案例式教学法在医学遗传学中应用的体会

案例式教学是近年来我国医学教育改革中所采用的新型教学方法,已经开始应用到高等教育的多个学科中,并初获成效。结合前期在医学遗传学的课程中应用案例式教学的实践,对案例式教学在医学遗传学中的应用进行了初步的探讨,分析和总结了案例式教学在医学遗传学教学中的优势以及在实施中的不足与改进措施。

PBL教学法在医学遗传学课程中的应用

医学遗传学一门基础学科和临床学科的桥梁学科,课程中存在大量的可供讨论的病例。在医学遗传学教学中尝试应用PBL教学法,能有效激发学生学习的积极性,培养学生的自学能力和综合素质,从而提高了教学质量。

医学遗传学课程中基础与前沿的平衡探讨

医学遗传学既是生命科学重要组成学科,又是医学科学的前沿领域。如何在医学遗传学教学中兼顾基础知识与前沿进展的平衡是现代医科大学教学面临的重要课题。以线粒体遗传病一章的教学为例,论述了前沿进展可以成为基础知识的佐证、补充和拓展。通过将基础知识和前沿进展相结合,充分调动学生学习的积极性,为他们打下扎实的理论基础。

在线人类孟德尔遗传数据库在医学遗传学教学科研中的应用

介绍在线孟德尔遗传数据库的全面性、实用性、准确性和及时更新等基本特点,并就其在医学遗传学教学、科研中的应用作一综述。

引入文献专题课,提高分子遗传学教学质量

依据自主和交互式学习原则,在分子遗传学教学中引入了文献专题课,极大地激发了学生的学习兴趣,培养了学生的批判性阅读能力,训练了学生的实证式科研思维能力,取得了良好的教学效果。

非损伤性取样在珍稀濒危鸟类——朱翾种群遗传学中的应用

目的 :本次研究旨在建立适宜于珍稀濒危动物种群遗传学研究中提取 DNA的方法 .方法 :采用陕西朱保护观察站人工饲养的朱脱落羽毛羽髓提取基因组 DNA,利用1 0 bp的随机引物对提取 DNA的结果进行检验 .结果 :扩增结果稳定 .意义 :尝试在朱的遗传研究中应用非损伤性方法抽取 DNA,以方便对朱种群遗传背景进行研究 .探索的方法可应用于珍稀濒危动物分子遗传学研究 :进化关系、个体鉴别、亲子鉴定、筛选有价值的性状连锁遗传标记、种群数量调查、动物分类佐证和为防止近交衰退建立基于

医学遗传学教学改革的探索与体会

在生命科学飞速发展的今天,高等医学教育如何进行教学改革以适应未来,对培养高素质的医学人才有着深远的意义.在医学遗传学教学中,分别从教学内容、授课方式等方面进行了一些有意义的探索.

计算机辅助教学与医学遗传学教学

计算机网络与多媒体的教学手段在现代教育中得到了广泛的应用,也是未来教育发展的主要方向,但计算机教学手段仍有很多可以改进的地方,而且也不能完全替代传统的教学方法.具体选择什么样的手段来实施教学,要视教学内容和目的而定.只有二者有机结合,优势互补,才能达到好的效果.

非损伤性取样在朱鹮种群遗传研究中的应用

采用非损伤性取样方法提取DNA ,利用 2 0条 10bp的随机引物对陕西朱保护观察站的 16只朱个体间遗传距离进行分析研究。获得的DNA可进行RAPD研究分析 ,18条引物扩增结果稳定 ,遗传距离指数介于 30 .5 2 %～ 10 .18%之间 ;揭示 16只朱间亲缘关系较近。尝试在朱种群遗传学研究中应用非损伤性方法抽提基因组DNA ,以方便对朱等小种群珍稀濒危生物进行相关研究。

LIM蛋白KyoT在小鼠胚胎发育中的表达

IM结构域蛋白KyoT可与转录因子RBP J相互作用而修饰Notch信号途径 .以往发现KyoT在成年小鼠肺脏、肾脏和睾丸中有特异性表达 ,为进一步明确KyoT在小鼠胚胎阶段的表达 ,故分析了KyoT在小鼠不同胚胎阶段的表达水平变化和胚胎 17天时各组织的表达分布 .采用RNA印迹发现KyoT在小鼠胚胎的各阶段均表达 ,而且胚胎 17天时表达水平最高 .进一步RNA印迹和免疫组织化学检测发现 ,KyoTmRNA和蛋白质在胚胎17天小鼠的肺、肾以及肌肉中均有高水平的表达 .上述结果提示 ,KyoT在小鼠胚胎发育过程中有特异性表达 ,且在胚胎 17天时KyoT表达器官分布与成年小鼠相似 ,特异性定位于肺、肾和肌肉等脏器 .

牙齿发育相关基因adam28多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备及鉴定抗ADAM28的多克隆抗体。方法采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增出adam28基因的蛋白编码区序列,克隆到中间载体pMD18-T Vector中,再经双酶切得到adam28片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,在大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,得到GST-ADAM28融合蛋白,经过初步纯化及SDS-PAGE电泳,在35300的新蛋白带处直接割胶,作为抗原免疫新西兰大白兔后获取抗体。结果成功构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,得到初步纯化的GST-ADAM28融合蛋白,免疫兔子1个月后,获得免疫血清,盐析法纯化得到多克隆抗体。Western印迹结果显示所得到的抗体具有较高的特异性,ELISA分析证实其效价可达1∶16000。结论成功制备出高效价的抗ADAM28多克隆抗体,为进一步研究ADAM28在牙齿发育中的作用和表达分布奠定基础。

食管癌组织的遗传不稳定性研究

目的:探讨食管癌组织遗传多态性及基因组甲基化改变在其发生或发展中的作用。方法:1)用PCR-AFLP和基因扫描的方法,对食管癌组织与癌旁组织AR基因、Rb基因(intron16、17)、ER基因(PvuII和XbaI)和cbl2基因6个多态位点的检测。2)用HPLC的方法,对食管癌组织与癌旁组织基因组DNA甲基化的水平检测。结果:35例患者中至少一个位点发生改变者占74.29%,在不同级别的食管癌组织中多态性改变各为:Ⅰ:9/12(75%);Ⅱ:13/15(85%);Ⅲ:4/8(50%)。在食管癌早期癌组织基因组甲基化水平比癌旁组织低,随着肿瘤的进程甲基化水平逐渐上升,甚至超过了癌旁组织。结论:从食管癌组织早期基因组低甲基化与大量的多态性改变,推测遗传不稳定性是食管癌发生发展中普遍事件,早期基因组甲基化的降低可能与其遗传不稳定性的产生关系密切。

大黄对大鼠肾脏水通道蛋白2、4表达的影响

目的探讨大黄对大鼠肾脏水通道蛋白2、4(AQP2、AQP4)表达的影响。方法32只SD大鼠随机分为正常对照组,大黄低、中、高剂量组,分别给予生理盐水不同剂量的大黄提取物(大黄总蒽醌)灌胃,测定大鼠6 h及24 h尿量,运用免疫组化、Western blot和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。结果与正常对照组比较,大黄高、中剂量组大鼠尿量明显增加,肾脏AQP2、AQP4蛋白表达及mR- NA表达明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01);与正常对照组比较,大黄低剂量组大鼠尿量及肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化不明显,差异无统计学意义。结论大黄能抑制大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平,这可能是其利尿功效的机制之一。

LIM结构域蛋白KyoT相互作用分子的筛选

KyoT为LIM结构域蛋白 ,可与转录因子RBP Jk相互作用。为了研究其功能 ,用酵母双杂交法筛选了与KyoT相互作用的蛋白。以KyoT2为诱饵筛选人淋巴结cDNA文库 ,从 5× 10 6 个克隆中共获得 4 2个阳性克隆。提取质粒进行酶切鉴定 ,获得 2 2个非重复克隆。对此 2 2个克隆进行序列分析 ,共获得 13种基因 ,其中包括已知的KyoT相互作用蛋白RBP Jk和两个未知基因。另一种被筛选到的已知基因是激活状态的信号转导物和转录因子 1活化物的抑制蛋白 (proteininhibitorofactivatedsignaltransducerandactivatoroftranscription 1,PIAS1)。由于KyoT在小鼠睾丸中表达较高 ,因此进一步探讨了KyoT2与PIAS1的相互作用。并首先在酵母中证实KyoT2与PIAS1的相互作用并得到阳性结果。进而在大肠杆菌中表达纯化了KyoT2蛋白 ,并以此为抗原制备了抗KyoT2多克隆抗体 ,再用GST pulldown实验验证了KyoT2和PIAS1在体外的相互作用。成功筛选了KyoT相互作用蛋白 ,发现并验证了KyoT与PIAS1的相互作用 。

单核-巨噬细胞的分化和功能研究进展

单核-巨噬细胞系统的发现已愈百年。近年发现单核-巨噬细胞系统不仅在机体的自身稳态、免疫监视和抗感染等方面发挥关键作用,还参与了众多疾病的发生和发展。在发育来源上,成年个体的单核-巨噬细胞系统的成员不仅来源于骨髓造血,还来源于胚胎原始造血;在功能上,单核-巨噬细胞系统更是展现出广泛的异质性,尤其是近年来发现该系统具有重要的免疫调节功能。阐明单核-巨噬细胞系统的分化、激活、效应的细胞和分子机制,对深刻认识机体自身稳态、免疫应答、以及相关疾病发生发展,最终建立有效的干预手段,具有重要的理论和实际意义。

Notch信号途径在血管形成和内皮细胞中的作用

Notch信号途径除了可以直接调控免疫细胞的发生和功能外,还可以通过血管内皮细胞影响免疫应答。血管形成(angiogenesis)是成年个体血管生长最重要的方式,不仅参与组织的发育与再生,还参与多种疾病如肿瘤的发生和进展。血管形成最主要的调控信号是血管内皮生长因子及其受体组成的信号途径。近年来的研究表明,进化上高度保守的Notch信号途径也是血管形成的重要调控信号途径。Notch信号途径可参与血管形成中的多个步骤,如顶端细胞的分化、内皮细胞的增殖、成熟血管结构的形成等。此外,Notch信号途径还参与血管形成相关疾病的发生和进展。尤为引人注目的是,近来发现Notch信号途径是肿瘤新生血管的重要调控信号,提示深入揭示Notch信号在血管形成中的作用和机制极有可能为开发新生血管靶向治疗提供靶点。

人纤溶酶原饼环区5基因的原核表达及活性测定

人纤溶酶原饼环区 5 (hPgnK5 )是新的血管生成抑制因子 .PCR法改造hPgnK5基因 ,所得hPgnK5基因包括编码人纤溶酶原C4 62 到P54 4共 83个氨基酸残基 ,而且在 5′ ,3′分别引入了EcoRⅠ和BamHⅠ位点 .以pThiohisA构建hPgnK5基因原核表达载体 ,在大肠杆菌TOP10中表达该蛋白 .通过柱层析法获得hPgnK5纯化蛋白 .免疫印迹反应表明该蛋白具有hPgnK5免疫活性 .体外实验表明 ,该蛋白具有抑制血管内皮细胞增殖活性 .

p27^(Kip1)反义寡核苷酸对B淋巴瘤细胞WEHI-231细胞周期的影响

目的 探讨p2 7Kip1在抗原受体介导的B淋巴瘤细胞WEHI- 2 31细胞周期停止信号中的作用。方法 用抗IgM抗体诱导WEHI- 2 31细胞细胞周期停止。用合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸抑制p2 7Kip1基因的表达。采用流式细胞仪 ,分析细胞核的DNA含量和细胞周期的变化。用体外激酶实验检测Cdk2的活性 ,Westernblot检测Rb蛋白的磷酸化水平。结果 合成的p2 7Kip1反义寡核苷酸能阻断抗IgM抗体诱导的p2 7Kip1基因表达的上调。用p2 7Kip1反义寡核苷酸处理WEHI-2 31细胞 ,可恢复抗原受体交联引起的周期素依赖性激酶Cdk2活性的降低 ,以及Rb蛋白磷酸化水平的下降 ,并使细胞周期恢复运转。结论 p2 7Kip1可能在抗原受体信号介导的WEHI-2