早期兔骨关节炎软骨CD105＋／CD166＋细胞及其软骨分化潜能的实验研究

目的探讨早期骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨组织中CD105+/CD166+细胞的变化规律及其软骨分化潜能,为软骨自身修复机制的研究奠定实验基础。方法 8～12月龄成年新西兰大白兔30只,建立右膝OA模型。将实验分为5组,分别获取左膝关节正常软骨细胞(A组),造模后2、4、8周右膝OA软骨细胞(分别为B、C、D组)以及兔BMSCs(E组)。将各组培养细胞标记CD105和CD166,流式细胞仪分析CD105+/CD166+细胞百分比;并采用免疫磁珠分选法将CD105+/CD166+细胞分选出来。激光共聚焦显微镜观察CD105和CD166在各组细胞中的表达分布情况;成软骨诱导培养后分别行阿尔新蓝细胞化学染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;成骨诱导培养后检测各组钙含量;成脂诱导培养后行油红O染色。结果 A、B、C、D组CD105+/CD166+细胞百分比显著低于E组(P<0.05);B、C、D组高于A组(P<0.05),D组显著高于B、C组(P<0.05),但B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。共聚焦显微镜观察示,A、B、C、D组软骨细胞及E组BMSCs中均可见CD105+、CD166+细胞,各组间无明显差异。各组细胞微球成软骨培养1周后,CD105+/CD166+细胞均可见蛋白多糖和Ⅱ型胶原阳性表达,各组间无明显差异。成骨诱导培养2周时,E组钙含量显著高于A、B、C、D组(P<0.05),A、B、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。成脂诱导培养4周,E组可见较多红色脂滴;A、B、C、D组红色脂滴数量较E组少,成片状,大小不一,A、B、C、D组间无差别。结论早期兔OA软骨组织中CD105+/CD166+细胞增多,这些细胞有软骨细胞分化潜能。