狂犬病毒重组致病株Mu11的定点回复突变及生长特性的研究

狂犬病毒GX074株于2003年自广西健康犬脑分离得到,将其G蛋白第253、263、273位氨基酸通过反向遗传学技术替换到弱毒疫苗株rRC-HL对应位点得到重组毒株Mu11。为验证G蛋白第253、263、273位氨基酸对狂犬病毒的生长特性的影响,本研究以Mu11株的感染性cDNA克隆质粒为基础,将Mu11株G蛋白第253、263、273位氨基酸回复突变为亲本弱毒株rRC-HL的对应氨基酸,得到突变病毒株Mu11^(R253.263.273)。应用间接免疫荧光实验及对拯救病毒基因测序,证明Mu11^(R253.263.273)毒株突变位点正确。通过对其病毒滴度和多步生长曲线的测定,证明突变病毒株Mu11^(R253.263.273)基因组稳定,在细胞中的复制能力与亲本弱毒株rRC-HL一致。研究表明狂犬病毒G蛋白253、263、273位氨基酸对Mu11和亲本强毒GX074的生长特性具有重要影响,为进一步对其致病性功能的研究提供科学依据。