计算机辅助设计HER2/neu酪氨酸激酶小分子抑制剂及其生物活性研究

目的：用计算机辅助设计法寻找 HER2/neu受体酪氨酸激酶小分子抑制剂。方法：用 MODERLAR软件模拟出 HER2/neu和 EGFR受体酪氨酸激酶的三维 (three- dimensional,3D)空间结构；根据 HER2/neu酪氨酸激酶 ATP结合区的空间结构，搜索数据库，找出候选化合物；用 Western blot方法检测化合物对 HER2/neu受体酪氨酸激酶磷酸化的影响； MTT法检测细胞增殖抑制作用。结果：比较 HER2/neu和 EGFR（靶蛋白）与胰岛素受体酪氨酸激酶、 FGFR1受体酪氨酸激酶和 Src酪氨酸激酶（模板蛋白）的氨基酸序列发现有 35％～ 41％的相同和 52％～ 55％的相似，用 MODELLER程序模拟出 HER2/neu和 EGFR激酶区域的 3D结构。根据 HER2/neu受体酪氨酸激酶结构模型， 3D数据库的搜索，获得潜在 HER2/neu酪氨酸激酶抑制剂化合物，经筛选、优化发现 ST2325对 HER2/neu磷酸化有明显的抑制作用，其 IC50值为 6.6μ mol/L，且抑制作用是可逆的，对 EGFR受体磷酸化没有抑制作用。 ST2325对 HER2/neu受体表达没有影响。 ST2325对 HER2/neu过表达的肿瘤细胞 MDA- MB- 453 m1的抑制作用更强，而对 EGFR过表达的肿瘤细胞 MDA- MB- 468抑制作用相对较弱，其 IC50值分别为 29.05μ mol/L和 60.40μ mol/L。结论：基于 HER2/neu的结构设计，筛选?