SHH对体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响

目的 观察Sonic Hedgehog对体外培养小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响。方法 构建Shh真核表达载体pCDNA3-Shh，脂质体法转染COS7细胞，收集培养上清波。实验组加入转染pCDNA3-Shh的培养上清液，对照组加入转染空栽体pCDNA3的培养上清液，培养72h，MTT法检测Shh对体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响。结果 Shh能促进体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖。结论 Shh促进牙孔头细胞增殖，参与牙胚发育。

大鼠β细胞素的基因克隆和序列分析

目的 从大鼠肾组织充隆β细胞素基因的全部编码区，测定并分析基基因序列。方法 利用RT-PCR方法，扩增大鼠β细胞素基因片段，将基因片段插入pMD18-T载体，限制性内切酶酶切鉴定，测定序列。结果 从大鼠肾组织中成功扩增β细胞素基因，BLAST分析与GeneBank公布的β细胞素基因编码区一致。结论 从肾组织中成功克隆β细胞素全部编码区的cDNA。

微囊化转NGF基因3T3细胞修复大鼠周围神经损伤的实验研究

目的 探讨微囊化转NGF基因 3T3细胞移植促进神经再生的可行性。方法 带有小鼠NGF基因的质粒pcDNA3 1+ NGF经FuGENETM6转染NIH 3T3细胞 ,用APA(海藻酸钠 多聚赖氨酸 海藻酸钠 )微胶囊包埋后 ,进行体外培养 ,定期检测微囊化细胞活性和NGF分泌量变化。同时 ,将转基因细胞移植于大鼠坐骨神经切断吻合处 ,于手术后 4、8、12周检测神经再生和功能恢复结果。结果 微囊化转NGF基因 3T3细胞在体外培养条件下可存活 3个月并能稳定表达 ,移植于损伤坐骨神经的微囊化转NGF基因细胞组再生神经密度大 ,排列有序 ,吻合口瘢痕少 ,单核细胞浸润少 ,水肿轻 ,动作电位幅值和传导速度显著增大 ,坐骨神经功能指数明显升高。结论 微囊化转NGF基因3T3细胞移植可显著促进神经再生和降低异体细胞移植免疫反应。