姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞的抑制作用及其机制

目的:探讨姜黄素(curcumin)对人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞H929、RPMI8226的抑制作用及其机制。方法:姜黄素处理细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖抑制作用;FCM分析细胞凋亡和周期的变化;RT-PCR法检测存活蛋白(survivin)、Bcl-2和Bax mRNA表达的变化。结果:姜黄素可抑制细胞H929和RPMI8226的增殖,并呈时间和浓度依赖性。姜黄素诱导RPMI8226细胞凋亡,发生G2/M期阻滞。姜黄素处理H929和RPMI8226细胞后,survivin和Bcl-2 mRNA的表达明显下调,而Bax mRNA的表达明显上调。结论:姜黄素可抑制人MM细胞增殖并诱导其凋亡,推测姜黄素在转录水平影响survivin、Bcl-2、Bax的表达,可能是其抑制肿瘤的作用机制之一。

流式细胞术在血小板因子4保护环磷酰胺损伤小鼠骨髓中的应用价值

目的 探讨流式细胞术在研究血小板因子 4 (PF 4 )保护环磷酰胺 (CTX)损伤小鼠骨髓造血细胞中的应用价值。方法 腹腔一次性注射CTX 2 0 0mg/kg ,造成药物损伤模型。给CTX前予以PF 4预处理 ,于给药后第 5天、第 8天分别用流式细胞仪测定骨髓有核细胞DNA含量及细胞周期变化。结果 第 5天PF 4保护组的骨髓有核细胞中 ,G0 /G1期细胞百分率较CTX组明显提高 ,坏死、凋亡率下降 (P <0 0 1) ,而与对照组基本相同 (P >0 0 5 )。第 8天各组间比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 PF 4对CTX损伤的小鼠骨髓造血细胞有保护作用。通过流式细胞仪测定DNA含量及细胞周期变化可阐明其化疗保护作用机制 ,表明流式细胞术具有重要的应用价值。

恶性组织细胞病20例临床分析与文献回顾

对 2 0例恶性组织细胞病进行临床分析 ,其早期临床表现复杂多样 ,进展快 ,疗效差 ,预后凶险。多次多部位骨髓穿刺和髓外受累部位的活检均可提高早期确诊率。进行系统的免疫组化、染色体和基因分析 ,寻找恶性组织的细胞标志物 。

血小板因子4对环磷酰胺损伤小鼠骨髓细胞增殖能力的影响

目的探讨血小板因子4(PF4)对环磷酰胺(CTX)诱导的化学损伤小鼠骨髓细胞增殖能力的影响。方法36只小鼠随机分为PF4组、CTX组和对照组。小鼠腹腔注射CTX 200 mg/kg制备化学药物损伤小鼠模型。在注射CTX前26 h和20 h,PF4组和CTX组各注射PF4(40μg/kg)和等体积的PBS缓冲液,对照组只注射等体积的PBS缓冲液。通过体外双层琼脂培养法测定PF4对CTX损伤小鼠骨髓细胞粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)形成的影响,流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果注射CTX后第5天CTX组骨髓细胞数(BMK)较对照组显著减少(P<0.01);第8天PF4组BMK较CTX组显著增多(P<0.01)。注射CTX后第5天CTX组骨髓CFU-GM数量较对照组和PF4组显著减少(P<0.01);第8天PF4组与CTX组的骨髓CFU-GM数量均有不同程度的上升,但两组间差异仍有统计学意义(P<0.05)。注射CTX后第5天PF4组骨髓有核细胞G0/G1期细胞百分率比CTX组显著提高,且细胞坏死、凋亡率显著下降(P<0.01),而与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。第8天各组间G0/G1期细胞百分率、细胞坏死/凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PF4使处于G0/G1期的骨髓细胞数增多,降低了其坏死和凋亡率,增加骨髓细胞CFU-GM集落形成率。

RNA特异性干扰bcr-abl融合基因联合p27基因克隆对K562细胞的影响

本研究旨在探讨RNA干扰抑制慢性髓系白血病bcr-abl融合基因表达,以及RNAi和p27基因克隆联合作用对K562细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡等的调控作用。以细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcr-abl融合基因融合位点的21nt siRNA,应用Northern blot法检测bcr-abl融合基因的表达,Western blot法检测BCR-ABL蛋白及凋亡相关蛋白BCL-xL的表达;同时应用RT-PCR扩增p27基因,构建P27-pcDNA3.1载体,转染p27基因入缺失p27基因的K562细胞,经筛选得到G418抗性的K562细胞株;经Western blot证实有P27蛋白表达后,联合应用RNA干扰及p27基因克隆,通过MTT法及流式细胞仪等检测联合作用后对K562细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡等的调控作用。结果表明,RNA干扰组K562细胞bcr-abl融合基因的表达水平明显下降,转染24小时时有18.4%的K562细胞发生凋亡,细胞凋亡相关蛋白BCL-xL的表达水平下调,出现明显的G1期阻滞;表达外源性P27蛋白的P27-pcDNA3.1-K562细胞株生长速度明显慢于对照K562细胞株。流式细胞仪检测显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞明显减少;RNA干扰与p27基因克隆联合作用于K562细胞后,凋亡细胞比例明显上升(33.4%)。MTT法显示,细胞存活率较单纯p27-K562细胞组及RNA干扰-K562细胞组均明显下降(p<0.01和p<0.05)。结论:特异性siRNA分子可以抑制bcr-abl融合基因的表达,诱导K562细胞分化或凋亡。RNA干扰联合p27基因克隆对抑制K562细胞增殖及促凋亡方面具有协同作用。

环孢素A治疗难治性特发性血小板减少性紫癜的临床疗效观察

目的探讨环孢素A(CyA)在难治性特发性血小板减少性紫癜(ITP)治疗中的临床疗效。方法将24例难治性特发性血小板减少性紫癜患者随机分成两组,治疗组及对照组各12例,治疗组应用CyA,对照组应用长春新碱。结果治疗组良效7例(58.3%),显效3例(25%),无效2例(16.7%),有效率83.3%;对照组良效3例(25%),显效3例(25%),无效6例(50%),有效率50%。两组相比治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论CyA对难治性ITP的近期疗效明显优于长春新碱,毒副作用较少,是一种安全有效的治疗方法。

人血丙种球蛋白治疗特发性血小板减少性紫癜的近期疗效观察

目的探讨大剂量人血丙种球蛋白在特发性血小板减少性紫癜(ITP)治疗中的近期疗效。方法将33例特发性血小板减少性紫癜患者随机分成两组,治疗组16例,对照组17例,治疗组应用大剂量人血丙种球蛋白静脉滴注,对照组给予泼尼松口服治疗。结果治疗组良效12例(75.0%),显效3例(18.8%),无效1例(6.3%),有效率93.7%;对照组良效10例(58.8%),显效5例(29.4%),无效2例(11.8%),有效率88.2%。两组相比,有效率无显著差异(P>0.05)。血小板达正常时间、达峰值时间及血小板峰值,两组相比差异明显(P<0.05)。结论大剂量人血丙种球蛋白治疗ITP安全有效,并且起效迅速,其治疗费用虽较口服肾上腺皮质激素昂贵,但对于肾上腺皮质激素禁忌的患者。特别是血小板严重降低、有严重出血倾向的重症ITP患者,不失为是一种有效的治疗手段。

应用^(125)I—UdR释放法检测LAK细胞的杀伤作用

本文利用^(125)I-UdR标记K562、Raji靶细胞技术,建立体外测定LAK细胞的细胞毒方法。Raji细胞与K562细胞的标记条件相似,即在标记时间为4h、5×10^(-5)SMFUdR条件下,标记1×10~6细胞/ml。^(125)I-UdR最适用量为2—3μCi,效靶细胞孵育最佳时间为16-18h。^(125)I-UdR释放法检测的结果符合LAK细胞的一般特性。

K562细胞向不同细胞系分化时bcl-6表达变化及其机制

目的研究诱导K562细胞向不同髓系细胞系定向分化过程中bcl-6表达变化及其机制,以探讨bcl-6与K562细胞定向分化的关系。方法以Western blot方法检测TPA(tetradecanoylphorbol 13-acetate)、羟基脲(Hu)及HMBA(hexameth- ylene bisacetamide)为诱导剂分别诱导K562细胞向巨核细胞系、红细胞系及巨噬细胞系分化时bcl-6表达变化,PCR、克隆、直接DNA测序方法分析bcl-6基因5’调控区序列变异情况。结果bcl-6仅在TPA诱导K562细胞向巨核细胞分化时表达上调,bcl -6基因5’调控区序列未发现有突变发生。结论bcl-6可能是调控K562细胞向不同细胞系定向分化的关键基因,在TPA诱导的K562细胞向巨核细胞分化过程中发挥重要作用,TPA诱导的K562细胞bcl-6表达上调与其调控区基因变异可能无关。

套细胞淋巴瘤中PI3K/Akt信号通路与细胞凋亡、侵袭的相关性

目的:研究套细胞淋巴瘤中PI3K/Akt信号通路与细胞凋亡、侵袭的相关性。方法:选择在本院诊断为套细胞性淋巴瘤的38例患者作为研究的MCL组,同期在第四军医大学附属西京医院诊断为淋巴结反应性增生的55例患者作为研究的对照组,采集淋巴结组织,检测p-PI3K、p-AKT的蛋白表达量以及凋亡基因、侵袭基因的mRNA表达量。结果:MCL组患者淋巴结中p-PI3K、p-AKT的蛋白表达量以及SOX11、cyclinD1、TNFAIP3、XIAP、PCNA、MMP2、MMP7、MMP9、VEGF的mRNA表达量均显著高于对照组,TNFAIP3的mRNA表达量均显著低于对照组;p-PI3K高表达的MCL淋巴结中SOX11、cyclinD1、XIAP、PCNA、MMP2、MMP7、MMP9、VEGF的mRNA表达量均显著高于p-PI3K低表达的MCL淋巴结,TNFAIP3的mRNA表达量均显著低于p-PI3K低表达的MCL淋巴结。结论:套细胞淋巴瘤中PI3K/Akt信号通路的激活与肿瘤细胞凋亡障碍、侵袭增强密切相关。

熊果酸联合Wnt信号通路抑制剂影响急性白血病细胞增殖和凋亡的实验研究

目的采用前瞻性研究探讨熊果酸联合Wnt信号通路抑制剂对急性白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的熊果酸作用急性白血病细胞U937后,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,计算半数抑制浓度。U937细胞分为对照组、熊果酸组、抑制剂组和联合组,联合组细胞用半数抑制浓度的熊果酸和Wnt信号通路抑制剂FH-535共同处理,熊果酸组用半数抑制浓度的熊果酸处理,抑制剂组用Wnt信号通路抑制剂FH-535处理,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt信号通路下游靶基因(c-myc)蛋白水平。结果 0、4、8、16、32μmol/L的熊果酸作用后的U937细胞存活率依次降低。熊果酸组、抑制剂组、联合组细胞存活率、β-catenin和c-myc表达水平明显低于对照组,而细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合组细胞存活率、β-catenin和c-myc表达水平明显低于熊果酸组和抑制剂组,而凋亡率和Cleaved Caspase-3水平明显高于熊果酸组和抑制剂组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论单纯使用熊果酸或者Wnt信号通路抑制剂均能够抑制白血病细胞增殖,促进急性白血病细胞凋亡,并且熊果酸和Wnt信号通路抑制剂联合使用对白血病细胞增殖抑制作用和凋亡促进作用更大。

高三尖杉酯碱联合地西他滨治疗老年白血病继发血小板增多症

目的观察高三尖杉酯碱、地西他滨联合治疗对老年白血病继发血小板增多症的疗效。方法选取2013年1月~2016年1月确诊为老年白血病继发血小板增多症的124例患者,按照疗法分为联合组(基础化疗+高三尖杉酯碱+地西他滨)和对照组(基础化疗+高三尖杉酯碱)各62例。结果治疗后,联合组Hb、PLT、WBC恢复效果优于对照组,临床总缓解率72.59%高于对照组53.23%(P<0.05)。组间胃肠道反应、脱发、骨髓抑制、肝肾功能损伤等不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论高三尖杉酯碱联合地西他滨能够促进老年白血病继发血小板增多症患者的血象和骨髓象指标好转,对预后具有改善作用。

趋化性细胞因子与巨核系造血调控的研究进展

趋化性细胞因子是近年研究的一个热点 ,其对巨核系造血起着正向和负向调控作用 ,具有很好的临床应用前景。本文就趋化性细胞因子及其受体与巨核系造血调控的作用进行了综述。

PAD方案成功治疗难治性套细胞淋巴瘤一例报告

1病例报告 患者女，58岁，2009—01无明显诱因出现胸闷，伴有夜间阵发性干咳，无发热、盗汗、体质量减轻等。2009—03，上述症状加重，当地医院B超检查提示脾大；胸片检查提示双侧胸腔积液（中量）。抗感染、抽胸腔积液等对症治疗无效，2009—04—03来我院，住院后检查B超：双侧颈部、腋窝、腹股沟及腹膜后多发肿大淋巴结。

应用激光共聚焦显微镜检测R-S细胞内凋亡相关蛋白

霍奇金病（Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＨＤ）的病理特征为大量炎细胞背景中可见占瘤体细胞总数１％或更少的ＲｅｅｄＳｔｅｒｎｂｅｒｇ（ＲＳ）细胞。有关ＲＳ细胞的发生一直是淋巴组织病理学领域的研究难点之一。既往从瘤细胞增殖角度的研究较多，而甚少...

多发性骨髓瘤患者332例疗效分析

目的回顾性总结国内多发性骨髓瘤（MM）患者的临床特征、治疗结果，以提高和改善对MM患者的疗效。方法回顾分析2002年1月1日至12月31日间国内22家医院332例初诊的MM病例。对这些患者进行为期3年的随访。结果一线治疗方案中，325例患者选择化疗，占97．9％，7例患者选择造血干细胞移植（SCT），占2．1％；共有197例（59．4％）患者接受了二线治疗，其中选择化疗和SCT的分别为190例（96．5％）和7例（3．6％）；共有92例（27．7％）患者接受了三线治疗，其中选择化疗和SCT的分别为88例（95．7％）和4例（4．4％）。主要药物不良事件为危及生命的感染19．3％、严重贫血19．3％、深静脉血栓1．2％、血小板减少16．9％、中性粒细胞减少性发热18．1％。结论一些传统MM治疗方案有一定疗效并适合不同患者，期待新的治疗方法进一步改善患者预后。

多发性骨髓瘤生物学研究与新药靶向治疗

多发性骨髓瘤（MM）是一种主要侵犯中老年人群的恶性单克隆性浆细胞疾病。MM细胞的某些特征类似于长命的后生发中心浆细胞，如具有较强骨髓依赖性与广泛的Ig基因体细胞高频突变。但与终末分化生理性浆细胞不同，1％-3％MM细胞处于分裂周期；部分MM细胞（CD19-CD45。“CD38’CD138’）与肿瘤干细胞类似，保留着极高的增殖潜能。临床上，MM主要表现为溶骨病变、贫血、免疫缺陷及肾功能不全。现代治疗手段并没有从根本改变上MM的不可治愈性．只是将患者的平均生存期由3年延至6年以上。