医学遗传学临床实践性教学改革初探

探索基础医学教学与临床实践相结合的新型教学模式。通过在临床医学专业本科2002、2003级的医学遗传学基础医学课程授课中,有计划进行遗传病和相关知识的讲座,同时组织学生参与本科室再研课题和遗传病家系调查等实践活动。达到了使学生理论与实践相结合,将枯燥的遗传学理论变成生动鲜活的临床病例,极大地激发了医学生的自学能力、协作精神和探索创新能力,达到培养厚基础、重能力和高素质的实用性全科医学生目的。

郑州地区248例遗传咨询者的细胞遗传学研究

目的探讨染色体异常在智力低下和性发育不良中的发生情况。方法取受检者外周血淋巴细胞培养,G显带核型分析。结果248例患者中,染色体异常73例,占29.4%。结论在智力低下与性发育不良患者中,染色体检查是必要的诊断方法。

学生对细胞生物学“三卷制”考试方法反映的调查

本文对硕士研究生细胞生物学“三卷制”考试方法的反映进行了调查。结果表明学生对该方法的总体感觉、考题量、考题难度比较满意，对考题难度与得分权重的标准则不很满意。

宁夏2198例男性不育患者的细胞遗传学分析

目的通过对宁夏2198例男性不育患者进行细胞遗传学分析,探讨染色体异常与男性不育之间的关系。方法外周血淋巴细胞培养,常规G显带进行染色体核型分析。结果 2198例男性不育患者中,异常核型232例,检出率10.56%。其中常染色体异常51例,占21.98%;性染色体异常61例(包括性反转1例),占26.29%;染色体多态性120例,占51.73%。结论染色体异常是导致男性不育的重要因素之一。对高危人群进行染色体检查,可为临床提供科学的诊断依据和治疗方案的选择。

大鼠胚胎脑膜组织细胞分离培养及其生物学特性观察

【目的】分离和培养大鼠胚胎脑膜组织细胞,并观察其生物学特性。【方法】在无菌条件下取妊娠14.5～16.5 d大鼠的胚胎脑膜组织,培养传代,在倒置光显微镜和电镜下对细胞形态变化进行动态观察;流式细胞仪检测细胞周期变化;用四唑盐（MTT）法测定细胞生长活力。在细胞传至第4代时加入10μmol/L 5-aza,并观察其对细胞增殖和行为的影响;免疫细胞化学方法检测Desmin、GFAP的表达。【结果】在透射电镜下观察对照组多数细胞为未分化细胞,而实验组可见有成纤维样细胞和胶质样细胞的形态变化;流式细胞仪分析经5-aza诱导3 d后,处于增殖状态的S期细胞比率为8.1%,较对照组9.7%为低;经MTT法检测表明5-aza明显抑制胚胎脑膜组织细胞的增殖。免疫细胞化学检测结果表明,胚胎脑膜组织细胞经5-aza诱导8 d Desmin和GFAP的表达均较对照组显著增高,阳性率分别达51.2%和52.3%。【结论】5-aza对胚胎脑膜组织细胞生长有明显抑制作用,并诱导其分化成纤维样细胞和胶质样细胞。

流产夫妇100对细胞遗传学分析

目的分析染色体核型与流产的关系。方法对100对自然流产,生育畸形儿的患者进行外周血淋巴细胞培养,常规制片,G-显带分析。结果100对流产夫妇染色体核型,其中异常核型21例,占流产夫妇发生率的10.5%。结论夫妻双方染色体异常与习惯性流产、生育畸形儿、死胎有很大的关系。对流产夫妇进行细胞遗传学排查,具有重要的临床意义,不仅有利于病因的分析与诊断,而且也为临床提供重要的依据。

性分化异常患者的细胞和分子遗传学检测

目的 通过对 16例性分化异常患者进行细胞遗传学和Y染色体上的性别决定区 (SRY)基因检测 ,为临床检测提供参考 ,并对性分化异常机制进行探讨。方法 对染色体G显带与聚合酶链反应对性分化异常患者进行染色体核型分析与SRY基因的检测。结果 7例 4 6 ,XY患者SRY均阳性 ;2例 4 6 ,XX/ 4 6 ,XY嵌合体患者 ,1例阳性 ,1例阴性 ;7例 4 6 ,XX(或 4 6 ,XX/ 4 5 ,X0、4 5 ,X0 )患者 ,5例阳性 ,2例阴性。

如何把握细胞生物学“三卷制”考试内容的难度梯度

“三卷制”考试方法，得分权重与卷类型直接挂钩，因此，其公平性的关键是考试伯难度梯度与得分权重一致，本文介绍了如何把握考试内容难度梯度的体会。

混合式教学在医学遗传学教学中的实践与思考

医学遗传学侧重于研究遗传规律,知识点抽象难懂,传统课堂教学收效甚微。随着医学教育和现代科技的发展,多元化教学模式势在必行。结合从教经历,主要从网络课程微课制作、对分易教学平台使用以及基于病案导入的翻转课堂教学实践中,回顾总结每种教学模式的整体构思、具体实施过程以及对于传统教学的补充作用,分享交流如何合理运用混合式教学方式,同时不摒弃传统教学,实现以学生为主体的现代课堂教学模式。

JIB-04通过抑制组蛋白赖氨酸去甲基化酶4表达来调控MDM2/P53/SLC7A11/GPX4轴诱导肝癌细胞发生铁死亡

JIB-04(Jumonji histone demethylase inihibitor, JIB-04)是一种泛组蛋白赖氨酸去甲基化酶抑制剂,可抑制多种肿瘤发生发展,但其具体机制仍不清楚。本文以肝癌细胞HepG2和Huh7为研究对象,探讨了JIB-04对肝癌细胞的增殖影响,并揭示其可能的分子机制。CCK-8和EDU检测细胞增殖实验显示,JIB-04明显抑制肝癌细胞HepG2和Huh7活力,且具有浓度依赖性,其半数抑制浓度分别为0.7689μmol/L及0.7392μmol/L。流式细胞术检测细胞内ROS水平变化,结果显示,JIB-04可显著激活细胞内ROS的累积。通过谷胱甘肽(glutathione, GSH)检测试剂盒和脂质过氧化物检测试剂盒分别检测细胞内GSH和脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平发现,在2μmol/L JIB-04处理下,HepG2和Huh7细胞内GSH分别下降88.4%和80.7%,而脂质过氧化物分别升高4.75倍和9.25倍。通过qRT-PCR和Western印迹分析发现,JIB-04显著降低铁死亡相关因子GPX4和SLC7A11的mRNA水平和蛋白质水平,同时铁死亡相关通路蛋白质MDM2明显下调,P53蛋白水平明显上调。机制研究显示,JIB-04可以使赖氨酸特异性去甲基化酶KDM4C的蛋白质水平下调约58%和51%。通过ChIP检测发现,在JIB-04处理肝癌细胞后MDM2基因启动子区域H3K9me3分别提高了2.19倍和2.14倍,同时qRT-PCR证明,JIB-04处理肝癌细胞后MDM2 mRNA水平显著下调。综上所述,本研究初步揭示了JIB-04可下调特异性去甲基化酶KDM4C的表达,进而影响MDM2基因启动子区域H3K9me3甲基化水平抑制MDM2基因表达,减少MDM2蛋白与P53蛋白结合,P53蛋白水平表达上调,同时,铁死亡相关蛋白质SLC7A11和GPX4的表达下调,导致细胞内GSH耗竭、ROS与脂质过氧化物积累,最终导致细胞发生铁死亡。

星形胶质细胞转分化在神经退行性疾病治疗中的研究现状

神经退行性疾病(ND)的临床治疗大多只能缓解症状,近年来随着细胞重编程技术的不断发展,有望实现退化丢失神经元的转化再生。星形胶质细胞(AS)广泛存在于中枢神经系统(CNS),生理状态下参与维持CNS功能稳定。AS转分化具有排异率低,微环境毒性小的优势,已应用于ND的治疗研究。本文重点介绍了近些年AS转分化治疗各类ND的多项研究,包括其动物模型、载体工具、靶向分子、诱导神经元的种类、治疗效果。其中进展最明显的是帕金森病(PD),多种不同的诱导方式均可将AS成功重编程为多巴胺能神经元,并且模型小鼠的症状有一定程度的改善。但是对于分化细胞的来源问题以及治疗效果仍然存在一定的分歧。最新研发的谱系靶向追踪技术可以更准确地确认诱导细胞的来源。此外,诱导细胞成活率及长期影响、重编程AS的年龄依赖性等问题也有待进一步探讨。

胃癌的遗传学研究进展

胃癌是人类常见的恶性肿瘤。本文就与胃癌相关的染色体异常、癌基因激活和抑癌基因失活、转移抑制基因异常表达、细胞周期调控紊乱、细胞粘附分子和信号传导异常及遗传不稳定性等作一综述 ,旨在深入探讨胃癌发生发展的遗传学机制。

社会化行为生态学在高职医学遗传与优生学课程建设中的应用

应用社会化行为生态学原理,从如何增强社会个体适应社会环境、创造社会价值的能力为出发点,对医学高职院校《医学遗传与优生》课程改革做初步探索。

对曾育21三体综合征患儿者行胚胎种植前遗传学诊断获妊娠1例

目的在体外受精-胚胎移植过程中,对高危夫妇进行胚胎种植前遗传学诊断以避免21三体综合征患儿的出生.方法常规激素替代治疗,对患者夫妇行胞母细胞质内单精子注射(ICSI),正常受精培养到第3天,对6～10细胞期胚胎活检1个细胞,利用荧光原位杂交技术(FISH)进行胚胎种植前遗传学诊断(PGD),挑选染色体数目正常的胚胎移植入患者子宫.结果共对8个胚胎进行PGD,7个有诊断结果者中6个为正常胚胎、1个为21三体胚胎.挑选3个胚胎移植,获得妊娠并产下一健康男婴.结论应用FISH对染色体数目异常的遗传疾病,如21三体综合征,进行胚胎种植前遗传学诊断是切实可行的.

先天性无子宫无阴道遗传学特征1例分析

患者女性,23岁,因"原发性月经未来潮"于2013年6月来本院就诊。主诉原发性闭经,无周期性下腹疼痛。检查女性第二性征发育良好,前庭窝尚未见尿道口及处女膜,肛诊未触及子宫,但触及到左右附件。B超未探及子宫,但探及到左右卵巢和阴道黏膜线。性激素和垂体激素检测均正常,X染色质阳性,为正常女性核型(46,XX)。诊断为"先天性无子宫和阴道"。本文就其遗传学特征进行分析。

氧化/还原因子ref-1在肺癌组织中的细胞定位表达及与8-OH-dG的关系

目的 氧化 /还原因子 1(ref 1) ,也称为AP核酸内切酶 (APE) ,是氧化还原和DNA碱基切除修复途径中的重要一员。本研究旨在探讨ref 1在肺癌中的表达及其与氧化损伤标志 8 羟基 脱氧鸟苷 (8 OH dG)的关系。方法 用免疫组化法检测15 0例肺癌组织、12 0例癌旁肺组织、4 0例肺良性病变和 4 0例正常肺组织中氧化 /还原因子ref 1基因的蛋白质表达 ;分析有关暴露因素对ref 1表达的影响 ,探讨ref 1基因与 8 OH dG的关系。结果 肺癌和正常肺组织皆有ref 1的表达 ,但ref 1在细胞内的定位有所不同 ,70 .0 % (10 5 / 15 0 )的肺癌组织ref 1从通常的胞核定位移位到胞浆 ,仅 7.5 % (3/ 4 0 )的正常肺组织有ref 1移位胞浆的现象 ,两者差异显著 ,P <0 .0 1。未发现肺癌患者的性别、年龄、吸烟和肿瘤家族史等因素与ref 1细胞定位之间有联系。ref 1移位胞浆与肺组织中 8 OH dG的含量呈显著正相关 ,Spearman相关系数为 0 .70 2 ,P <0 .0 1。结论 ref 1的细胞定位对其氧化 /还原和修复功能有着重要影响 ,可作为监测细胞DNA修复功能的指标。

SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠的建立

目的构建胃壁细胞定位表达SV40T的真核表达载体并制备转基因小鼠动物模型,为研究胃癌发病机制提供动物模型。方法从构建的胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中酶切回收3.8kb的基因片段H+-K+ATPaseβpromoter/SV40T,通过显微注射的方法制备转基因小鼠,PCR和Southern blotting检测阳性转基因小鼠并建系繁殖,RT-PCR检测基因的表达情况。结果将422枚注射过的受精卵移植给16只假孕雌鼠,共生出77只仔鼠,移植成功率为18.2%。在出生的77只仔鼠中,2#、4#、8#、16#、24#、51#、57#、61#、68#、73#经PCR检测为阳性首建鼠。除68#不育外,其他9个品系首建鼠共生出99只F1代鼠。8#品系23只F1代尚未发现阳性鼠,另8个品系F1代经PCR和Southern blotting检测发现31只阳性鼠,阳性率为40.8%(31/76)。RT-PCR检测F1代阳性鼠均仅在胃组织中有SV40T基因的表达,而在心、肝、肾、肺、食道、肠、骨骼肌等组织中均不表达。不育首建鼠处死解剖发现胃组织有肿瘤存在。结论建立了胃壁细胞定位表达SV40T基因的转基因小鼠动物模型。