梨韧皮部特异表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因的转化和表达

以‘Old Home’梨无菌苗叶片为外植体,利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因转入‘Old Home’中。筛选出了‘Old Home’梨叶片高效遗传转化的最佳条件:农杆菌和外植体在液体培养基上共培比在固体培养基上共培转化率提高5倍。PCR分析和Southern杂交鉴定表明GUS基因已整合到转基因植株的基因组中,组织化学检测和Western杂交鉴定证明了GUS基因在转基因植株韧皮部中的表达。

GUA基因在梨转化植株中的稳定表达

以获得的梨转GUS基因植株的试管苗为试材,转基因植株的叶片在含卡那霉素的再生培养基上可成功再生不定梢,这些不定梢在含卡那霉素的生根培养基上可诱导生根。再生不定梢经组织化学检测仍表现出GUS基因的表达。而非转基因植株的叶片在含卡那霉素的再生培养基上不能产生不定梢,显示外源基因在转基因植株中的表达在无性繁殖后代中是稳定遗传的。