HIV-1蛋白酶和逆转录酶抗药基因变异检测方法的建立及临床应用

目的 应用现有DNA序列分析技术对人类免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)的蛋白酶 (PR)和逆转录酶 (RT)基因进行简便、快速、准确的序列分析 ,在临床上为HIV 1患者治疗方案的确定提供可靠依据。方法 从HIV 1感染者血清中提取RNA ,用套式逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增HIV 1的PR和RT基因片段 ,并对此片段进行核苷酸序列分析。结果 本方法对血清中HIV 1RNA含量约 2 0 0 0拷贝 ml以上的样品都能有效扩增。在序列分析时背景干扰少 ,对 2 5 %左右的混合序列均能准确反映。通过对临床治疗病人进行动态序列分析观察 ,发现在药物治疗过程中 ,病人血浆中HIV 1RNA含量变化与PR和RT基因抗药性变异具有很大相关性。结论 PR和RT基因序列分析方法能够及时、准确地反映HIV 1患者在抗病毒药物治疗过程中病毒的变异情况。该方法的建立能在临床上能为不同患者治疗方案的确定提供直接。