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利用SMART技术构建锯缘青蟹精巢和卵巢的cDNA文库
被引量:
19
1
作者
贾锡伟
王艺磊
+1 位作者
张子平
李少菁
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期547-550,共4页
采用RDP试剂(改进自ChomczynskiandSacchi1987)提取锯缘青蟹精巢和卵巢的总RNA,经oligotex试剂盒纯化得到mRNA.利用SMART(switchingmechanismat5'endofRNAtranscript)技术,构建成精巢和卵巢的全长cDNA文库.在构建好的文库中,精巢的...
采用RDP试剂(改进自ChomczynskiandSacchi1987)提取锯缘青蟹精巢和卵巢的总RNA,经oligotex试剂盒纯化得到mRNA.利用SMART(switchingmechanismat5'endofRNAtranscript)技术,构建成精巢和卵巢的全长cDNA文库.在构建好的文库中,精巢的文库含有约1.45×106的重组子,卵巢的文库含有约为1.75×106的重组子.插入cDNA长度为500bp~3kb,说明两文库均具有良好的质量,为进一步筛选、克隆精巢与卵巢特异表达基因奠定了基础.
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关键词
SMART技术
精巢
卵巢
CDNA文库
锯缘青蟹
养殖
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职称材料
日本对虾(Penaeus japonicus)性腺差异表达基因GD13之cDNA5’端克隆
2
作者
张焦平
张子平
+1 位作者
邹志华
王艺磊
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期847-851,共5页
采用基于SMART(SwitchingMechanismAt5'endofRNATranscript)原理的cDNA末端快速扩增技术(RapidAmpli ficationofcDNAends:RACE),对日本对虾性腺差异表达基因cDNA5'端进行克隆,即在逆转录过程中通过SMARTⅡoligo的介导,在cDNA第...
采用基于SMART(SwitchingMechanismAt5'endofRNATranscript)原理的cDNA末端快速扩增技术(RapidAmpli ficationofcDNAends:RACE),对日本对虾性腺差异表达基因cDNA5'端进行克隆,即在逆转录过程中通过SMARTⅡoligo的介导,在cDNA第1条链的3'端接上接头,然后根据已知序列设计的基因特异性引物(GSP1和GSP2)和接头引物(UPM和NUP)进行Nested PCR特异性扩增,并对特异产物进行克隆和序列分析,最终获得全长cDNA序列.测序结果表明,在卵巢内表达量高于精巢的GD13基因全长为656bp,编码164氨基酸,经NCBI检索,此基因与文昌鱼、家鼠的核糖体蛋白L24及黄牛的核糖体蛋白L30氨基酸序列同源性分别高达58%、56%和56%,可断定该基因为编码日本对虾核糖体蛋白L24亚基的基因.为进一步认识对虾生长发育和繁殖的调控机制奠定基础.
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关键词
差异表达基因
GD
DNA
克隆
性腺
家鼠
介导
japonicus)
日本对虾(Penaeus
核糖体蛋白
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职称材料
题名
利用SMART技术构建锯缘青蟹精巢和卵巢的cDNA文库
被引量:
19
1
作者
贾锡伟
王艺磊
张子平
李少菁
机构
厦门
大学
海洋与环境学院
集美
大学
水产
学院
水产
生物
技术研究所
美国密歇根州立大学水产与野生生物学系
出处
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期547-550,共4页
基金
国家教育部骨干教师基金
福建省重中之重项目资助
文摘
采用RDP试剂(改进自ChomczynskiandSacchi1987)提取锯缘青蟹精巢和卵巢的总RNA,经oligotex试剂盒纯化得到mRNA.利用SMART(switchingmechanismat5'endofRNAtranscript)技术,构建成精巢和卵巢的全长cDNA文库.在构建好的文库中,精巢的文库含有约1.45×106的重组子,卵巢的文库含有约为1.75×106的重组子.插入cDNA长度为500bp~3kb,说明两文库均具有良好的质量,为进一步筛选、克隆精巢与卵巢特异表达基因奠定了基础.
关键词
SMART技术
精巢
卵巢
CDNA文库
锯缘青蟹
养殖
Keywords
cDNA library
testis
ovary
Scylla serrata
分类号
S966.16 [农业科学—水产养殖]
Q954.592 [生物学—动物学]
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职称材料
题名
日本对虾(Penaeus japonicus)性腺差异表达基因GD13之cDNA5’端克隆
2
作者
张焦平
张子平
邹志华
王艺磊
机构
厦门
大学
生命科学学院
美国密歇根州立大学水产与野生生物学系
集美
大学
水产
学院
水产
生物
技术研究所
出处
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期847-851,共5页
基金
国家自然科学基金(30070597)
国家骨干教师基金资助
文摘
采用基于SMART(SwitchingMechanismAt5'endofRNATranscript)原理的cDNA末端快速扩增技术(RapidAmpli ficationofcDNAends:RACE),对日本对虾性腺差异表达基因cDNA5'端进行克隆,即在逆转录过程中通过SMARTⅡoligo的介导,在cDNA第1条链的3'端接上接头,然后根据已知序列设计的基因特异性引物(GSP1和GSP2)和接头引物(UPM和NUP)进行Nested PCR特异性扩增,并对特异产物进行克隆和序列分析,最终获得全长cDNA序列.测序结果表明,在卵巢内表达量高于精巢的GD13基因全长为656bp,编码164氨基酸,经NCBI检索,此基因与文昌鱼、家鼠的核糖体蛋白L24及黄牛的核糖体蛋白L30氨基酸序列同源性分别高达58%、56%和56%,可断定该基因为编码日本对虾核糖体蛋白L24亚基的基因.为进一步认识对虾生长发育和繁殖的调控机制奠定基础.
关键词
差异表达基因
GD
DNA
克隆
性腺
家鼠
介导
japonicus)
日本对虾(Penaeus
核糖体蛋白
Keywords
Penaeus japonicus
gonad
GD13
SMART-RACE
cDNA cloning
分类号
N941 [自然科学总论—系统科学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用SMART技术构建锯缘青蟹精巢和卵巢的cDNA文库
贾锡伟
王艺磊
张子平
李少菁
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
19
下载PDF
职称材料
2
日本对虾(Penaeus japonicus)性腺差异表达基因GD13之cDNA5’端克隆
张焦平
张子平
邹志华
王艺磊
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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