间约5.0月,Child-Pugh分级A到C组术后中位生存时间依次缩短。结论 TIPS是治疗肝癌患者门静脉高压静脉曲张破裂出血的有效且安全的方法,肝功能状态是术前手术病例筛选的重要指标。

H2-calponin对结肠癌细胞增殖的抑制作用

探讨H2-calponin在结肠癌发生发展中所发挥的作用。Western blot检测H2-calpinin在结肠癌组织和细胞系中的表达;构建H2-calpinin特异性小干扰RNA,稳定转染结肠癌SW480细胞系,同时将转染随机序列的SW480细胞作为对照,通过MTT实验、FACS细胞周期检测等方法研究H2-calponin下调对结肠癌细胞恶性生物行为的影响。结果:H2-calponin的表达与结肠癌的增殖能力具有相关性,下调H2-calponin的表达能够促进结肠癌细胞的增殖。实验率先验证了H2-calponin能够抑制结肠癌细胞的增殖。

siRNA沉默雄激素受体对人结肠癌HCT-8细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:利用小干扰RNA(siRNA)沉默人结肠癌HCT-8细胞中雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达,观察AR敲除对癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,初步探讨AR在结肠癌中的功能。方法:利用qRT-PCR和Western blot检测HCT-8细胞及正常人肠上皮细胞中AR的表达;siRNA转染HCT-8细胞沉默AR表达,利用qRT-PCR和Western blot检测转染效率;流式细胞术检测沉默AR后对HCT-8细胞周期的影响;CCK-8法检测沉默AR后对HCT-8细胞增殖的影响;Transwell实验检测沉默AR后对HCT-8细胞迁移及侵袭的影响。结果:AR在人结肠癌HCT-8细胞中高表达;siRNA能有效沉默HCT-8细胞中AR的mRNA及蛋白的表达。与对照组相比,沉默AR表达能够明显抑制HCT-8细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论:AR在人结肠癌HCT-8中高表达并能够促进癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

人乳头瘤病毒HPV16E6的表达促进角质生成细胞凋亡的发生

为探讨HPV16早期基因E6的表达对角质生成细胞NIKS凋亡表型的影响及可能的机制,经培养稳定表达HPV16E6的角质生成细胞NIKS;使用不同的DNA损伤剂处理转染后细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况;建立表达HPV16E6突变体Y54D及F2V的p53降解缺陷型NIKS细胞系并用DNA损伤剂处理,流式细胞术检测凋亡情况。研究显示,流式细胞术结果显示稳定表达E6的细胞系在足叶乙甙、丝裂霉素及紫衫醇处理后发生明显的细胞凋亡;表达Y54D或F2V的NIKS细胞经DNA损伤剂处理后凋亡明显低于正常E6表达细胞。研究表明,人乳头瘤病毒E6的表达能够促进角质生成细胞凋亡的发生,这种促凋亡作用与细胞内p53的表达相关。

粪菌移植联合聚乙二醇治疗顽固性功能性便秘的疗效观察

目的:探讨粪菌移植(FMT)联合聚乙二醇治疗顽固性功能性便秘的临床疗效及对患者生活质量及心理状态的影响。方法:选择第四军医大学西京消化病院2013年11月至2015年5月门诊顽固性功能性便秘患者35例,所有患者均行FMT治疗,同时联合聚乙二醇电解质散剂,疗程4周,采用便秘患者症状评分量表(KESS)、生存质量量表(PAC-QOL)、Zung焦虑自评量表(SAS)及抑郁自评量表(SDS)观察治疗前后及随访3个月便秘患者症状、生活质量及心理状态的改变。结果:治疗后及随访3个月时,患者的临床治愈率分别为37.1%、34.3%,改善率分别为77.1%、71.4%,KESS、PAC-QOL、SAS、SDS总评分均较治疗前明显减低(P<0.05)。治疗及随访期间均未发生严重不良反应。结论:FMT联合聚乙二醇能安全、有效的改善顽固性功能性便秘患者的相关症状,提高生活质量,改善异常心理状态,值得临床推广。

粪菌移植对顽固性功能性便秘患者临床疗效及生活质量的影响

目的评价粪菌移植(FMT)治疗顽固性功能性便秘的临床效果。方法选取2013年11月至2015年5月第四军医大学消化病院门诊就诊的顽固性功能性便秘患者,将符合纳入标准的60例患者采用数字表法随机分为治疗组和对照组,对照组给予聚乙二醇电解质散剂,治疗组在此基础上加以FMT,疗程4周。观察治疗前后患者Bristol粪便性状量表(BSFS)、便秘症状自评量表(KESS)的变化,进行疗效评价;采用便秘患者生活质量量表(PAC-QOL)评定治疗前后患者生活质量的改变。结果治疗前,治疗组和对照组患者BSFS[(1.23±0.50)vs.(1.20±0.48)分]、KESS[(27.93±4.98)vs.(25.60±5.48)分]及PAC-QOL[(111.40±15.06)vs.(110.30±19.11)分]评分差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者BSFS评分均明显增加、KESS及PAC-QOL评分均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05),与对照组相比,治疗组BSFS评分明显增加[(2.37±1.20)vs.(3.10±1.13)分],KESS评分明显下降[(16.97±7.37)vs.(12.43±7.48)分],PAC-QOL评分明显下降[(87.13±27.52)vs.(63.10±26.40)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率为83.3%,对照组总有效率为53.3%。两组治疗期间均未发生严重不良反应。结论 FMT联合聚乙二醇电解质散能安全、有效地改善顽固性功能性便秘患者的相关症状,提高患者的生活质量,为临床治疗顽固性功能性便秘提供了新的治疗方法,值得临床推广。

小G蛋白Ran对胰腺癌细胞增殖和凋亡的调控

目的:探讨Ras超家族的小G蛋白Ran GTPase在胰腺癌组织及细胞中的表达情况,及其对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响。方法:选取胰腺癌石蜡标本及相应正常组织标本各27例进行免疫组织化学染色。用LipofectamineTM2000转染Ran干扰RNA(small interference RNA,siRNA)进入胰腺癌细胞系PANC-1干扰其表达,之后利用Western blot观察Ran的表达情况。运用MTT及流式细胞术分别检测各实验组细胞的增殖和凋亡情况。结果:免疫组化染色显示在胰腺癌组织中Ran的表达阳性率及得分均明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。将干扰Ran siRNA转染进入细胞系PANC-1中,利用Western blot发现Ran的表达明显下调。并且通过MTT实验发现在胰腺癌细胞系PANC-1中下调Ran表达能明显抑制该细胞生长(P<0.05),并使PANC-1细胞凋亡显著增多(P<0.05)。结论:小G蛋白Ran GTPase在胰腺癌组织及细胞系中高表达,且Ran可以促进胰腺癌细胞PANC-1的增殖,抑制其凋亡。