小鼠局灶性脑缺血后乙酰肝素酶的表达

目的检测乙酰肝素酶(Hpa)在实验小鼠局灶性脑缺血后的表达,探讨其表达时间和表达位置变化的规律及其意义。方法用结扎大脑中动脉皮质支的方法制作小鼠局灶性脑缺血模型;应用实时荧光定量PCR方法检测缺血后Hpa、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素2(Ang-2)基因的表达;应用免疫荧光双染(Hpa/CD105、Hpa/GFAP、Hpa/BrdU)的方法进一步观察Hpa蛋白表达的情况。结果实验组小鼠脑缺血后,与假手术组比较,Hpa mRNA于缺血后3d开始在缺血区的表达明显增高(P<0.05),14d达到相对高峰(与1、3、7 d和假手术组比较,P<0.05～0.01)。VEGFmRNA和Ang-2 mRNA在脑缺血后3 d的表达亦明显增高(与假手术组比较,P<0.01),其中VEGF的表达水平持续增高,而Ang_2则随后降低。免疫荧光双染显示,Hpa在脑缺血后7 d时主要表达于新生的微血管,14 d时主要与星形胶质细胞共表达。结论 Hpa表达时间和表达位置的变化提示,Hpa参与了脑缺血后血管新生和组织修复的过程,推测Hpa可能通过促进VEGF的表达以及星形胶质细胞的增生而发挥其作用。