孕期锌缺乏对大鼠胎心GATA4和Nkx2.5基因启动子区甲基化和组蛋白乙酰化水平的影响

目的:观察大鼠孕期锌缺乏对胎鼠心脏特异性转录因子GATA结合因子4(GATA4)和Nk2型同源盒转录因子5(Nkx2.5)基因启动子区胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(CpG)岛甲基化和组蛋白H3K9乙酰化水平的影响。方法:SD大鼠随机分为缺锌组、足锌组和配饲组(n=9),分别摄入含锌量为2.8、29.8、29.8μg/g的饲料,配饲组日饲料摄取量接近缺锌组。锌耗竭性喂养14 d后受孕,同法饲养至孕19 d剖腹取胎。观察胎鼠血锌水平和胎心组织锌含量,检测胎心组织GATA4和Nkx2.5基因启动子区CpG岛甲基化和组蛋白H3K9乙酰化的水平。结果:①3组胎鼠血锌水平差异有统计学意义(P<0.05),其中缺锌组显著低于足锌组(P<0.001)和配饲组(P=0.014),配饲组与足锌组比较差异无统计学意义(P=0.109)。②3组胎鼠GATA4和Nkx2.5基因启动子CpG岛甲基化水平差异有统计学意义(均P<0.05),其中缺锌组显著高于足锌组(P=0.005;P=0.024)和配饲组(P<0.001;P=0.029),配饲组与足锌组比较差异无统计学意义(P=0.497;P=0.929)。③3组胎鼠GATA4和Nkx2.5基因启动子CpG岛乙酰化水平差异有统计学意义(均P<0.05),其中缺锌组显著低于足锌组(P=0.018;P=0.033)和配饲组(P=0.007;P=0.007),配饲组与足锌组比较差异无统计学意义(P=0.701;P=0.512)。结论:大鼠孕期锌缺乏可导致胎心组织GATA4和Nkx2.5基因启动子区CpG岛甲基化和组蛋白H3K9乙酰化水平异常,提示心脏转录因子基因表观遗传学机制可能参与孕期锌缺乏对胎心发育异常的效应。

环境大气细颗粒物宫内暴露对大鼠子代免疫功能相关指标的影响

目的观察大鼠宫内环境空气动力学当量直径〈2.5 μm的大气细颗粒物（fine particles，即PM2.5）暴露对致敏原卵清蛋白反应性的影响及其可能机制。 方法Sprague-Dawley孕鼠随机分为4组：过滤空气-生理盐水（简称空气-盐水）组、PM2.5-盐水组、空气-卵清蛋白组和PM2.5-卵清蛋白组，每组10只。PM2.5暴露系将孕鼠置于PM2.5与环境等浓度的染毒柜中，暴露时间为妊娠第1天至分娩；吸入空气的孕鼠置于去除颗粒物的洁净柜中。卵清蛋白致敏为妊娠第4和9天孕鼠腹腔注射50 μg卵清蛋白，第18~20天每日雾化吸入1%卵清蛋白30 min，未用卵清蛋白组以等量生理盐水处理。胎鼠自然娩出后即刻以酶联免疫吸附试验检测各组新生仔鼠血浆白细胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5和干扰素-γ的含量，蛋白质印迹技术检测肺组织GATA-3、T-bet蛋白水平，实时荧光定量-聚合酶链反应技术检测脾组织微小RNA（microRNA，miR）-146a和miR-146b表达的变化，光学显微镜下观察肺组织学变化。采用单因素方差分析及LSD法进行统计学分析。 结果（1）血浆IL-4和IL-5水平：IL-4水平在PM2.5-盐水组[（18.56±7.04） ng/L]、空气-卵清蛋白组[（34.04±7.06） ng/L]和PM2.5-卵清蛋白组[（45.67±8.18） ng/L]较空气-盐水组[（10.51±2.88） ng/L]升高，在PM2.5-卵清蛋白组较PM2.5-盐水组和空气-卵清蛋白组升高（F=54.667，P〈0.001）。IL-5水平在空气-卵清蛋白组和PM2.5-卵清蛋白组较空气-盐水组升高（F=6.253，P=0.023）。血浆干扰素-γ水平在空气-卵清蛋白组较空气-盐水组、PM2.5-盐水组和PM2.5-卵清蛋白组升高（F=28.604，P〈0.001）。（2）肺组织GATA-3和T-bet蛋白水平：GATA-3水平在PM2.5-盐水组（31.09±3.54）、空气-卵清蛋白组（35.24±5.00）和PM2.5-卵清蛋白组（47.81±3.63）较空气-盐水组（24.19±3.12）升高，在PM2.5-卵清蛋白组较PM2.5-盐水组和空气-卵清蛋白组升高（F=96.581，P〈0.001）。T-bet水平在空气-卵清蛋白组和PM2.5-卵清蛋白组较空气-盐水组降低，在PM2.5-卵清蛋白组较PM2.5-盐水组和空气-卵清蛋白组降低（F=30.852，P〈0.001）。（3）脾组织miR-146a和miR-146b表达水平：miR-146a在PM2.5-盐水组（1.72±0.27）、空气-卵清蛋白组（1.56±0.37）和PM2.5-卵清蛋白组（3.06±0.52）较空气-盐水组（1.05±0.25）升高，在PM2.5-卵清蛋白组较PM2.5-盐水组和空气-卵清蛋白组升高（F=42.276，P〈0.001）。miR-146b表达变化趋势与miR-146a一致（F=28.776，P〈0.001）。（4）空气-卵清蛋白组、PM2.5-卵清蛋白组见肺泡腔狭窄或消失，肺间质炎症细胞浸润，肺泡间隔淤血。PM2.5-卵清蛋白组这些变化更为严重。 结论宫内环境水平PM2.5暴露可影响胎肺的正常发育，使部分免疫指标发生改变，在母体卵清蛋白致敏时其不良效应更为显著。

进一步加强我国大气污染对个体早期发育不良效应的研究

大气污染对个体早期发育的不良效应主要包括出生前宫内发育期的早期个体发育易受大气污染等环境毒性物质的伤害。加紧大气污染对早期个体发育不良效应的研究具有重要的现实与长远意义。本文在出生前大气污染物暴露与早产、低出生体重、出生缺陷等不良妊娠结局的关联性，以及对出生后个体发育远期不良效应新近研究的基础上，分析我国在该方面研究存在的不足，为今后继续深入该方面研究提出一些见解。

先天性心脏病患儿母体孕期锌代谢及其相关调节子金属硫蛋白-1和锌转运蛋白-1的变化研究

目的观察特定类型先天性心脏病(CHD)患儿的母亲孕期锌代谢状况、锌代谢相关的金属硫蛋白-1(MT1)和锌转运蛋白-1(ZnT1)的变化,探讨其间的关系。方法纳入15例室间隔缺损、12例房间隔缺损、7例法洛四联症患儿及其母亲,按1∶1选择相应正常母婴作为对照,调查CHD组和对照组孕产妇的一般情况和孕期锌相关膳食和锌剂补充的情况;分别于孕32周、分娩或引产时检测孕妇血锌水平和碱性磷酸酶(AKP)活性,于分娩或引产时检测孕妇血清和胎盘组织MT1、ZnT1蛋白和mRNA表达变化。结果 CHD组和对照组母亲的一般情况相近,CHD患儿的母亲孕期摄入富锌食品人数的构成比较对照组显著降低。对于孕妇血锌值,室间隔缺损组[(73.55±5.79)μmol/L]、房间隔缺损组[(72.66±5.82)μmol/L]和法洛四联症组[(68.72±6.72)μmol/L]均较各自分娩时对照组[依次为(82.77±7.88)、(84.58±7.55)、(85.66±7.30)μmol/L]显著降低(P均<0.05);血清AKP活性值有类似的变化。对于孕妇血清MT1和ZnT1的蛋白相对含量,室间隔缺损组(分别为73.22±36.54、68.55±27.82)、房间隔缺损组(64.29±38.26、74.55±29.67)和法洛四联症组(67.88±30.50、70.13±29.65)与各自对照组(依次为166.31±67.43、97.67±30.22、182.56±71.40、111.65±32.70和173.81±62.36、108.27±28.52)比较均显著降低(P<0.01或P<0.05)。对于孕妇胎盘MT1和ZnT1的蛋白相对含量及mRNA表达水平,室间隔缺损组(分别为蛋白含量0.438±0.096、0.384±0.061,mRNA表达水平1.23±0.82、0.96±0.39)、房间隔缺损组(0.427±0.093、0.377±0.059,1.17±0.70、0.85±0.40)和法洛四联症组(0.414±0.111、0.336±0.066,1.31±0.97、0.90±0.38)与各自对照组(依次为蛋白含量0.565±0.083、0.541±0.090,mRNA表达水平2.78±1.06、1.67±0.33;蛋白含量0.622±0.136、0.493±0.079,mRNA表达水平2.85±0.89、1.72±0.38;蛋白含量0.637±0.125、0.521±0.089,mRNA表达水平3.21±0.99、1.61±0.29)比较均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论胎儿特定类型CHD的母体存在锌缺乏状况,血清及胎盘的MT1和ZnT1表达下调可能参与母体锌缺乏时CHD的发生。