腐马素B_1单克隆抗体的制备与鉴定

本研究采用戊二醛一步法制备免疫抗原FB1 KLH和包被抗原FB1 BSA ,免疫BALB/c小鼠 ,建立间接酶联免疫吸附法 (I ELISA)并测定血清效价。结果表明 :FB1 BSA最适包被浓度为 1μg/ml,抗体最适稀释度为 1∶10 0 0 0 ,血清效价可达 1∶12 80 0 0。第 4次免疫后 ,通过淋巴细胞杂交瘤技术建立分泌FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,融合率为 96 % ,阳性率为 98%。细胞上清抗体ELISA效价为 1∶3 2× 10 6,腹水抗体效价为 1∶8× 10 8。经鉴定 ,该株单抗的亚类为IgG1,分子量为 185 4KDa ,染色体数目介于 96～ 10 4之间 ,亲和常数为 1 16× 10 7M-1,与另三种常见的真菌毒素 (串珠镰刀菌素 ,T 2毒素 ,玉米赤霉烯酮 )和两种载体蛋白 (牛血清白蛋白 ,血蓝蛋白 )无交叉反应 。