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题名牛CART基因启动子片段重组载体构建
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作者
郭跃荣
任静
李鹏飞
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机构
繁峙县现代农业产业集聚区服务中心
山西农业大学生命科学学院
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出处
《中国牛业科学》
2023年第3期40-44,共5页
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基金
山西省应用基础研究计划面上项目(20210302123380)
山西农业大学校地合作项目(2021HX23,2022HX010)
山西省现代农业产业技术体系建设专项。
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文摘
[目的]构建以及鉴定可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regulated transcript peptides,CART)基因启动子片段双荧光素酶报告载体,为后续筛选CART基因核心启动子奠定试验基础。[方法]美国国家生物技术信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)基因数据库(登录号:NC_037347.1)获取牛CART基因序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增启动子片段,经双酶切后连接pGL3-Basic载体。将pGL3-1222载体、pGL3-Control载体和pRL-TK载体转染293T细胞,检测细胞相对荧光活性。[结果]pGL3-1222载体测序结果显示与目标序列一致,证明载体构建成功;转染293T细胞后,细胞状态良好且绿色荧光分布均匀、强度适中,则转染操作无误;检测相对荧光活性显示pGL3-1222组相对荧光活性显著高于pGL3-Basic,则证明CART基因启动子片段具有活性。[结论]CART基因启动子-1200 bp—+22 bp区域双荧光素酶载体构建成功。
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关键词
CART
启动子
双荧光素酶报告基因
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Keywords
CART
promoter
dual luciferase reporter gene
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分类号
S823
[农业科学—畜牧学]
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