小鼠内源性逆转录病毒Gag抗原在胰岛的表达及单克隆抗体的制备

目的探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。方法首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置:193-210(VSRLRGRRDPPAVDSTTS)],确定Gag 194多肽作为靶点,制备单抗;然后,再利用ELISA和Western blot检测单抗的特异性;最后,在免疫组织化学实验中检测不同年龄的T1D敏感的NOD小鼠与抗性的C57BL/6小鼠胰腺Gag抗原表达的差异性。结果成功制备了5株(1F4C8、2D4C6、3C3B9、4D6B3、5F9E4)IgG2b亚型的小鼠ERV Gag单抗;5株单抗的敏感性及特异性具有差异;其中,生物素化后的3株单抗(1F4C8、2D4C6、5F9E4)能特异识别NOD小鼠胰腺中表达的ERV Gag抗原且该抗原的表达可在3周龄的NOD小鼠检测到,Gag抗原多表达在NOD小鼠胰岛β细胞区域内,而非淋巴细胞浸润的区域。此外,C57BL/6小鼠的胰腺Gag抗原的表达为阴性。结论在NOD小鼠幼年时期ERV Gag抗原就已经开始表达,该抗原的表达可能受其特异的基因调控。

胰岛自身抗原和自身免疫反应的生成机制

1型糖尿病(T1DM)发病早,病程长,并发症常见,甚至威胁生命,对患者及家庭的生活质量、心理和经济等诸方面都带来了巨大的负面影响。T1DM是由能分泌γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)的辅助性T(T-helper,Th)细胞为主导的胰岛特异性、慢性炎症反应所致,合理地利用免疫调节机制可减缓T细胞对胰岛的破坏。但是T1DM患者体内能分泌胰岛素的细胞已所剩无几,且积累了大量能攻击胰岛的T细胞,常用的免疫耐受和调节措施已无法逆转患者对外源胰岛素的依赖致使该病目前尚元有效的治疗措施。