利用转座子Tn5诱变植物青枯菌获得胞外蛋白分泌缺失突变株

植物细菌性青枯病是由茄科假单胞菌(简称青枯菌,Pseudomonas solanacearum)引起的一种世界性分布的重大病。青枯菌可以产生多种分泌于胞外的蛋白质,各类胞外分泌蛋白质在青枯菌致病中的作用一直是国内外研究的热点。其中研究最多的是纤维素酶与果胶酶,结果表明这2种酶类与青枯菌的致病力有一定关系,但并非绝对必需。最近又发现,青枯菌过敏基因簇(Hrp基因)所编码的蛋白质也属于一种胞外分泌蛋白质。

利用转座子Tn5诱变植物青枯菌获得胞外蛋白输出功能丧失突变体

通过Tn5诱变技术,分离了植物青枯菌生理小种1号、3号的胞外蛋白输出功能丧失突变体。由于Tn5在其基因组单一的eep位点的插入,突变体失去了向培养滤液分泌产生胞外酶和胞外蛋白质的能力。用碱性磷酸酯酶基因PhoA作为报导基因,研究这些胞外蛋白穿越突变体细胞内膜,结果表明,这些胞外蛋白质可以穿过其内膜,但失去了穿越其外膜的能力。胞外多糖在植物体内和体外的产生没有受到eep基因位点突变的影响。该突变体失去了对番茄植株的致萎能力。