原子吸收光谱法测定血清中不同化学形态的铜、铁、锌

融合分子生物学技术与原子吸收光谱对血清中元素铜、铁和锌的化学形态进行研究。用60%乙醇低温(4℃)沉淀血清蛋白的方法将血清中的铜,铁,锌分为结合态和非结合态,原子吸收分光光度计分别测定血清中Cu,Fe和Zn三种元素的总量及非结合态含量,通过减差法求出血清中结合态元素含量,从而建立了Cu,Fe和Zn元素这两种化学形态的分离分析方法,并讨论了有关的实验条件。该方法铜、铁和锌的检出限分别为9·84×10-3μg·mL-1,2·76×10-2μg·mL-1,1·06×10-3μg·mL-1,相对标准偏差为0·30%～2·31%,回收率为95·0%～104·0%。该法已应用于SD大鼠血清中Cu,Fe和Zn三种元素不同化学形态的测量。

遗传学技术在神经科学中的使用策略

近年来，在神经科学领域，遗传学技术的兴起实现了选择性靶向操控细胞活性的革命性改变，其中，使用最普遍的技术是化学遗传学和光遗传学。两者的用途均是激活或抑制某一特殊类型神经元。通过观察该神经元生物学特性的改变，所在神经通路的可塑性改变以及动物行为学变化，综合分析明确某一类型神经元的生物学功能。二者的差异在于受体被激活的途径。本文对以上两种技术做以慨要介绍，考虑到二者相似性很大，因此，本文首先对化学遗传学进行详细介绍，然后采用对比的方式介绍光遗传学及其使用策略。

疲劳大鼠血清不同化学形态铜、锌与其自由基代谢相关性分析

[目的]探讨疲劳SD大鼠血清铜、锌这两种微量元素不同化学形态含量变化与大鼠血清抗氧化能力的相互关系。[方法]采用动物试验,用10d递增负荷的游泳运动方式建立SD大鼠运动疲劳模型,把大鼠血清中的铜、锌分为结合态和非结合态,原子吸收分光光度计测定,同时检测大鼠血清总超氧化物歧化酶活性,抑制羟自由基能力和丙二醛含量。[结果]与正常大鼠相比,疲劳大鼠血清中总Zn以及结合与非结合态的含量明显减少(P<0.05),各种形态的铜含量增加(P<0.05)。血清超氧化物歧化酶酶活性和抑制羟自由基能力较正常组降低(P<0.05),丙二醛含量升高(P<0.05);相关性研究发现:大鼠血清中各种形态的铜、总锌以及结合态锌含量与其抗氧化能力具有相关性(P<0.05)。[结论]运动时大鼠血清中不同化学形态微量元素铜、锌代谢紊乱可造成血清抗氧化能力下降,参与疲劳形成机制。

疲劳大鼠机体铜、锌变化与其自由基代谢相关性分析

目的:探讨疲劳状态下SD大鼠肝、肾、骨骼肌、血清中铜、锌这两种微量元素的分布变化,并分析其变化与大鼠机体抗氧化能力的相关性变化规律。方法:健康雄性SD大鼠14只,随机分为运动组和对照组,每组7只,运动组采用10d递增负荷的游泳运动方式建立SD大鼠运动疲劳模型,对照组不给予运动,取实验大鼠肝、肾、骨骼肌和血清,经常规消化后,用原子吸收分光光度计测定其铜、锌含量,同时检测相应组织中总超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量,最后进行比较和统计分析。结果:与正常组大鼠比较,疲劳大鼠肝组织和血清铜含量增加(P<0.05),肝组织锌含量增加(P<0.05),血清锌含量以及骨骼肌铜、锌含量减少(P<0.05),肾脏组织铜、锌变化不明显(P>0.05);疲劳组大鼠肝、肾、骨骼肌、血清中超氧化物歧化酶活性下降(P<0.05),丙二醛含量除骨骼肌中变化不明显外,肝、肾、血清中增加(P<0.05);相关性研究发现大鼠肝、血清、骨骼肌的抗氧化能力与其相应组织的铜、锌含量具有相关性(P<0.05)。结论:疲劳状态下,大鼠肝、血清、骨骼肌中微量元素铜、锌代谢发生紊乱,影响相应组织抗氧化能力,可能参与了疲劳的形成。

基于FISH技术研究线粒体分裂蛋白Drp1 mRNA在小鼠杏仁复合体的分布

目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对Drp1在杏仁复合体的分布特点进行描述。方法:本实验通过自行设计Drp1基因的引物、合成探针,同时采用(FISH)进行染色观察,得到Drp1 mRNA在小鼠杏仁核复合体的分布特点。结果:研究发现,Drp1 mRNA几乎分布于全部杏仁核,且在内侧杏仁核、皮质杏仁核和基底杏仁核的表达水平非常高。亚细胞水平研究进一步表明,Drp1 mRNA全部位于神经元胞体,特别是核周区域,而在突起处未见其表达。结论:以上结果提示,Drp1可能通过调节杏仁复合体处神经元的线粒体的分裂状态,参与动物的内脏活动、防御功能以及情绪变化。但是具体机制尚需进一步研究。