胰岛素样生长因子结合蛋白2、4在实验性肝细胞损伤中的表达及意义

目的:通过观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)两种细胞因子所致体外培养的肝细胞损伤时胰岛素样生长因子结合蛋白2、4(IGFBP2、IGFBP4)的表达变化,探讨IGFBP2和IGFBP4在肝损伤中的作用机制。方法:对人肝细胞株HL-7702分别给予不同浓度的TNF-α、TGF-β1两种处理因素作用24 h,采用免疫细胞化学染色法观察其IGFBP2和IGFBP4的表达变化,再在相同处理培养条件下用MTT比色法检测两种细胞因子对肝细胞抑制率的影响。根据MTT及预实验结果选择TNF-α20μg/L作用于人肝细胞株48h,采用Annexin-Ⅴ/PI双染色流式细胞分析法和TUNEL法检测肝细胞凋亡发生率。结果:与对照组相比,各处理组IGFBP2、IGFBP4的表达均显著增加(P<0.05),其中在TNF-α20μg/L组和TGF-β14μg/L组表达最强,且与肝细胞抑制率呈正相关关系(P<0.05 orP<0.01)。TNF-α20μg/L处理48 h后肝细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:IGFBP2、IGFBP4参与了肝细胞的损伤过程,在TNF-α、TGF-β1介导的肝细胞损伤中具有重要作用。

羟基红花黄色素A干预脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞脂质运载蛋白2的表达

背景:缺血性脑卒中严重威胁人类健康,缺血缺氧后星形胶质细胞大量表达脂质运载蛋白2加重脑损伤,但其具体机制并不清楚。羟基红花黄色素A具有抗缺血、抗氧化、抗血栓及抗炎等作用,其是否影响脑缺血缺氧后星形胶质细胞表达脂质运载蛋白2,目前尚不清楚。目的:探究羟基红花黄色素A对脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞中脂质运载蛋白2表达的影响及机制。方法:(1)将30只成年SD大鼠随机分成3组:假手术组、大脑中动脉闭塞再灌注组、羟基红花黄色素A组,后2组建立大脑中动脉闭塞再灌注模型,羟基红花黄色素A组在再灌注后以12 mg/kg的剂量腹腔注射羟基红花黄色素A。采用Longa评分法评估神经功能缺损程度,采用TTC染色法测定脑梗死体积,Western blot和免疫荧光检测JAK2/STAT3通路及脂质运载蛋白2的表达,ELISA法检测白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平。(2)将星形胶质细胞分为4组:正常组、糖氧剥夺复糖氧组、羟基红花黄色素A组、AG490组,后3组建立糖氧剥夺复糖氧模型,在糖氧剥夺期间分别用75μmol/L羟基红花黄色素A、10μmol/L酪氨酸磷酸化抑制剂AG490处理星形胶质细胞8 h,进一步验证羟基红花黄色素A对脂质运载蛋白2的作用机制。结果与结论:(1)与假手术组相比,大脑中动脉闭塞再灌注组大鼠脑梗死体积明显增加,并伴有神经功能损伤加重(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗可以减小脑梗死体积,改善神经功能(P<0.01);(2)大脑中动脉闭塞再灌注组p-JAK2、p-STAT3和脂质运载蛋白2的表达高于假手术组(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗后抑制了p-JAK2、p-STAT3和脂质运载蛋白2的表达(P<0.01);(3)大脑中动脉闭塞再灌注组炎性因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平高于假手术组(P<0.01),羟基红花黄色素A治疗后抑制了白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α表达(P<0.01);(4)体外实验糖氧剥夺复糖氧组p-JAK2、p-STAT3、脂质运载蛋白2的表达高于正常组(P<0.01),加入AG490后JAK2、STAT3磷酸化降低,脂质运载蛋白2表达被抑制(P<0.01)。结果表明,羟基红花黄色素A可能通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制缺血缺氧后星形胶质细胞中脂质运载蛋白2的表达,从而减轻脑损伤。

细胞凋亡在缺血性脑卒中过程中作用的可视化分析

背景:缺血性脑卒中是一种与细胞凋亡相关的高发性疾病。在脑缺血后会出现神经元的死亡,包括坏死和凋亡两种方式。缺血核心区以坏死为主,而半暗带内的迟发性神经元死亡则以凋亡为主,半暗带已经成为现在缺血性脑卒中治疗的靶点。此文献计量分析用于确定过去5年缺血性脑卒中中细胞凋亡的全球科学产出特征、热点和前沿。目的:采用文献计量学的方法分析缺血性脑卒中病理过程中细胞凋亡的作用及其机制。方法:从Web of Science Core Collection的科学引文索引扩展(SCI-Expanded)和社会科学引文索引扩展(SSCI-Expanded)中检索2018-2022年缺血性脑卒中中细胞凋亡的相关文献记录927篇。使用citespace、VOSviewer和Bibliometrix对缺血性脑卒中中细胞凋亡的研究趋势和热点进行可视化分析。结果与结论:①在过去5年中,2018-2020年有关细胞凋亡在缺血性脑卒中中的作用发文量呈上升趋势,但在2020年发生转折,发文数量开始下降;其中中国的发文量最多,美国居于第2名;首都医科大学和《BRAIN RESEARCH BULLETIN》分别是发文最多的机构和期刊;近年来,“Expression”和“Oxidative stress”这2个关键词出现的频率较高;②文献计量学研究表明,在过去的5年中,大多数研究主要集中在基础研究上,其中细胞凋亡在缺血性脑卒中中的作用在近3年的研究中逐渐减少,呈现下降趋势;反之,神经再生逐渐成为了一个研究的热点,尤其在不同机制影响下对神经营养因子的调控,以及在血管生成和胶质细胞修复方面的研究呈上升趋势,同时在神经再生中细胞凋亡是一个潜在的发掘点。

星形胶质细胞和小胶质细胞交互作用在缺血性脑血管病中研究进展

脑卒中具有高发病率、高致残率、高复发率、高死亡率的特点[1],其中脑梗死(缺血性脑卒中)为最常见类型,占脑卒中的70%~80%。脑梗死系因脑部血液循环障碍,即缺血、缺氧所致的局灶性脑组织的缺血性坏死或软化,出现相应的神经功能缺损的症状和体征。星形胶质细胞(AS)和小胶质细胞(MG)都是构成神经血管单元(NVU)的重要细胞。在脑缺血等病理过程不同阶段各自发挥不同作用。同时,两者通过释放各种信号分子进行对话,也在其中发挥着重要的作用。

髓样细胞触发受体2——缺血性脑卒中治疗的新靶点

缺血性脑卒中严重危害人类健康,有较高的致残致死率。小胶质细胞、星形胶质细胞等多种细胞参与其病理过程。小胶质细胞作为中枢神经系统(CNS)的固有免疫细胞,在机体生理、病理状态下均发挥重要作用。髓样细胞触发受体2(TREM2)是在CNS中主要表达于小胶质细胞的一种免疫球蛋白样受体,可与多种配体结合,在自身免疫及炎症过程中主要发挥“负性调节”的有益作用,可参与增殖、吞噬、存活、炎症因子表达等。本文阐述小胶质细胞中TREM2的生物学特性、相应配体及其信号通路,探讨TREM2在缺血性脑卒中的调节及其潜在治疗作用,以期为缺血性脑卒中的防治新靶点提供参考。

NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡在缺血性脑卒中病理过程中的作用研究进展

缺血性脑卒中是严重威胁人类健康的疾病之一,目前研究发现脑组织缺血缺氧引发的细胞程序性死亡扮演着重要角色,其中,兼具细胞凋亡和坏死特点的细胞焦亡通过含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)等炎性小体介导激活,依赖胱天蛋白酶1(caspase-1)的活化及白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18等促炎性细胞因子的释放,在缺血损伤后调控细胞生存和死亡发挥重要作用。既往研究发现,在缺血性脑卒中过程中,细胞焦亡可发生于小胶质细胞、神经元、星形胶质细胞、内皮细胞等是一种特殊的细胞死亡方式;与NLRP3等炎性小体的启动、激活密不可分,文中总结了NLRP3等炎性小体介导的细胞焦亡在缺血性脑卒中过程中的作用,探讨影响NLRP3炎性小体激活的靶点和物质,为缺血性脑卒中的治疗提供新的理论和实验依据。

APPswe/PS1dE9双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学及病理学特征研究

目的:探讨不同月龄APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠行为学及病理学的变化特征,为合理运用该模型研究阿尔茨海默病提供可靠依据。方法:采用旷场实验、新物体辨别实验、Y迷宫以及Morris水迷宫等行为学实验方法观察不同月龄的APP/PS1转基因小鼠的运动、新物体辨别以及学习记忆能力的变化;通过免疫组织化学方法检测不同月龄转基因小鼠脑内Aβ含量及星形胶质细胞数量等病理特征的变化。结果:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠的运动能力随月龄增加逐渐下降,9月龄时对新物体的识别、工作记忆及空间学习记忆能力均出现明显损害。同时,该转基因小鼠的海马在6月龄时开始出现Aβ沉积和星形胶质细胞数量增加,9月龄时各种病理变化更为明显。结论:APPswe/PS1dE 9双转基因小鼠在6月龄时开始出现脑内病理改变,9月龄时各种认知行为发生明显异常。提示该转基因小鼠脑内病理改变可能早于行为异常,因此可根据实验目的选取相应月龄的动物。

抗血管紧张素ⅡAT1受体抗体对大鼠脾脏T淋巴细胞的促增殖作用

目的观察抗AT1受体（AT1R）抗体对培养的大鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性的影响。方法以人工合成的AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫Wistar大鼠，利用亲和层析法提纯免疫大鼠血清中含有抗AT1R抗体的IgGs；培养大鼠脾淋巴细胞，刀豆蛋白A（ConA）诱导其活化和增殖，分别给予不同浓度的提纯IgGs（0．01、0．1、1umol／L）和血管紧张素Ⅱ进行干预，通过CCK-8法测定脾淋巴细胞增殖情况，并确定抗AT，R抗体的作用位点。结果ConA刺激48h后，大鼠脾淋巴细胞CCK-8吸光度显著高于空白对照组（0．38±0．05比0．27±0．02，P〈0．05）；不同浓度的IgGs剂量依赖性促进脾脏T淋巴细胞增殖（A值分别为0．53±0．03、0．71±0．04和0．94±0．05），与血管紧张素Ⅱ的作用相类似（A值为0．73±0．14、1．52±0．17和2．14±0．12）；AT1R特异性阻断剂Losartan和AT，R—ECⅡ均可显著减弱含抗AT1R抗体IgGs的促增殖效应（A值由0．71±0．04分别降为0．54±0．02，P〈0．01；0．52±0．04，P〈0．01）。结论抗AT1R抗体具有受体激动剂样效应，通过特异结合AT1R—ECⅡ剂量依赖性增强离体脾T淋巴细胞增殖活性。

帕金森病MPTP模型小鼠海马内星形胶质细胞活化和p-CREB的表达下降

目的:通过检测帕金森病(Parkinson's disease,PD)MPTP模型小鼠海马内GFAP和p-CREB的表达,探讨PD认知障碍发生的原因。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和PD模型组,每组12只。PD模型组经腹腔注射MPTP和丙磺舒,3.5 d注射1次,共10次,持续5周,对照组小鼠注射等量生理盐水。在第6周,旷场试验和爬杆试验评价运动功能。免疫组化检测黑质、纹状体TH的表达及海马GFAP和p-CREB的表达;Western Blot检测p-CREB的表达。结果:旷场实验和爬杆实验结果显示PD模型组小鼠运动能力明显低于对照组(P<0.001)。免疫组化显示PD模型组黑质TH阳性神经元和纹状体TH阳性神经纤维均明显低于对照组(P<0.001),海马的GFAP阳性细胞的面积明显多于对照组。而Western Blot和免疫组化染色均显示PD模型组海马p-CREB的表达明显少于对照组(P<0.001)。结论:慢性PD模型小鼠海马内星形胶质细胞激活和p-CREB表达降低,可能参与了PD认知损害的病理过程。

高糖高脂对培养成年大鼠心肌细胞损伤观察及机制初探

目的建立成年大鼠心肌细胞培养模型，观察给予高糖、高脂刺激后是否发生心肌细胞损伤和凋亡，并分析其可能机制。方法将分离所得成年大鼠心肌细胞接种入培养皿后随机分为2组进行培养。正常对照组：以M199培养基（Media199）加入5mmol／L葡萄糖与20mmol／L甘露醇作为正常对照培养基培养细胞；高糖高脂组：以M199加入高糖（25mmol／L葡萄糖）高脂（600μmol／L软脂酸）作为培养基培养模拟糖尿病。培养48h后，分别收集培养基上清与细胞，进行心肌损伤和凋亡指标测定。结果高糖高脂组乳酸脱氢酶（LDH），细胞凋亡蛋白caspase-3、caspase-8、caspase-9活性显著升高，与正常对照组比较，差异均具有统计学意义（P均〈0．01）。结论在培养的成年大鼠心肌细胞，高糖、高脂可引起心肌细胞损伤和凋亡，这种凋亡与easpase-8和caspase-9依赖的凋亡途径有关。

iNOS在大鼠创伤模型心肌细胞凋亡中的作用

目的观察iNOS在创伤大鼠模型心肌细胞凋亡中的作用。方法用Noble-Collip创伤仪制备大鼠创伤模型,用caspase-3活性和DNA ladder测定法观察心肌细胞凋亡,用Western blot测定心肌组织iNOS的蛋白表达,用化学发光法检测心肌组织一氧化氮(NO)的含量,ELISA法测定心肌组织硝基酪氨酸(NT)含量。结果机械创伤后心肌细胞凋亡显著增加(P<0.01),心肌组织iNOS的表达显著升高(P<0.01),同时心肌组织NO2-/NO3-和NT含量明显增加(P<0.01);给予iNOS选择性抑制剂1 400 W可显著降低心肌细胞凋亡(P<0.05),且显著降低心肌组织NO2-/NO3-和NT的含量(NO2-/NO3-:P<0.01;NT:P<0.05)。结论创伤时iNOS通过引起NO及过氧亚硝酸阴离子增加,进而导致心肌细胞凋亡。

外源性硫氧还蛋白对高糖、高脂刺激引起的H9c2细胞损伤和凋亡的影响

目的 观察给予外源性硫氧还蛋白（Trx）后对高糖、高脂刺激引起的心肌细胞损伤和凋亡的影响,并分析其可能机制.方法 将处于对数生长期的H9c2心肌细胞随机分为三组：正常对照组（普通DMEM培养基葡萄糖5 mmol/L加入20 mmol/L甘露醇）、高糖高脂组（DMEM高糖25 mmol/L培养基加入高脂600 μmol/L软脂酸）和Trx干预组（在高糖高脂组的培养基中加入3 ＊9滋mol/L Trx）.培养48 h后,分别收集培养基上清与细胞,进行指标检测.结果 与正常对照组比较,高糖高脂组乳酸脱氢酶及caspase-3活性均显著升高（P＜0.01）.给予Trx干预后,与高糖高脂组比较,Trx干预组乳酸脱氢酶及caspase-3活性均显著下降（P＜0.01）.与正常组比较,高糖高脂组Trx的表达量未见明显改变（P＞0.05）,但是Trx活性显著下降（P＜0.01）.结论 高糖、高脂刺激可以引起H9c2心肌细胞损伤和凋亡,其机制与内源性Trx活性的降低有关.外源性补充Trx可明显提高Trx的活性,减轻心肌细胞的损伤和凋亡.

刚地弓形虫STAg鼻内免疫小鼠诱导小肠IgA分泌细胞数量及sIgA水平动态变化

目的动态观察刚地弓形虫（简称弓形虫）可溶性速殖子抗原（STAg）鼻内免疫小鼠对小肠IgA分泌细胞（IgASCs）数量和分泌型IgA（sIgA）水平的影响。方法 5～6周龄BALB/c小鼠96只,随机均分为免疫组和对照组。免疫组小鼠用STAg（20μg/只,悬于20μl PBS）滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等量PBS代替。末次免疫后1周,灌胃感染RH株弓形虫速殖子（1×10~4个/只,溶于0.5 ml PBS）,记录小鼠健康状况及体重。于感染后6、7、8、9、10和1 1 d随机处死每组小鼠各8只,免疫组化检测小鼠的十二指肠、空肠和回肠黏膜IgASCs数量,ELISA测定小肠冲洗液sIgA水平。结果感染后所有小鼠均发病,但免疫组症状较轻,体重增加幅度明显高于对照组（P〈0.05）,感染后第7天对照组小鼠死亡2只。两组小鼠小肠冲洗液sIgA水平均呈升高趋势,但免疫组高于对照组（P〈0.05）。十二指肠IgASCs数量,对照组的略有增加,而免疫组持续升高至9 d后维持较高水平为20.65±1.67,对照组为12.30±2.67,对照组和免疫组十二指肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=0.378（P〈0.05）和r=0.566（P〈0.05）。空肠IgASCs数量,对照组的呈下降趋势,免疫组的持续升高至9 d后略下降。对照组和免疫组空肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.557（P〈0.05）和r=0.218（P〉0.05）。对照组回肠IgASCs数量持续下降,免疫组的始终保持较高水平,对照组和免疫组回肠IgASCs数量与小肠液sIgA水平的相关性分别为r=-0.685（P〈0.05）和r=-0.053（P〈0.05）。结论 STAg鼻内免疫能使经口感染弓形虫小鼠空肠和回肠IgASCs数量增加,小肠黏膜免疫屏障功能增强。

肝细胞生长因子基因转染对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移的影响

目的:观察HGF基因对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移的影响。方法:从已有质粒pRc/CMV-HGF中扩增出HGF基因,将其克隆到含增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-HGF,酶切及测序鉴定正确后,用脂质体将重组质粒pEGFP-HGF转染到人脐静脉细胞株ECV304中,G418筛选获得稳定表达细胞克隆,采用荧光显微镜观察、RT-PCR、免疫细胞化学方法检测鉴定重组质粒的表达情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测稳定表达细胞中HGF的含量;再以MTT法检测转染重组质粒后细胞增殖的改变,Transwell Migration实验检测细胞迁移能力的改变。结果:所构建重组质粒经酶切图谱分析和序列测定证实构建成功;荧光显微镜下观察到有绿色荧光;RT-PCR证实HGFmRNA在转染阳性细胞高表达;免疫细胞化学证实转染pEGFP-HGF质粒的细胞有HGF蛋白的表达;ELISA检测细胞培养基中HGF含量可达112.3 ng/ml,MTT法、TranswellMigration测定转染pEGFP-HGF阳性细胞的增殖、迁移能力明显高于对照组(P<0.01)。结论:重组质粒pEGFP-HGF能够在内皮细胞株ECV304转录、表达;表达的活性蛋白HGF刺激ECV304的增殖、迁移,为进一步应用于基因治疗奠定实验基础。

E4031对慢性心衰大鼠离体心脏功能和心肌细胞内静息Ca^(2+)水平的影响

目的:研究具有钠钙交换(NCX)激动作用的药物E 4031对慢性心衰大鼠离体心脏功能和心肌细胞内静息Ca2+水平的影响。方法:通过腹主动脉缩窄建立大鼠慢性心力衰竭模型;利用Langendorff装置进行离体心脏灌流,检测大鼠心功能及E 4031对血流动力学指标的影响;急性分离心衰大鼠心肌细胞,与钙荧光指示剂fluo3/AM共同孵育后,用激光共聚焦显微镜系统观察E 4031对心肌细胞内荧光强度的影响。结果:缩窄大鼠腹主动脉12周后,langendorff离体灌流检测显示大鼠心功能明显降低;在灌流液中加入10μmol/L E 4031可以使心衰大鼠心脏左室发展压(LVDP)和左室收缩/舒张最大速率(±dp/dtmax)提高;与正常组和伪手术组相比,心衰大鼠心肌细胞内静息钙荧光强度明显升高,和10μmol/L E 4031共孵育后,心衰大鼠心肌细胞静息钙荧光强度呈现短期先升后降过程,然后在较低的水平保持稳定。结论:E 4031可以增强慢性心衰大鼠离体心功能,可能与其增强心肌细胞膜NCX活动,稳定细胞内Ca2+水平有关。

β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠免疫功能的影响

目的 观察β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体（β1-AA）长期存在对大鼠免疫功能的影响.方法 用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR-ECII）作为抗原主动免疫大鼠,获取β1-AA,并经SDS-PAGE检测纯度;将纯化的β1-AA通过鼠尾静脉注入大鼠体内,建立被动免疫模型,并通过SA-ELISA方法定期检测血清中β1-AA的水平;定期采用流式细胞技术测定大鼠外周血CD4＋、CD8＋ T淋巴细胞亚群的变化;定期用直接溶血空斑和间接溶血空斑实验观察B细胞抗体生成能力的变化.结果 被动免疫模型中,β1-AA水平可以维持在与临床患者血清中该抗体相匹配的状态,较好地模拟了临床患者血清中自身抗体维持在一定水平且长期存在的状态.β1-AA的长期存在可以使机体的CD4＋/CD8＋ T淋巴细胞比值持续升高,使直接溶血空斑和间接溶血空斑数目明显增高.结论 β1-AA长期存在可以导致机体细胞免疫和体液免疫功能改变.

机械创伤通过增加活性氧和NO导致心肌细胞凋亡

目的观察机械创伤后活性氧和一氧化氮(NO)水平的变化规律,并探讨其在创伤致心肌细胞凋亡中的作用。方法使用Noble-Collip创伤仪制备大鼠机械创伤模型。创伤后0,3,6,12,24 h检测各指标。同时在创伤后随即给予FeTMPyP,按照2 mg/kg剂量腹腔注射,溶剂对照组给予等量生理盐水,创伤后12 h比较各指标。采用光泽精加强发光法测定心肌组织超氧阴离子的含量,应用化学发光法检测心肌组织NO的含量,通过ELISA方法测定心肌组织硝基酪氨酸(NT)含量,使用TUNEL和caspase-3活性测定两种方法观察心肌细胞凋亡情况。结果机械创伤后心肌细胞凋亡显著增高(P<0.01),心肌组织超氧阴离子水平和NO含量显著升高(P<0.01),且二者结合的产物过氧亚硝基(ONOO-)也明显增加(P<0.01);给予ONOO-清除剂可显著降低心肌组织NT水平(P<0.01),且显著降低心肌细胞凋亡(P<0.01)。结论机械创伤通过使活性氧和NO水平增加而导致心肌细胞凋亡。

子宫内膜中的成体干细胞

背景:近年来子宫干细胞尤其是子宫内膜干细胞研究有了新的突破,多个学者用不同方式证明了子宫内膜干细胞的存在。目的:介绍子宫干细胞存在的依据、位置及表面标志物。方法:应用计算机检索1995-01/2010-12清华同方数据库相关文章,检索词为"子宫内膜干细胞",并限定文章语言种类为中文。同时计算机检索PudMed数据库相关文章,检索词为"endometrium stemcell",并限定文章语言种类为English。共检索到文献233篇,最终纳入符合标准的文献30篇。结果与结论:近年来子宫内膜干细胞的分离与鉴定研究有了很大的进展,但子宫内膜干细胞的特异性标志物仍在探索中。文章就克隆形成能力、标记滞留细胞实验及组织重建能力等多种方法对子宫内膜干细胞存在的可能性,存在部位以及可能的表面标志物等进行了综述。

抗β1-肾上腺素受体抗体对大鼠T淋巴细胞的作用

目的观察抗β1-肾上腺素受体（AR）抗体对大鼠T淋巴细胞的作用。方法用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR—ECⅡ）作为抗原主动免疫大鼠，采用流式细胞技术测定大鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化；观察抗β1-AR自身抗体对培养的淋巴结T细胞的影响。结果免疫组血清中T淋巴细胞亚群CD4^＋／CD8^＋在处理24h后开始升高，在第7天时达到高峰并持续2个月；抗β1-AR自身抗体可促进T淋巴细胞增殖，与β1-AR特异性阻断剂Metoprolol或β1-AR—ECⅡ共同作用时，可使抗体的促增殖效能显著减弱。结论抗β1-AR自身抗体可以使免疫系统失衡，促进T淋巴细胞的增殖。

羟基红花黄色素A抑制糖氧剥夺/复糖复氧处理后神经元焦亡的作用

背景:羟基红花黄色素A具有抗缺血、抗氧化、抗血栓及抗炎等作用,其是否影响糖氧剥夺/复糖复氧处理后神经元焦亡,目前尚不清楚。目的:探讨羟基红花黄色素A对神经元焦亡的干预作用及机制。方法:取对数生长期的HT22细胞,随机分为5组:正常组、模型组、羟基红花黄色素A组、Colivelin组、Colivelin+羟基红花黄色素A组。利用糖氧剥夺/复糖复氧处理HT22细胞建立神经元焦亡模型,然后给予STAT3激动剂Colivelin、羟基红花黄色素A干预。干预后JC-1探针检测线粒体膜电位变化,活性氧试剂盒检测细胞内活性氧含量,GSDMD/TUNEL染色观察细胞焦亡情况,免疫荧光检测STAT3、GSDMD蛋白表达,RT-PCR检测STAT3、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达,Western blot检测p-STAT3、NLRP3、GSDMD、Cleaved-caspase-1、白细胞介素1β蛋白表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组焦亡细胞数量增多,p-STAT3、NLRP3、Cleaved-caspase-1、GSDMD、白细胞介素1β蛋白表达显著升高;与模型组相比,羟基红花黄色素A组焦亡细胞数量减少,焦亡相关蛋白的表达显著降低;②与模型组相比,Colivelin组细胞焦亡加剧,线粒体膜电位降低,活性氧含量增加,STAT3、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达升高,p-STAT3、NLRP3、GSDMD、Cleaved-caspase-1、白细胞介素1β蛋白表达升高;与Colivelin组相比,Colivelin+羟基红花黄色素A组上述指标均有好转。结果表明:羟基红花黄色素A通过STAT3信号通路抑制糖氧剥夺/复糖复氧后HT22细胞焦亡发挥神经保护作用。