脑出血后星形胶质细胞表达运铁蛋白LCN2

目的探讨脑出血时脑内LCN2表达情况。方法雄性SD大鼠基底节区注射自体动脉血(100μl)。对照组大鼠术式相同注射等量生理盐水。Western blot(以β-actin比值矫正)和免疫组化方法分析脑LCN2表达。结果 LCN2阳性细胞只在脑出血同侧基底节区表达(对侧不表达),对照组出血同侧LCN2表达极微弱。Western blotting定量发现在出血侧基底节区,出血后1、3、7d LCN2蛋白水平显著升高,14d后下降。脑出血3d时出血侧LCN2蛋白水平较对侧高71倍(2.70±0.46 vs 0.04±0.01,P<0.001),较对照组高84倍(0.92±0.14 vs0.01±0.01,P<0.001)。LCN2阳性细胞形态似为星形胶质细胞,免疫组化双染证实LCN2与胶质细胞标志物GFAP共定位。结论本研究提示脑出血后释放的铁离子诱导载铁蛋白LCN2表达。LCN2在血肿清除铁转运过程中可能起重要作用。

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的作用

目的 研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血中的作用。方法 线栓法制作小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。通过Western blot和免疫组织化学方法研究磷酸化ERK1/2的活性特征。静脉内应用ERK通路阻滞剂U0126,测定缺血小鼠的神经系统损害和脑梗死体积的改变。结果 MCAO后30min,磷酸化ERK1/2在局灶缺血小鼠脑组织中显著升高,2h达到最高峰,6h恢复。免疫组化研究显示磷酸化ERK1/2阳性细胞在梗死基底节和周围皮质大量出现。荧光双染提示磷酸化ERK1/2阳性的细胞为神经元和星形细胞。与对照组相比,注射U0126的脑缺血小鼠神经损伤评分降低44.6％,梗死体积降低54.4％。结论 ERK在小鼠局灶性脑缺血中起着重要的作用,阻断ERK通路对缺血性脑损伤有一定保护作用,并可能成为脑缺血治疗的新途径。

局灶性脑缺血后脑内髓过氧化物酶活性观察

目的 探讨局灶性脑缺血后脑组织髓过氧化物酶（ＭＰＯ） 活性的测定方法，以及与缺血性损害的关系。方法 采用新型小鼠大脑中动脉线栓模型，检测不同缺血时间组梗塞体积及ＭＰＯ活性。结果 缺血１ ｈ 后再灌注２３ ｈ 组（ｔＭＣＡＯ）缺血灶体积明显小于缺血２４ ｈ 组（ｐＭＣＡＯ）；ＭＰＯ活性在各缺血组缺血侧明显高于对照侧和对照组（ Ｐ＜ ０－０５），ｐＭＣＡＯ 组缺血侧基底节区ＭＰＯ 活性显著高于ｔＭＣＡＯ 组（ Ｐ＜ ０－０５） ，而两组缺血皮质区ＭＰＯ 活性则无显著差异。结论 本研究建立了局灶性脑缺血的ＭＰＯ活性测定方法，证明ＭＰＯ活性与缺血损伤间具有一定关系。

5-羟色胺2c受体拮抗剂减弱高血压大鼠血压及主动脉的收缩性

目的观察慢性颅室内给予选择性5-HT2C受体拮抗剂RS102221是否能阻止醋酸脱氧肾上腺皮质激素-盐(DOCA)高血压大鼠血压的发展,以证实中枢神经系统5-HT2C受体参与了血压的调节和高血压的病理。方法通过导管,用微型渗透泵以恒定速率脑室输注选择性5-HT2C受体拮抗剂RS102221,观察拮抗中枢神经5-HT2C受体后对醋DOCA高血压大鼠(n=6)血压的影响。此外检测了5-HT2C受体拮抗剂对DOCA大鼠主动脉等张收缩力的影响。结果脑室输注RS102221减低DOCA大鼠血压的发展。5-HT2c受体拮抗剂的治疗消除了DOCA大鼠和对照组大鼠主动脉环对5-HT的反应差异。结论中枢神经系统5-HT2C受体参与了DOCA大鼠血压的调节和高血压的病理,其主动脉5-HT受体亚型的改变可能是高血压病理之一。

中枢给予5-羟色胺2C受体拮抗剂对DOCA高血压大鼠血压的作用

目的 :本实验是为了证实中枢神经系统的 5 -HT2C受体是否参与了血压的调节和高血压的发病。方法 :使用SD造模DOCA高血压大鼠 ,通过植入右侧脑室的不锈钢导管 ,用微型渗透泵以恒定速率慢性脑室输注选择性 5 -HT2C受体拮抗剂RS1 0 2 2 2 1 ,观察拮抗中枢神经 5 -HT2C受体后对DOCA高血压大鼠血压的影响。另一个实验使用SD大鼠 ,慢性脑室输注选择性 5 -HT2C受体促进剂MK2 1 2 ,以及MK2 1 2和RS1 0 2 2 2 1同时输注 ,以进一步证实 5 -HT2C受体对大鼠血压的作用。结果 :脑室输注RS1 0 2 2 2 1能减低DOCA大鼠血压的发展 ,MK2 1 2能使SD大鼠发展为高血压 ,而同时使用RS1 0 2 2 2 1的SD大鼠血压则保持正常。结论 :中枢神经系统 5

白细胞介素1受体拮抗剂对小鼠再灌注损伤的保护作用

目的 探讨在小鼠线栓模型中 ,基因转染过度表达的IL 1ra蛋白对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 成年CD 1小鼠 ,右侧脑室内注射腺病毒载体 (编码人类重组IL 1ra或LacZ基因 )或生理盐水。 5d后 ,单侧大脑中动脉线栓阻断 1h ,再灌注 2 3h。采用激光多普勒血流仪 (LDF)监测脑表面血流 ,HE染色脑切片计算脑梗死体积 ,内源性白蛋白免疫组织化学染色评价血脑屏障破坏程度 ,并采用免疫组织化学染色 ,计数脑内细胞间粘附分子 (ICAM 1)表达阳性血管。结果 IL 1ra基因转染小鼠脑梗死面积明显小于LacZ基因转染组和生理盐水对照组 (36 .0mm3± 5 .3mm3,6 0 .0mm3± 6 .2mm3 和 6 9.5mm3± 6 .3mm3,P <0 .0 5 )。IL 1ra基因转染组小鼠血脑屏障破坏程度也明显轻于LacZ基因转染组和生理盐水对照组 (P <0 .0 5 )。同时缺血皮质区和基底节区ICAM 1阳性血管数明显少于LacZ基因转染组和生理盐水对照组 (P <0 .0 5 )。结论 证实IL 1ra对脑缺血 /再灌注损伤具有保护作用。转基因表达的IL 1ra能减少缺血区ICAM

小鼠局灶性脑缺血的脑血流动力学和脑损害的评价

目的 建立一种可靠的小鼠脑缺血模型，了解永久性和暂时性阻断血管后的脑病理生理变化。方法 Ｃ Ｄ１ 小鼠，单侧大脑中动脉线栓阻断，监测脑血流，测量梗塞体积和血脑屏障破坏程度。结果 小鼠均出现成熟缺血核心区和半暗区。不同缺血／ 再灌注时间产生不同缺血损害和血脑屏障破坏，但有时限。结论 建立了一种可靠、复制性强的小鼠局灶性缺血模型。血脑屏障破坏在缺血损害中起重要作用。短时间缺血后的再灌注能减轻缺血性脑损害。

大鼠脑出血早期应用他莫西芬的治疗作用

目的:本研究探讨大鼠实验性脑出血(ICH)早期应用不同剂量他莫西芬(Tam)对脑损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠56只,予右侧基底节注射100μL自体动脉血制作ICH模型,并分为3大组。①24h脑水含量及病理观察组(各亚组均n=6):大鼠在ICH后2 h分别接受不同剂量Tam(Tam 2.5 mg·kg^(-1)组、Tam 5 mg·kg^(-1)组)和4%DMSO生理盐水(24 h对照组)腹腔注射,24 h后处死进行脑水含量及病理观察。②72 h脑水含量观察组(各亚组均n=6):大鼠在ICH后2h和24h分别接受不同剂量Tam(72h Tam2.5mg·kg^(-1)+2.5mg·kg^(-1)组、72hTam2.5mg.kg^(-1)+5mg·kg^(-1)组、72h Tam 5mg.kg^(-1)+5mg·kg^(-1)组)和4%DMSO生理盐水(72 h对照组)腹腔注射,于术后72 h处死测量脑水含量。③28 d影像学及病理学观察组:大鼠在ICH后2和24h分别2次给予tam(28d Tam 5mg.kg^(-1)+5mg,kg^(-1)组)(n=6),4%DMSO生理盐水(28 d对照组)(n=8)腹腔注射,分别在术后1、7、14和28d随访MRI和行为学变化,并在第28天处死进行组织学检查。结果:Tam5 mg·kg^(-1)能明显减轻ICH后3 d时脑水肿(P<0.05),改善术后行为学评分(P<0.05),并能明显减轻ICH术后28 d同侧尾状核的脑萎缩(P<0.01),但MRI提示2例大鼠出现幕上脑室异常扩大。结论:Tam作为选择性雌激素受体调节剂,在ICH后有明显的神经保护作用,但发生了脑积水的不良反应,需要进一步的研究。