铁皮石斛原球茎对潮霉素及卡那霉素的敏感性研究

为了探索农杆菌介导的遗传转化中铁皮石斛对抗生素的耐性,本试验以铁皮石斛原球茎为原材料,在培养基中分别添加不同浓度潮霉素和卡那霉素进行培养,筛选出最适合铁皮石斛遗传转化的抗生素种类和浓度。研究表明:潮霉素浓度为40 mg/L时为临界浓度,接种一周后,植株出现黄化现象,2周后,出现死亡植株,培养17周后,铁皮石斛完全死亡。潮霉素浓度越大,铁皮石斛褐化和黄化速率增加,死亡速率越快,浓度低于40 mg/L,铁皮石斛则拥有一定的存活率,为15%左右。当卡那霉素浓度为600 mg/L,铁皮石斛的褐化和黄化现象出现在培养后第3周,培养17周后,浓度为200 mg/L、400 mg/L、600 mg/L卡那霉素,铁皮石斛原球茎死亡率依次为72%、68%、78%,之后仍保持一定的存活量。实验结果表明,铁皮石斛对潮霉素敏感性远大于卡那霉素,由此说明,铁皮石斛遗传转化中应选用潮霉素作为抗生素,而且使用浓度应在40 mg/L以上,卡那霉素不能用于铁皮石斛遗传转化。