多种肿瘤抑制基因在视网膜母细胞瘤中存在状态的研究

目的深入研究视网膜母细胞瘤（ＲＢ）内多种肿瘤抑制基因的存在状态。方法综合利用ＳＳＣＰ分析、ＤＮＡ序列测定以及多重ＰＣＲ等技术，检测分析ＲＢ肿瘤内Ｒｂ、ｐ５３、ｐ１６、ｐ１５及ｐ２１等肿瘤抑制基因是否存在缺失与点突变。结果约７４％的ＲＢ肿瘤有Ｒｂ基因点突变，１６％显示ｐ１６基因缺失，但ｐ５３及ｐ２１基因除多态性外未检测到真正的点突变。结论ＲＢ的发病和病变的进展主要是由于以Ｒｂ基因为核心的代谢通路的异常所致。

正常人及视网膜母细胞瘤患者Rb基因启动子结构、功能和突变的研究

目的检测正常人及视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者Ｒｂ基因５′端调控区的ＤＮＡ序列，以及不同的ＤＮＡ片段的转录调控活性，研究Ｒｂ基因启动子的结构、功能以及突变对功能的影响和与ＲＢ发病的关系。方法应用ＳＳＣＰ分析及ＤＮＡ序列测定检测正常人及ＲＢ患者Ｒｂ基因启动子的ＤＮＡ序列和点突变；分离Ｒｂ基因５′端不同位置及不同大小的ＤＮＡ片段，通过氯霉素乙酰基转移酶做报告基因，检测不同的ＤＮＡ片段的转录调控活性。结果Ｒｂ基因产物起始密码上游３２７ｂｐ至８７ｂｐ间２４０ｂｐ的ＤＮＡ片段具有基本的启动子功能，其上游和下游的ＤＮＡ序列内可能还存在正或负转录调控元件。１００例正常人Ｒｂ基因启动子ＤＮＡ序列未见有任何变异，但３０２例ＲＢ患者中５例有点突变并伴有ＣＡＴ活性明显降低。结论Ｒｂ基因启动子的ＤＮＡ序列非常稳定，其突变常常导致启动子活性下降。