DEHP对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞雄激素合成的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞(FLC)雄激素合成的影响。方法:DEHP分别以低、中、高3组剂量(10、100、750 mg.kg-1.d-1)灌胃作用于怀孕12 d到产后1 d(GD12-PND1)的SD母鼠,观察DEHP对雄仔鼠血清睾酮(T)水平、睾丸FLC形态结构、睾丸FLC的类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)及胰岛素样生长因子1(IGF-I)mRNA的相对表达量(ΔΔCT法)。结果:低剂量组血清T水平显著高于对照组(P<0.01);而中、高剂量组血清T水平显著低于对照组(P<0.05)。光镜下低剂量组可见间质细胞聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见间质细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组间质细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组间质细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞浆丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。高剂量组睾丸FLC的StAR mRNA的相对含量显著低于对照组(P<0.01)。低剂量组睾丸FLC的IGF-Ⅰ mRNA相对含量显著高于对照组(P<0.01)。结论:DEHP对新生雄性仔鼠睾丸FLC有毒性作用,可影响雄性仔鼠睾丸FLC的形态学及其生成类固醇的能力。其可能机制是低剂量DEHP宫内暴露后,促进睾丸FLC的IGF-ⅠmRNA表达从而引起血清睾酮升高,而高剂量DEHP可能通过抑制睾丸FLC StAR mRNA表达从而降低血清睾酮水平。

DEHP对新生雄性仔鼠毒性作用的实验研究

目的探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对新生雄性仔鼠毒性作用及机制。方法 DEHP分别以低、中、高3组剂量[10、100、750mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12天到产后21天(GD12～PND21)的SD母鼠,观察DEHP对产后1天(PND1)及产后21天(PND21)雄性仔鼠体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD)和其对胚胎Leydig细胞形态结构、促黄体生成素受体(LHR)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白表达水平的影响。结果 PND1中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比较均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比较有显著性差异(P<0.05);中、高剂量组雄仔鼠的AGD均有不同程度缩短,与对照组和低剂量组相比缩短均有显著性差异(P<0.01)。PND21中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);中、高剂量组雄仔鼠的AGD缩短明显,分别与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下低剂量组可见胚胎Leydig细胞(FLC)聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见胚胎Leydig细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组Leydig细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组Leydig细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞质丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。中、高剂量组睾丸FLC的LHR蛋白表达明显减弱,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸FLC的StAR蛋白表达减弱明显,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 DEHP对新生雄性仔鼠具有毒性作用,其可能机制是DEHP宫内暴露后,抑制睾丸FLC的LHR蛋白和StAR蛋白的表达从而影响睾丸的发育。

根治HIV感染的一种现行研究策略-HAART+疟疾疗法

高效抗逆转录病毒疗法(简称HAART,俗称"鸡尾酒疗法")可以清除感染者血液中99%或以上的人免疫缺陷病毒(HIV,本文指HIV-1),使HIV病毒载量降到可测水平之下,从而使童真(naive)CD4T-淋巴细胞(以下CD4T-淋巴细胞简称CD4细胞)不再受病毒感染,使感染者和患者的免疫功能逐渐得以重建.

ES细胞体外定向分化为睾丸间质样细胞模型的建立

目的:建立小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞体外分化为睾丸间质样细胞(leydig-like cells)的模型。方法:采用脂质体转染方法将含类固醇生成因子1(steroidogenic factor 1,SF-1)基因片断的质粒转入小鼠ES-D3细胞,并在RA和8Br-cAMP作用下,体外诱导ES-D3细胞分化为睾丸间质样细胞,以空质粒转染组做阴性对照;通过光镜观察转染SF-1的ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞过程中的形态变化;用RT-PCR及Western Blot法检测分化过程中类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR),胆固醇侧链裂解酶P450scc(CYP11A1)和3β-羟甾脱氢酶1(3β-HSD1)表达情况;免疫荧光法检测睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc及3β-HSD1表达。结果:ES-D3细胞转染SF-1质粒24 h,即检测到SF-1基因表达。转染成功的ES-D3细胞在RA和8Br-cAMP诱导分化48 h后出现睾丸间质样细胞。分化而来的睾丸间质样细胞胞体大而圆润,长有触角,呈纺锤形;且表达睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc和3β-HSD1,同时StAR表达显著增加,而对照组细胞未表达睾丸间质样细胞特异性标志物StAR、P450scc和3β-HSD1。结论:通过对ES-D3细胞转染SF-1质粒并予以RA和8Br-cAMP诱导,成功建立ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞模型。

石斛离体培养中ABA对诱导花芽形成的影响

由兰科植物铁皮石斛（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ Ｗａｌｌ．ｅｘ Ｌｉｎｄｌ．）种子诱导形成的愈伤组织，在光照下置于ＭＳ附加０．３ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上繁殖，可以形成原球茎。将原球茎转入ＭＳ含２ ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ 和０．５ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 的培养基上，花芽形成频率为２７．０％ 。原球茎先在０．５ ｍ ｇ／ＬＡＢＡ的培养基上预培养１５ ｄ，再转入含２ ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ 的ＭＳ培养基上培养，花芽形成频率明显提高，可达８４．４％ ，而且每株植株花的数目增加；但是在仅有ＡＢＡ

纤溶酶原激活剂及其相关分子在小鼠视神经损伤再生中的变化

目的:检测细胞外基质(ECM)中各蛋白酶在视神经损伤后的变化,分析ECM蛋白酶活性的变化与小鼠视神经损伤和损伤后再生之间的关系。方法:本实验采用建立小鼠视神经钳夹伤的动物模型,用WesternBlot方法检测小鼠视神经损伤后不同时间点神经丝(NF)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、IgG的表达变化。同时采用原位酶谱分析法检测纤溶酶原激活剂(PA)活性在视神经损伤后各阶段的变化,并分析这种变化与纤维蛋白(原)沉积、髓鞘碎片清除等影响神经再生的因素之间的关系。结果:小鼠视神经损伤后发生进行性Wallerian变性,血-神经屏障(BNB)修复迟缓,沉积的纤维蛋白(原)于损伤后第2d清除。MMP-9在损伤后2d达到高峰,以后仍呈现高水平的表达,且均以前体形式出现。PA活性在损伤后第7d达到高峰,并持续至第28d。结论:视神经损伤后,损伤部位BNB重建、PA激活、纤维蛋白(原)的清除以及MMP-9的表达与周围神经截然不同,正是由于微环境的迥然差异,导致了中枢神经系统(CNS)髓鞘碎片清除不利、轴突再生障碍。

计算生物学的学科进展及其人才的缺乏（英文）

现今的生物医药学研究很大程度上得益于生物技术的发展,这些生物技术产生了大量的生物学数据。如何更好地整合并运用错综复杂的生物学数据来支持和驱动生物医药学的研究显得尤为重要。计算生物学覆盖并融合了众多学科,包括计算学、生物学、医学、化学、药学、数学、统计学。本研究简要介绍了计算生物学科,阐述了培养计算生物学人才的迫切需要,并讨论了其现状和机遇。

CR3的Ⅰ结构域的克隆和在CHO细胞中的表达及配体结合特性的研究

目的研究白细胞整合素ＣＲ３α亚基的Ⅰ结构域在配体结合中的作用。方法克隆ＣＤ１１ｂ的Ⅰ结构域，用重叠ＰＣＲ的方法将其与信号肽ＤＮＡ连接，克隆到表达载体ＰＥＥ６ＨＣＭＶ．ＧＳ，转化ＣＨＯ－Ｋ１细胞。表达的Ⅰ－结构域经ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ｍｏｎｏ－Ｓ柱纯化后，与Ｃ３ｂｉ进行配体结合实验。结果用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得重组的Ⅰ结构域分子量为２９ｋＤ。重组的Ⅰ结构域可以与Ｃ３ｂｉ结合，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析示结合常数为３００±１１３ｎｍｏｌ／Ｌ，这种结合可以被抗Ⅰ－结构域单克隆抗体ＬＰＭ１９Ｃ和ＥＤＴＡ抑制。结论Ⅰ结构域对于结合单体Ｃ３ｂｉ是必要的和充分的，结合需要二价阳离子。

中国做好应对重大流行性传染病威胁的准备了吗?

去年1月,英国《自然》杂志开创“中国之声”专刊,发表了一些海外华裔科学家对中国科研工作评估与改进建议的文章,获得了科学界的广泛反响和有关方面的高度重视。本刊曾选摘其部分内容,载于去年的2月号上。10个月之后,《自然》杂志(2004年11月18日)再奏“中国之声”,又请多位更加熟悉中国科研工作状况,包括有较长期在海外从事科研工作的经验,目前已在国内科研机构任职的著名科学家,或对我国科研工作的组织管理体制,或对某一领域科研工作的成就与问题,坦率陈词,进一步提出了不少宝贵的建议。有的意见,即或只是一得之见,但亦都有所据,而且出于更好地促进中国科技发展的真诚与热忱,具有重要的参考价值。为此,本刊再予择要摘载(部分标题本刊编者作了适当改动) ,以飨读者。

医院内铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的5年耐药性变化

目的探讨医院内铜绿假单胞菌(PA)对碳青霉烯类抗生素的耐药性,以指导抗菌药物合理使用。方法采集2004至2008年温州医学院附属第一医院病房临床分离PA共3532株,选择亚胺培南(IMP)和美罗培南(MEM)对PA进行药敏实验。结果对IMP和MEM的总耐药率分别是48.44%和46.75%。2005年对IMP的耐药率是60.59%,而2008年的下降到36.79%(P<0.01)。2005年MEM的耐药率是75.23%,而2008年下降到25.95%(P<0.01)。结论 PA对碳青霉烯类的耐药情况严重,对于PA的感染,应在药敏指导下用药。碳青霉烯类抗生素的耐药性已得到明显的控制。

非HIV感染的获得性免疫缺陷

临床中由不同的细菌,真菌和病毒感染所致的感染性疾病的患者免疫缺陷包括原发性或获得性免疫缺陷两大类,前者因遗传基因缺陷引起,后者因HIV感染所致。新的获得性免疫缺陷逐渐浮出水面,其发病机制特殊,本文介绍该方面的临床感染和免疫学研究的进展,着重强调强中和力抗-IFN-γ所致的分枝杆菌易感综合征,另名为成人起病型免疫缺陷;同时介绍其他中和性抗细胞因子抗体所致的获得性免疫缺陷及其相关感染。这一领域的快速发展,会发现更多与传染性疾病有关的致病性抗体。

动物细胞的基因转录调控:来自生化研究的启示

在真核细胞中,转录调控可以发生在多个层面,包括结构和功能迥异的RNA聚合酶、对应的广谱起始因子、基因特异性调控因子(DNA结合蛋白)以及各种共调节因子(coregulatory factors)。这些共调节因子可以通过染色质修饰,如组蛋白乙酰化和甲基化,或更直接地促进转录起始复合物的形成。通过一系列体外转录活性实验的研究,转录相关的酶、蛋白因子的性质和功能以及作用机制正逐步被揭示出来。该文将具体阐述近几十年科学家们在转录共调节因子方面取得的进展。

英国皇家学会新会长

周末的一个下午,我和老婆一起上街,迎面并排走来4个人,他们神采飞扬地说着些什么,后面又跟过来6个人。我问老婆认识这些人吗？老婆给了我非常坚定的答案,不认识。是啊,在曼哈顿的大街上随便走过来的10个人她怎么会认识呢，她怎么知道这10个人里面有6个是诺贝尔奖得主。另外4个人是拉斯克医学奖得主呢？她怎么又会知道，