血红素对脑神经元、星形胶质细胞、毛细血管内皮细胞的不同损伤作用

目的研究不同剂量高铁血红素对脑内神经元、星形胶质细胞、脑毛细血管内皮细胞（BCEC）的损伤作用。方法（11在原代培养大鼠脑皮质神经元、星形胶质细胞、BCEC上添加不同剂量（0、5、25、50mmol／L）的高铁血红素孵育2h，去血红素后继续培养24或96h，阿拉玛蓝染色检查细胞存活率，常规生化反应法检测乳酸脱氢酶（LCD）释放率，相差光学显微镜观察细胞形态。（2）在原代培养细胞上添加不同剂量血红素孵育2h，去血红素后继续培养4h，以浓甲酸裂解细胞．分光光度计下测定细胞内血红素含量。（31在原代培养细胞上加血红素分别孵育30、60、120min，去血红素后继续培养4h，以中性福尔马林液固定细胞，普鲁士蓝染色检查细胞内三价铁离子（Fe3＋）染色情况。结果（1）神经元经5mmol／L的血红素处理后24h，存活率下降40_2％，LCD释放率增加22．2％，细胞形态出现严重损伤病变。随着时间延长和血红素剂量加大，细胞死亡率和LCD释放率均增加，细胞病变加重。（2）中、低剂量血红素（5mmol／L、25mmol／L）不引起星形胶质存活率、LCD释放率及细胞形态改变．高剂量血红素（50mmol／L）在24h后导致星形胶质细胞存活率下降52．4％，LCD释放率增加31．8％，并出现细胞病变；但96h后损伤细胞得到修复，细胞重新形成致密单层，细胞存活率和LCD释放率均达正常水平。f31无论低剂量或高剂量血红素均未引起BCEC存活率下降、LCD释放率升高或细胞形态学改变。（4）经不同剂量血红素处理2h后，神经元内血红素含量均明显升高，星形胶质细胞内血红素含量只有在大剂量血红素处理后才升高．BCEC内血红素含量未见升高。（51神经元接触血红素30min后细胞内即出现大量Fe3＋染色阳性颗粒，随着接触时间延长和剂量加大，Fe3＋染色阳性细胞数增多：星形胶质细胞Fe3＋染色阳性细胞数明显少于神经元，BCEC几乎不出现Fe3＋染色阳性细胞。结论（1）Ng_素对神经元具有严重的直接损伤作用，对星形胶质细胞有可逆的损伤作用，对BCEC无直接损伤作用。（2）血红素能快速进入神经元并在神经元内积累，但较少在星形胶质细胞脑积累，难以在BCEC内积累。