液氮保存对人主动脉瓣组织细胞活力的影响

目的 主要观察液氮 (- 196℃ )保存 1～ 2 4mo不同时间段的瓣膜组织细胞活力及组织培养细胞生长情况的变化 ,为临床适用的人同种主动脉瓣的适宜保存期限提供实验依据 .方法 选取 (18～ 35 )岁健康成年男性脑死亡 30 min内取材的主动脉瓣膜 2 0个 .依据保存时间分为 10组 , 组为新鲜对照组 ,取材后直接供实验用 , ～ 组为冷冻保存组 ,分别为冷冻保存 1,3,6 ,9,12 ,15 ,18,2 1,2 4m o的瓣膜 ,每组 2个瓣膜共 6个瓣叶 .冷冻保存组各组瓣膜缓慢降温 (1℃·min- 1 ) ,液氮中保存 ,实验时进行快速复温 .瓣叶剪为细小组织块 ,一半置入培养瓶中做组织培养 ,相差显微镜下观察其组织细胞生长情况 ;另一半组织块用胰酶消化 ,光镜下做细胞计数并计算其细胞活力 .结果 组的组织细胞活力最高(93.8% ) , ～ 组细胞活力均较 组明显减低 (6 7.3% vs93.8% P<0 .0 5 ) ; , , 组细胞活力较 ～ 组瓣膜各组明显减低 (5 2 .4% vs76 .5 % P<0 .0 5 ) . 组组织细胞 1wk镜下可见 ,生长较快 ,4wk时镜下细胞数较多 ; ～ 组组织细胞 2 wk镜下可见 ,生长较 组稍缓慢 ,4wk时镜下细胞数减少 ; , , 组细胞 3wk镜下可见 ,生长较慢 ,4wk时镜下细胞数较 组明显减少 .结论 液氮保存对人同种瓣膜组织细胞活力有显著影响 。

液氮保存对人同种瓣组织代谢及活性的影响

目的 主要观察液氮 (- 1 96℃ )保存 1～ 2 4个月不同时间瓣膜组织葡萄糖代谢率和同位素标记的胸腺嘧啶核苷掺入量的变化 ,为临床适用的冷冻保存人同种主动脉瓣的适宜保存期限提供实验依据。方法 选取健康成年男性的主动脉瓣膜 2 0个。实验依据保存时间分为 1 0组 ,Ⅰ组为新鲜对照组 ,Ⅱ～Ⅹ组分别为冷冻保存 1～ 2 4个月瓣膜。新鲜瓣膜取材后直接供实验用 ,冷冻组各瓣膜缓慢降温 (1℃·min- 1 ) ,液氮中保存 ,快速复温。瓣膜置入培养液 2 4h ,置入前后分别测定培养液中的葡萄糖含量并计算其差值。同位素测定标本加入氚标记的胸腺嘧啶核苷 ,做CBPM计数 ,计算每mg组织3H TdR掺入量。结果 新鲜瓣膜组葡萄糖消耗量和3H TdR掺入量均最高 ,冷冻保存组随液氮保存时间延长 ,组织的葡萄糖消耗量和3H TdR掺入量逐渐减低 ;冷冻保存 1～ 1 5个月瓣膜葡萄糖代谢率与新鲜瓣膜组比较无统计学意义 ,冷冻保存 1 8～ 2 4个月瓣膜葡萄糖消耗量明显减低 (P <0 .0 5 ) ,冷冻保存 1 2～ 2 4个月瓣膜3H TdR掺入量较对照组明显减低 (P <0 .0 5 )。结论 液氮保存对人同种瓣膜组织葡萄糖代谢率和胸腺嘧啶核苷掺入量有一定影响 ,其程度随保存时间增长而加重 ,液氮保存 1 5～ 2 4个月瓣膜组织代谢率明显减低 ,因此瓣膜耐久性可?