留学生人体解剖学网络学习现状调查分析与对策

目的 为了开发适合医学留学生教育特色的英文人体解剖学教学资源,对留学生人体解剖学网络学习现状进行调查.方法 采用问卷调查法对2016级—2017级临床医学专业228名留学生进行调查,收回有效答卷217份.结果 多数留学生利用网络自主学习人体解剖学知识(84.79%),互联网已成为留学生获取学习资源的主要途径;留学生对英文人体解剖学网络学习资源的需求较高(61.5%~84.33%),但获取学习资源的途径主要依赖境外医学网站(99.54%);留学生学习积极性较高,但教学时间有限,师生交流途径较少.结论 开发英文学习资源、建设人体解剖学全英文精品资源共享课可以有效地促进留学生自主学习,符合留学生人体解剖学教学可持续发展的需要.

基于生物信息学分析CENPN在肝癌中的预后价值和作用机制

目的:基于生物信息学方法分析着丝粒蛋白N(CENPN)在肝细胞癌(LIHC)中的表达及预后价值,并预测其调控LIHC的可能机制。方法:基于TIMER2.0和GEPIA2数据库分析CENPN在TCGA LIHC组织中的表达。基于GEPIA2数据库,通过Cox和Logistic方法分析CENPN表达与LIHC患者病理分期和预后的关系。基于LinkedOmics数据库,通过Spearman方法分析CENPN在TCGA-LIHC中的共表达基因。基于DAVID数据库对Top 500差异性共表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,并在KEGG网站中可视化细胞周期通路。基于cBioPortal数据库,通过Spearman和Pearson方法分析CENPN表达与甲基化的关系。基于TIMER数据库,通过Spearman方法分析CENPN表达与6种肿瘤浸润免疫细胞的关系。结果:CENPN在LIHC组织中的表达显著高于正常组织。此外,随着肿瘤分期进展,CENPN表达明显增多,在LIHC患者中,CENPN高表达患者总体生存期明显低于低表达患者,CENPN高表达患者无病生存期明显低于低表达患者。与CENPN表达存在相互作用的差异表达基因有TK1、C16orf61、KARS、COX4NB、COG4等,其主要富集于细胞裂解、蛋白质结合、细胞周期等生物过程。LIHC中CENPN的高表达与甲基化有关。CENPN的表达与6种肿瘤免疫细胞变化均相关。结论:CENPN可作为LIHC预后不良的标志物,其在LIHC中的高表达与甲基化有关,可能通过细胞周期和影响免疫细胞浸润相关通路调控LIHC的发生与发展。

食管癌细胞中沉默Survivin基因对ATG16L1表达的影响

目的探讨食管癌Eca109细胞中沉默生存素(Survivin,SVV)基因的表达对自噬相关蛋白ATG16L1表达的影响。方法使用雷帕霉素(rapamycin,RAPA)在Eca109细胞中诱导建立自噬模型;使用Survivin抑制剂YM155和Survivin-siRNA作用于自噬模型,采用免疫荧光法观察自噬体数量变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平,Western blot法检测LC3-Ⅱ、p62、Survivin、ATG16L1的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测Survivin与p62的作用关系。结果RAPA诱导Eca109细胞后,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高,p62蛋白的表达水平降低,同时细胞内自噬体数目增多。在RAPA组中ATG16L1mRNA和蛋白表达水平均升高。在细胞自噬模型中沉默Survivin表达后,Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平均降低。过表达Survivin能够显著抑制p62的启动子活性,下调p62的蛋白表达。结论沉默食管癌Eca109细胞中Survivin基因表达可以下调ATG16L1的表达,可能与Survivin靶向抑制p62有关。

高糖环境下BCA-1通过Erk信号通路促进人脂肪间充质干细胞增殖和迁移

目的探讨高糖环境下B细胞趋化因子(BCA)-1对人脂肪间充质干细胞(hAdMSC)增殖和迁移的影响及其分子机制。方法高糖培养基培养的hAdMSC分为高糖对照组、BCA-1组(浓度分别为25、50、75μmol/L)和细胞外信号调节激酶(Erk)抑制剂组。CCK8实验检测各组hAdMSC增殖的吸光度值(A值),Transwell实验检测各组hAdMSC迁移率,Western印迹或酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组hAdMSC的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝裂原活化蛋激酶(MAPK)或血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果细胞高糖环境下,25、50、75μmol/L BCA-1组hAdMSC的A值逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),hAdMSC的迁移率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01);BCA-1组hAdMSC的PI3K、MAPK、VEGF蛋白含量均随着BCA-1浓度的增加而高表达,差异有统计学意义(均P<0.01);与25、50、75μmol/L BCA-1组hAdMSC分别相比,相应各Erk抑制剂组hAdMSC的A值和迁移率均明显降低(均P<0.01),各Erk抑制剂组hAdMSC的PI3K、MAPK和VEGF蛋白表达均分别低于相应的BCA-1组hAdMSC,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论高糖环境下,BCA-1通过PI3K-Erk-MAPK信号通路,上调hAdMSC旁分泌VEGF蛋白,促进hAdMSC增殖和迁移。

食管癌细胞中脂多糖对肿瘤坏死因子α诱导程序性细胞死亡配体1表达的影响

目的探讨在食管鳞癌Eca-109细胞中脂多糖(LPS)通过Jak2/Stat3信号通路对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导程序性细胞死亡配体1(PD-L1)表达的影响及意义。方法2020年5―10月,在TNF-α诱导下,分别使用LPS干预食管鳞癌Eca-109细胞3、6、12、24 h以及不同浓度的LPS干预食管鳞癌Eca-109细胞24 h,应用蛋白质印迹法检测p-Jak2、p-Stat3、PD-L1蛋白表达水平的变化;应用流式细胞技术检测LPS干预对Eca-109细胞凋亡的影响。结果与对照组相比,TNF-α组中p-Jak2蛋白表达(0.79±0.05比0.63±0.11)、p-Stat3蛋白表达(1.48±0.24比0.45±0.08)、PD-L1蛋白表达(0.92±0.15比0.55±0.11)均升高(P<0.05),同时LPS组中凋亡率[(8.20±1.65)%比(4.77±0.15)%]和TNF-α+LPS干预组中凋亡率[(7.63±1.37)%比(4.77±0.15)%]明显升高(P<0.05)。与TNF-α组相比,TNF-α+LPS干预组中p-Jak2蛋白表达(0.46±0.05比0.79±0.05)、p-Stat3蛋白表达(1.10±0.22比1.48±0.24)、PD-L1蛋白表达(0.59±0.08比0.92±0.15)明显降低(P<0.05)。LPS的干预下调p-Jak2、p-Stat3、PD-L1的蛋白表达且呈浓度依赖性。结论LPS通过干预Jak2/Stat3信号通路下调PD-L1的表达水平从而对食管鳞癌Eca-109细胞的免疫逃逸机制进行调控,为进一步探索LPS干预食管癌发生发展的分子机制提供了实验基础。

TNF-α在食管鳞癌细胞中对PD-L1表达的影响

目的探讨TNF-α在食管鳞癌细胞株Eca109中对PD-L1表达的影响以及PKA/CREB在TNF-α调节PD-L1表达中的作用。方法体外培养食管鳞状细胞癌Eca109细胞,实验分为空白对照组、TNF-α组(20 ng/ml TNF-α诱导24 h)和TNF-α+Staurosporine组(先20 ng/ml Staurosporine作用15 min,再加入20 ng/ml TNF-α诱导24 h)。应用qRT-PCR检测PD-L1 mRNA水平,应用免疫荧光染色观察PD-L1的表达情况,应用Western blot检测PD-L1、p-CREB和PKA的蛋白表达水平。结果qRT-PCR、免疫荧光染色和Western blot检测结果显示,与空白对照组比较,TNF-α组中PD-L1 mRNA和蛋白水平的表达升高(P<0.05);与TNF-α组比较,TNF-α+Staurosporine组PD-L1 mRNA表达降低(P<0.05),PD-L1、p-CREB和PKA蛋白表达降低(P<0.05)。结论TNF-α能够促进食管鳞癌细胞株Eca109中PD-L1的表达,TNF-α对PD-L1的调节可能与PKA-CREB有关。

氟马替尼耐药K562细胞株耐药机制的初步探讨

目的:通过蛋白印迹(Western blot)试验检测氟马替尼(FL)耐药人慢性髓性白血病(CML)细胞株K562-RF的多药耐药相关蛋白4(MRP4)和人磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)的表达,初步探讨其耐药机制。方法:采用Western blot试验检测FL耐药人CML细胞株K562-RF耐药相关转运蛋白MRP4和p-EGFR的表达情况。结果:K562-RF细胞在正常培养环境下MRP4表达较未耐药细胞K562显著增强(P<0.01),而氟马替尼处理后K562-RF细胞的MRP4表达明显减弱(P<0.05),但K562细胞的表达却显著增强(P<0.01)。氟马替尼处理后的K562细胞p-EGFR表达显著下降(P<0.01),而K562-RF细胞的p-EGFR表达下降不明显(P>0.05)。结论:K562-RF细胞中的耐药相关转运蛋白MRP4和p-EGFR表达水平升高,与FL耐药可能相关。

自制解剖学双语微课促进护理学专业医学生综合能力培养

目的探讨自制解剖学双语微课对护理学专业医学生自主学习能力、医学英语水平和知识表达技能等综合能力培养的影响。方法成立学习小组,教师指导学生独立完成微课制作。以2017级和2018级护理学专业医学生为对照组和试验组,在试验组教学与学生自学中应用微课。对比考试成绩和分析调查问卷,验证自制微课对培养学生综合能力的作用。采用SPSS 20.0进行t检验。结果自制微课53部;与对照组相比,试验组期末理论及实验考试成绩均提升(P<0.05),其中学习小组成员成绩优秀率达31.25%(10/32);问卷结果显示试验组使用微课课堂教学满意度达90.24%(74/82),85.37%(70/82)的学生希望参与微课制作,100.00%(40/40)的学习小组成员认为制作微课带动了自主学习,82.50%(33/40)以上的学生表示知识表达得到有效锻炼,67.50%(27/40)的学生的医学英语从中获得提升。结论自制解剖学双语微课是实现护理学专业医学生综合能力培养目标的有效手段。

THP-1来源的M1型巨噬细胞对食管鳞癌细胞的凋亡、增殖与迁移作用

THP-1细胞经LPS和IFN-γ活化诱导为经典激活的M1型巨噬细胞。M1型巨噬细胞在肿瘤发生的初期发挥着重要的作用,能够识别并清除肿瘤细胞,但对食管鳞癌细胞Eca109的具体调节作用尚不清楚。本研究利用THP-1细胞来源的M1型巨噬细胞与食管鳞癌细胞Eca109共培养的模型;用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测TNF-α和IL-1β mRNA的表达;用流式细胞技术、Transwell实验检测M1型巨噬细胞与食管鳞癌细胞Eca109共培养24 h后对Eca109细胞凋亡、增殖与迁移的影响。结果显示,诱导后的THP-1细胞完全贴壁并有伪足出现;与M0细胞相比,诱导的M1型巨噬细胞相关细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA表达均显著增高(P<0.01);与M1型巨噬细胞共培养后可以促进食管鳞癌细胞的凋亡(P<0.01)、抑制食管鳞癌细胞的增殖(P<0.01)与迁移(P<0.001)。本研究结果提示,THP-1来源的M1型巨噬细胞与食管鳞癌细胞Eca109共培养可以促进食管鳞癌细胞Eca109的凋亡,抑制其增殖与迁移。

食管癌细胞中Survivin对Smad3及PD-L1表达调控的影响

目的探讨食管鳞癌Eca109细胞中,经炎性因子白介素6(interleukin-6,IL-6)诱导激活Jak2/Stat3信号通路促使程序性细胞死亡配体1(programmed cell death ligand1,PD-L1)表达升高的调控过程中,生存素(Survivin)对Smad3及PD-L1的调控作用。方法选用IL-6诱导食管鳞癌Eca109细胞6、12、24 h,激活Jak2/Stat3信号通路,再使用Jak2/Stat3信号通路抑制剂AG490干预24 h,应用免疫印迹试验(Western blot)检测p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3和PD-L1蛋白表达量的变化;在IL-6诱导下,使用Survivin抑制剂YM155干预Eca109细胞24 h,应用Western blot方法和流式细胞术分别检测Survivin、p-Smad3、Smad3和PD-L1蛋白表达量的变化以及不同分组细胞凋亡的情况。结果使用IL-6诱导Eca109细胞6、12、24 h后,Western blot检测结果显示,p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、p-Smad3、Smad3和PD-L1的蛋白表达量升高,以12、24 h最为明显(均P<0.05);使用抑制剂AG490干预24 h后,p-Jak2、Jak2、p-Stat3、Stat3、Survivin、pSmad3、Smad3和PD-L1的蛋白表达水平均下调(均P<0.01);抑制剂YM155在抑制Survivin表达的同时降低了p-Smad3、Smad3和PD-L1的表达(均P<0.05);使用YM155干预后,促进食管鳞癌Eca109细胞的凋亡(P<0.05)。结论在食管鳞癌Eca109细胞中,IL-6激活Jak2/Stat3信号通路后,存在Survivin对Smad3和PD-L1的正向调控关系。提示Survivin可能通过参与调节肿瘤的免疫逃逸,从而影响食管癌的发生发展,为靶向PD-L1的免疫治疗提供可靠的实验依据以及理论基础。

来华留学生数字化系统解剖学双语试题库的建设与应用

目的探讨数字化系统解剖学双语试题库对临床医学专业留学生教学资源创新与教学质量提升的作用。方法组建试题库并用于2018级留学生(实验组)教学。通过对比2017级留学生(对照组)平时测试、期末理论和实验考试成绩验证试题库应用价值。利用调查问卷获得留学生使用反馈,进一步评价试题库的开发可行性和教学改革推动作用。采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析,两组考核成绩进行独立样本t检验,计量资料以(均数±标准差)表示。结果两组学生平时测试成绩差异无统计学意义(P>0.05),但实验组数字化标本考试与期末理论考试成绩均高于对照组(P<0.05)。问卷结果显示,89.55%(155人)以上的留学生在学习资源、试题质量、考试模式和使用评价等方面对试题库给予了高度评价,但仅有52.02%(90人)的留学生认可试题的双语体现形式。结论数字化系统解剖学双语试题库有效拓展了教学资源,推动了留学生教学改革。