芋螺毒素MⅦA与GST的融合表达及其镇痛活性的测定

目的构建芋螺毒素MⅦA基因的融合表达质粒pGEX-2T/CTXMⅦA在大肠杆菌中表达,并对融合蛋白的镇痛活性进行测定。方法根据芋螺毒素MⅦA的氨基酸序列,按大肠杆菌偏爱密码子化学合成CTX MⅦA基因。把合成的CTX MⅦA基因克隆到谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-2T中,构建质粒pGEX-2T/CTX MⅦA。将此质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后获得融合蛋白GST-CTX MⅦA,用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B柱对融合蛋白进行纯化。热板法测定其对小鼠的镇痛活性。结果获得的融合蛋白GST-CTX MⅦA使小鼠疼痛阈值有显著提高。结论基因工程产生的GST-CTX MⅦA融合蛋白具有明显的镇痛活性,且镇痛活性具有浓度依赖性,可以为进一步的科研及临床应用开辟新的途径。

生物信息学在基因组和蛋白质研究中的应用

目的:人类基因组计划在世界范围内的开展促进了生命科学的进步,在此过程中产生了大量的基因组与蛋白质结构和序列数据库资源,促进了生物信息学的发展;同时生物信息学在基因组和蛋白质研究中也起着重要的作用。资料来源:应用计算机检索Medline1990-01/2006-01文章,检索词“bioinformatics”,并限定语言种类为English;同时手工检索2000-01/2006-01的相关文章,限定语言为中文,检索词为“生物信息学;基因组;蛋白质结构”以及基因组相关方面的书籍。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:生物信息学的发展及其在基因组和蛋白质研究中的应用。排除标准:重复性研究。资料提炼:从检索资料选取34篇(含2篇中文文献或书籍)关于生物信息学及其应用的文章,进行综述。其中与基因组研究相关的文献4篇,与蛋白质研究相关的文献20篇,其他文献10篇。资料综合:随着人们对基因组和蛋白质研究的深入,对基因表达模式、蛋白质结构、蛋白质-蛋白质相互作用等分析得到的数据越来越多,为生物信息学提供了丰富的资源,促进了生物信息学的发展;同时生物信息学在基因序列比对、大规模基因功能表达谱的分析、新基因的发现与鉴定等方面以及蛋白质序列比较分析、蛋白质空间结构和功能预测等研究中也起着重要的作用,促进了DNA和蛋白质的研究。结论:基因组和蛋白质组研究与生物信息学技术互相推动,并行发展;生物信息学在基因组和蛋白质研究中发挥着重要的作用。

蓖麻毒素A链的结构模建

蓖麻毒素A链（RTA）有抑制蛋白质合成的功能，可与单克隆抗体交联制备免疫毒素，用以治疗肿瘤顽症，但其免疫原性较强．天然RTA分子量大，不易渗透到肿瘤组织内部．因此，利用同源模建的方法对RTA分子进行改造，构建RTA突变体（MRTA），以改善天然RTA缺陷成为必要．近年来，生物信息学飞速发展，各种蛋白质库日益完善，计算机技术日趋成熟以及各种软件的开发，为分子结构模建提供了可能．