骨髓间充质干细胞治疗实验性肺动脉高压大鼠的疗效观察

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MMSCs)移植治疗大鼠实验性肺动脉高压(PAH)的疗效及血流动力学指标的变化。方法:取SD大鼠的骨髓,经贴壁筛选法体外培养并纯化MMSCs,移植前采用Hoechst 33342荧光染料标记;实验动物随机分为3组:MMSCs移植组(M组),单纯肺动脉高压组(H组)和正常对照组(N组);M组采用野百合碱(50mg/kg)注射复制PAH模型成功后3周,经舌下静脉移植5×106/ml的MMSCs细胞悬液1ml;H组复制PAH模型后3周,移植1mlL-DMEM细胞培养液,C组不作任何处理;饲养4周后,观察各组动物动脉血气指标、右心室收缩压、右心指数及肺小动脉血管的变化。结果:H组大鼠注射野百合碱21d后,右心室收缩压、右心指数、管壁中膜厚度明显增高,但管腔面积与血管总面积比值及动脉血pH值、PaO2、HCO3-明显下降;M组移植MMSC28d后,较H组右心室收缩压明显降低[移植组为(32.0±2.32)mmHg,模型组为(48.30±1.56)mmHg],右心指数下降[移植组为(38.80±3.24)%,模型组为(45.10±3.43)%,两组相比P<0.05],血气分析结果显示M组pH值、PaO2、HCO3-值接近正常对照组;荧光显微镜观察到M组荧光标记的MMSCs在肺内定植且分化成大量的侧枝循环,肺动脉重构得到有效逆转。结论:MMSCs移植可有效减轻甚至逆转野百合碱诱导的肺动脉高压的进程,明显改善心功能及血流动力学指标。

骨髓间充质干细胞移植治疗生精细胞损伤模型大鼠的实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MMSCs)在睾丸内定向分化为生精细胞用于治疗实验性雄性不育模型大鼠的可行性。方法:复苏冻存的MMSCs-GFP并培养传代后经睾丸网移植到经白消安处理的生精细胞损伤模型大鼠睾丸曲细精管内,移植后8周采样,观察睾丸质量指数、组织学表现和供体细胞分布,运用免疫荧光检测生殖细胞表面特异标志c-kit的表达。结果:MMSCs-GFP移植组右侧受体睾丸质量指数与模型组大鼠及自体未细胞移植的左侧睾丸相比有差异(P﹤0.01),与正常组大鼠睾丸质量指数相比无差异(P﹥0.05);光镜下显示曲精管内生精上皮明显恢复,荧光显微镜下观察MMSCs-GFP大部分迁移至曲精管基底部,免疫荧光结果显示移植组与自身未移植组相比,睾丸曲细精管内精原细胞表面特异标志基因c-kit表达有差异。结论:细胞冻存不影响MMSCs的增殖能力,MMSCs在体内生精微环境中能够定植并定向分化为生殖细胞。

人包皮成纤维细胞支持生长的人胚胎干细胞小鼠体内分化全能性观察

目的观察用人包皮成纤维细胞(h PFF)支持生长的人胚胎干细胞(h ESC)的体内全能性。方法将第20代h PFF支持生长的h ESC和h PFF分别接种到2只严重联合免疫缺陷的小鼠(SCID)小鼠体内,分别为观察组和对照组,观察5周内两组小鼠一般状态及是否有畸胎瘤形成。取观察组小鼠畸胎瘤制作组织学切片,验证其是否包含了源于全部3个胚层的各种分化细胞。结果观察组SCID小鼠接种后第5天即可在接种部位触到包块,包块进行性增大。观察组小鼠包块理组织学检查显示,该肿块包含3个胚层的组织结构,具备畸胎瘤的病理组织学特点。结论用h PFF支持生长的h ESC有体内分化全能性。

放化疗联合脑转移瘤放疗治疗非小细胞肺癌脑转移的临床疗效分析

目的分析化疗同期胸部三维放疗联合脑转移瘤放疗治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)单纯脑转移的疗效及影响预后的因素。方法回顾性分析52例单纯脑转移且脑转移瘤及原发肿瘤均接受放疗的NSCLC患者的临床资料,Kaplan-Meier法计算生存率并行log-rank检验,Cox回归模型行多因素预后分析。结果全组患者中位随访时间为13.5个月(4~49个月),中位生存期为13.0个月(95%CI:11.2~14.8),1年、2年、3年生存率分别为53.8%、13.5%和3.8%。胸部原发肿瘤体积<118 cm^3组和≥118 cm^3组的中位生存期分别为14.0个月(95%CI:11.6~16.4)和12.0个月(95%CI:10.7~13.3),1年生存率分别为66.7%和42.9%,2年生存率分别为20.8%和0,3年生存率分别为8.3%和0,两组总生存率比较差异有统计学意义(χ~2=5.648,P=0.017)。胸部原发肿瘤放疗剂量(dose to PTV,DTPTV)≥66 Gy组和DTPTV<66 Gy组的中位生存期分别为13.0个月(95%CI:10.8~15.2)和14.0个月(95%CI:10.8~17.2),两组比较差异无统计学意义(χ~2=0.064,P=0.80)。多因素预后分析显示,原发肿瘤体积是影响总生存率的独立预后因素。结论化疗同期胸部三维放疗联合脑转移瘤放疗治疗NSCLC单纯脑转移取得较好疗效,原发肿瘤体积较小的患者生存获益更大。

DEN-2 NGC株感染Balb/c小鼠TH1/TH2类细胞因子产生的差异

目的:通过观察2型登革病毒(DEN2)NGC株初次感染和再次感染Balb/c小鼠后,小鼠血浆中TH1和TH2类细胞因子的产生及其动态变化,研究DEN2感染的免疫机制。方法:用不同量的DEN2 NGC株经皮下多点注射,建立Balb/c小鼠感染模型,用间接ELISA法测定感染后不同时间点小鼠血浆IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的含量。结果:1.在初次或再次感染阶段,DEN2 NGC株各感染组产生IL-4、IFN-γ、IL-2、IL-5、IL-6、IL-10与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。(1)在初次感染阶段,NGC株各感染组血浆IL-2、IL-5、IL-6于第4,6,8天出现;在再次感染阶段,各感染组产生IL-2、IL-5、IL-6均于第1天迅速升高;IL-2水平于第4天达高峰(104448.46±13314.1)ng/L,维持5～7天后迅速下降;IL-5于48h达到高峰(135.125±46.75)ng/L;各组小鼠IL-6产生的动态相似,在再次感染后第1天达高峰(555.823±44.639)ng/L后逐渐下降。(2)初次感染早期,IL-4水平明显升高,而IFN-γ处于较低水平;再次感染后第1天,IL-4水平达最高峰(4294.668±349.038)ng/L,IFN-γ则于第4天和第11天达较高水平,两者的产生彼消此长,其水平与感染病毒量有关。2.在初次或再次感染阶段,用不同量DEN2 NGC株感染Balb/c小鼠产生的细胞因子水平有差异。结论:DEN2 NGC株初次和再次感染Balb/c小鼠后,TH1和TH2应答均可发挥一定作用,二者相互影响,TH细胞及其产生的CK在DEN感染的发病机制中起重要作用。

基于倾向性评分匹配法比较培美曲塞或多西他赛联合顺铂治疗Ⅳ期肺腺癌的临床疗效

目的比较培美曲塞或多西他赛联合顺铂治疗表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变状态未知的Ⅳ期肺腺癌的临床疗效。方法回顾性分析2011年1月至2015年12月贵州医科大学附属医院和贵州省肿瘤医院收治的147例Ⅳ期肺腺癌患者的临床资料。采用倾向性评分匹配法,均衡组间混杂因素后比较培美曲塞+顺铂化疗方案(PP组)与多西他赛+顺铂化疗方案(DP组)的疗效和安全性。结果倾向性评分匹配后,PP组与DP组的客观缓解率比较差异无统计学意义(60.0% vs 60.0%,χ~2<0.001,P>0.999),两组疾病控制率比较差异亦无统计学意义(86.7% vs 82.5%,χ~2=0.284,P=0.594);PP组中位OS优于DP组(17.0个月 vs 9.0个月,χ~2=4.411,P=0.036),中位PFS亦优于DP组(8.0个月 vs 5.0个月,χ~2=4.299,P=0.038);PP组死亡风险较DP组降低52.4%(HR=0.476,95%CI:0.282～0.805,P=0.006);Ⅲ～Ⅳ级中性粒细胞减少发生率低于DP组(28.9% vs 64.4%,χ~2=11.429,P=0.001)。结论在EGFR突变状态未知的Ⅳ期肺腺癌中,培美曲塞+顺铂化疗方案较多西他赛+顺铂化疗方案的临床疗效和预后更好。

非寡转移Ⅳ期非小细胞肺癌化疗同期胸部三维放疗预后分析

目的非寡转移Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者能否从原发肿瘤放疗中获益尚不明确,本研究旨在探讨非寡转移Ⅳ期NSCLC患者化疗同期胸部三维适形放疗(3-dimensional conformal radiation therapy,3DCRT)的疗效及预后影响因素。方法选取2003-01-23-2012-05-13贵州省肿瘤医院404例患者参加两项前瞻性临床研究。入组标准:(1)初诊的且经组织病理学或细胞学确诊为NSCLC;(2)年龄18~80岁;(3)KPS评分≥70;(4)接受≥2个周期化疗且整个病程中未接受分子靶向治疗;(5)胸部原发肿瘤接受3DCRT或调强放疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT);(6)胸部原发肿瘤接受放疗剂量≥36Gy。寡转移定义为转移病灶<5个,非寡转移定义为转移病灶≥5个。主要采用以铂类为基础的两药联合化疗。Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank法组间比较及单因素预后分析,Cox模型行多因素预后分析。结果符合入组标准的274例患者为研究对象,其中183例为非寡转移患者。中位生存时间为13.0个月(95%CI为11.9~14.1),1、2和3年总生存率(overall survival,OS)分别为50.7%、15.8%和9.1%;原发肿瘤放疗剂量≥63Gy的1、2和3年OS率为55.3%、22.7%和17.0%,<63Gy的1、2和3年OS率为46.5%、9.3%和2.5%,χ~2=11.497,P<0.001;寡转移患者的1、2和3年OS率分别为59.3%、22.0%和15.2%,非寡转移患者的1、2和3年OS率分别为46.4%、12.7%和6.0%,χ~2=5.741,P=0.017。寡转移(χ~2=7.571、P=0.006)和非寡转移(χ~2=8.242、P=0.004)患者分别进行分析,原发肿瘤放疗剂量≥63Gy仍是影响总生存的因素。非寡转移患者多因素分析显示,原发肿瘤放疗剂量、原发肿瘤体积、化疗疗效达及治疗后KPS是影响总生存的独立因素。亚组分析显示,化疗有效(完全缓解和部分缓解)的非寡转移患者,原发肿瘤放疗剂量≥63Gy是影响生存的因素(χ~2=4.419,P=0.036);化疗有效和无效的非寡转移患者,原发肿瘤放疗剂量≥63Gy与<63Gy的总生存相似,χ~2=1.947,P=0.163。结论原发肿瘤放疗剂量、肿瘤体积、化疗疗效和治疗后KPS是影响非寡转移的Ⅳ期NSCLC患者的独立因素。在有效的系统化疗基础上,非寡转移的Ⅳ期NSCLC患者可能从原发肿瘤的积极放疗中生存获益。

Ⅳ期NSCLC化疗同期3 DRT前瞻性、多中心Ⅱ期临床研究--临床因素对生存影响（PPRA-RTOG003）

目的：探讨临床因素对Ⅳ期NSCLC化疗同期原发肿瘤3DRT生存的影响。方法对2008—2012年一项前瞻性临床研究再分析入组203例，可评价临床因素178例。化疗为含铂两药方案，中位周期数为4（2～6个周期），原发肿瘤3DRT中位剂量60.3 Gy （36．0～76.5 Gy）。 Kaplan-Meier法计算OS并Logrank检验和单因素分析，Cox回归模型多因素分析。结果全组1、2、3年OS和中位生存期分别为56％、16％、10％和13个月（95％ CI为11．500～14.500）。单因素分析显示 PLT≤221×10^9／L、Neu≤5．2×10^9／L、WBC＜7×10^9／L、疗后KPS改善的OS显著延长（ P＝0.000、0.022、0.003、0.029），单器官转移、Hb≥120 g／L有延长OS趋势（P＝0.058、0.075）。多因素分析显示WBC＜7×10^9／L、PLT≤221×10^9／L及疗后KPS改善对OS有益（ P均＜0.05）。结论疗前WBC、PLT水平和疗后KPS是化疗同期3DRT Ⅳ期 NSCLC 的预后影响因素。临床试验注册 ClinicalTrials． Gov，注册号：ChiCTRTNC10001026。

治疗后生存状态变化对Ⅳ期非小细胞肺癌化疗同期三维放射治疗生存的影响

目的探讨Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)同期放化疗后生存状态(karnofsky performance status of posttreatment,KPSpost)变化对生存的影响及其相关因素。方法322例中纳入分析279例,病理学确诊的初治Ⅳ期NSCLC,其中男性198例、女性81例;鳞癌166例、腺癌87例、未分型22例;中位年龄58岁(22~80岁);完成化疗≥2个周期同期原发肿瘤剂量≥36Gy治疗。Kaplan-Meier法并Log-rank检验和Cox回归模型进行总生存(OS)的单因素和多因素分析,χ^2检验及Logistic回归分析探讨KPSpost的相关因素。结果KPSpost改善198例、降低81例。单因素及多因素分析均显示KPSpost改善,生存期延长。χ^2检验和logistic回归多因素分析均显示KPSpost改善与完成化疗4~6个周期同期原发肿瘤剂量≥63Gy、获得近期疗效呈正相关,与血小板不良反应、放射性食管炎分级呈负相关。结论Ⅳ期非小细胞肺癌同期放化疗KPSpost是OS的独立影响因子。化疗4~6个周期同期原发肿瘤剂量≥63Gy、近期疗效获益有利于KPSpost改善,3~4级的血小板不良反应和放射性食管炎显著降低KPSpost。

同期放化疗对不同年龄Ⅳ期非小细胞肺癌生存影响——两项前瞻性研究再分析

目的探讨同期放化疗模式在不同年龄Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)中的生存和不良反应。方法回顾分析两项前瞻性研究的282例Ⅳ期NSCLC临床资料,其中完成≥2周期化疗同期胸部放疗剂量≥36 Gy;青年组(≤45岁)为44例、中年组(46~64岁)为161例、老年组(≥65岁)为77例。不同年龄组临床特征的差异应用χ^2检验,Kaplan-Meier法计算生存率并Logrank检验差异和分层分析,Cox模型多因素预后分析。结果老年病例中男性发病率比中年组和青年组更高。不同年龄组1、2、3、5年总生存(P=0.810);相同性别、病理类型、T分期、N分期、器官转移状态、相同化疗周期、原发肿瘤剂量及相似强度综合治疗模式、近期疗效等总生存均相近(P>0.05);不同年龄组治疗相关不良反应发生率相似。多因素分析显示不同年龄对生存无影响(P>0.05)。结论对可耐受同期放化疗综合治疗模式的不同年龄Ⅳ期NSCLC患者,可获得相似的生存利益且不良反应相近。

DNA损伤及氧化应激在放射性心脏损伤中的作用

放射性心脏损伤(RIHD)是放射诱导的一种进行性加重的疾病,它几乎影响心脏所有结构,从而产生一系列心脏并发症。从早期的无症状到慢性心力衰竭,常需几年至十几年时间。近年来文献报道心脏在正常组织耐受剂量控制下,常规胸部放疗所致的心脏损伤,特别是迟发型心肌损伤问题日益突出。本文综述了DNA损伤及氧化应激在RIHD的发生发展中的作用,现有研究认为RIHD可使心脏僵硬度增加、心肌收缩及舒张功能下降,引起心肌电生理紊乱、心律失常、心功能不全甚至猝死。但目前尚缺乏对RIHD的有效治疗,其根本原因在于对RIHD的原因及发病机制尚未完全阐明。

Ⅲ-Ⅳ期NSCLC同期放化疗后失败模式及寡转移规律探讨

目的探讨Ⅲ-Ⅳ期NSCLC同期放化疗后寡转移失败规律，思考局部放疗意义。方法分析2007-2014年229例初治Ⅲ-Ⅳ期NSCLC同期放化疗后寡转移等失败规律。结果299例NSCLC中Ⅲ期治疗失败88例，原发肿瘤复发±远处转移20例（22．7％）、寡转移27例（30．7％），脑转移最多见；Ⅳ期治疗后失败211例，原发肿瘤复发±远处转移11．4％、原转移灶复发10．0％、原转移器官出现新病灶9．0％，寡与非寡转移中原转移灶复发分别为9／94例和12／117例；脑转移发生率最高（38．2％）。结论Ⅲ期NSCLC寡转移失败近1／3，Ⅳ期仍10％表现为寡转移特征；脑转移是主要失败模式，Ⅳ期NSCLC原发肿瘤根治剂量放疗可降低局部复发失败。

Ⅳ期肺鳞癌三维放疗对生存的影响

目的 回顾性分析Ⅳ期肺鳞癌原发肿瘤三维放疗对生存的影响。方法 病例源自2项前瞻Ⅱ期临床研究,101例鳞癌中完成研究方案88例,原发肿瘤为化疗同期三维放疗。主要观察终点为OS和PFS。Kaplan-Meier计算生存率并Logrank检验和单因素分析,Cox模型多因素分析。结果 88例鳞癌患者1、2、3、5年OS和MST分别为42.2%、13.6%、8.7%、3.1%和10个月,≥63 Gy和〈63 Gy的1、2、3、5年OS及MST分别为45.7%和39.6%、25.7%和4.5%、17.1%和2.8%、7.1%和0%及11月和10个月（P=0.007）;中位PFS分别为9个月和7个月（P=0.032）。4周期化疗同期原发肿瘤剂量≥63 Gy的1、2、3、5年OS和PFS分别为51.9%、29.6%、18.5%、9.9%和9个月,OS和PFS较其他模式显著延长（P=0.001、0.012）;多因素分析原发肿瘤剂量≥63 Gy对OS有影响接近统计学意义（P=0.080）。结论 Ⅳ期肺鳞癌原发肿瘤三维放疗可能延长生存,随放化疗强度提高OS和PFS逐渐延长,原发肿瘤≥63 Gy可能影响OS。