从胸痛中心建设看非PCI医院在构建ACS区域协同救治体系中的作用

近年来,胸痛中心建设工作在我国启动并得到快速发展,旨在建立救治急性胸痛患者的绿色通道。我国急性冠脉综合征(ACS)的发病率呈显著上升趋势,ACS尤其是急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者的救治强调及时有效地再灌注治疗,非经皮冠脉介入治疗(非PCI)医院在其中所起的作用不容忽视。胸痛中心以"一托N"的模式构建了高效的区域协同救治体系,并已在全国各地得到逐步完善和取得了初步成效。本文将对胸痛中心的建设以及非PCI医院在构建ACS区域协同救治体系中的作用做一述评。

诱导型一氧化氮合酶在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展

采用溶栓疗法、动脉搭桥术、冠状动脉血管成形术等技术,使缺血组织和器官重新恢复血流,挽救了众多危急重病人的生命,然而,缺血器官及组织在恢复血流的同时,均伴随着缺血/再灌注损伤,是目前临床上亟待解决的问题。在对心血管疾病的研究过程中,随着心肌保护研究的不断深入,如何减轻心肌缺血/再灌注损伤成为心肌保护问题的关键。越来越多的研究表明,心肌缺血/再灌注损伤与诱导型一氧化氮合酶表达过量一氧化氮紧密相关。研究表明,诱导型一氧化氮合酶既有心肌保护作用,也有促心肌损伤作用,而通过对诱导型一氧化氮合酶抑制剂的应用,有望减轻心肌损伤的进展,保护损伤心肌。

诱导型一氧化氮合酶在心肌梗死进程中的研究进展

一氧化氮(NO)是在一氧化氮合酶(NOS)催化下生成,其在心血管疾病中发挥了重要作用。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在心脏缺血应激情况下表达,并产生大量一氧化氮而作用于免疫系统和心血管系统。心肌梗死(MI)后,免疫系统的巨噬细胞及心血管系统的成纤维细胞、血管内皮细胞参与心肌瘢痕的形成。本文就国内外关于诱导型一氧化氮合酶与上述三类细胞的研究进展做一述评,以明确诱导型一氧化氮合酶在心肌梗死进程中的作用。

HSP70抑制剂PFTμ对干扰素γ诱导的iNOS表达的研究

目的观察热休克蛋白70抑制剂PFTμ对干扰素γ(IFN-γ)诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮(NO)的生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用。方法采用IFN-γ诱导的RAW 264.7细胞株建立细胞炎症反应模型,采用Griess试剂法测定细胞NO释放量;采用Western blot法测定相应目的蛋白的表达;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析iNOS mRNA表达的变化。建立小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)模型,分为对照组和给药组,测定小鼠心肌梗死面积的变化。结果 PFTμ可抑制IFN-γ诱导的RAW264.7细胞NO的生成、i NOS蛋白及mRNA表达。其作用机制可能是通过部分抑制RAW264.7细胞核内的IRF-1蛋白表达。PFTμ可减少缺血/再灌注小鼠心脏梗死面积(P<0.05)。结论PFTμ可通过部分抑制细胞核内IRF-1蛋白表达而发挥抗炎症反应的作用。

Oct-4表达下调促大鼠骨髓多能成体祖细胞向心肌分化

目的:明确骨髓多能成体祖细胞(Bonemarrowmultipotentadultprogenitorcells,MAPCs)体外向心肌特异性分化及其与八聚体结合转录因子4(Octamer-bindingtranscription factor-4,Oct-4)表达的相关性。方法:将大鼠骨髓中分离出的MAPCs,在无血清培养基中连续培养35 d,采用5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza,1μmol/L)诱导24 h促使其向心肌细胞分化。结果:MAPCs在5-aza诱导的24 h后早期心脏特异性基因NKx2.5与GATA-4的mRNA水平显著增加,Western blot和免疫荧光染色显示心肌特异性蛋白Connexin-43与肌钙蛋白Ⅰ在5-aza诱导后的7 d开始表达,流式细胞分析表明在35 d后超过37%的细胞为肌钙蛋白Ⅰ阳性;同时实时定量聚合酶链反应、Western blot、免疫荧光染色和流式细胞技术检测到未分化的MAPCs高表达特异性干细胞标志物Oct-4,但在心肌分化过程中其表达明显下降。结论:MAPCs在5-aza诱导后能够有效地分化为心肌样细胞,并与Oct-4的表达下调相关。

ox-LDL抑制大鼠MSCs向内皮分化

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)内皮分化的影响及其机制。方法将可内皮分化的MSCs分为对照组(不加任何干预因素),ox-LDL组(加入5μg/m L的ox-LDL),ox-LDL+乙酰半胱氨酸组(n-acetylcycteine,NAC)预处理后再加等浓度ox-LDL),n LDL对照组(加入5μg/m L的天然低密度脂蛋白(native LDL,n LDL)。光镜下观察细胞形态,免疫组化、Western blot及RT-PCR技术检测特异性内皮表面标记,流式细胞技术检测分化效率,电子顺磁振荡技术检测氧化活性产物(reactive oxygen species,ROS),Western blot技术测定细胞信号通道蛋白Akt。结果 1)MSCs能够分化为内皮细胞,表现为内皮表面标志v WF、Flk-1和CD31的出现和血管样结构的形成;2)ox-LD明显减弱MSCs向内皮分化(P<0.05),而NAC预处理后MSCs内皮分化能力恢复;3)ox-LDL干预后ROS明显升高(P<0.05),而NAC预处理后ROS产量明显降低(P<0.05);4)ox-LDL干预后磷酸化Akt表达明显降低(P<0.01),而NAC预处理后有所恢复,但仍低于正常培养组。结论 ox-LDL抑制大鼠MSCs向内皮分化,NAC可部分或完全反转ox-LDL的抑制效应,Akt发挥一定作用。

热休克蛋白70抑制剂PFTμ对小鼠炎症反应的影响

目的 观察热休克蛋白70抑制剂PFTμ对脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮（NO）的生成及诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达的作用以及与缺血再灌注损伤小鼠炎症反应的关系,并探讨其作用机制.方法 采用LPS诱导的RAW 264.7细胞株建立细胞炎症反应模型,分为PFTμ组（PFTμ 20 μmol/L预处理15 min后加入LPS 2 g/L）和对照组（等量DMSO预处理15 min后加入等量LPS）.Griess试剂法测定 NO释放量.Western blot法测定蛋白的表达.逆转录聚合酶链反应分析iNOS mRNA表达改变.建立小鼠心脏缺血再灌注模型,分为PFTμ组（40 mg/kg,溶于DMSO腹腔注射）和对照组（等量DMSO腹腔注射）,测定小鼠心肌梗死面积的变化.结果 PFTμ可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放（PFTμ组NO的释放显著低于对照组,P〈0.05）.PFTμ可下调LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA和蛋白表达（PFTμ组iNOS mRNA和蛋白表达均显著低于对照组,P均〈0.05）.PFTμ可减少缺血再灌注小鼠心脏梗死面积（PFTμ组小鼠心肌梗死面积显著低于对照组,P〈0.05）.结论 PFTμ有抑制炎症反应的作用,该作用机制可能与抑制NO的生成有关.