温阳补肾方对哮喘小鼠脾脏树突细胞的免疫调控机制研究

目的通过观察哮喘小鼠脾脏中树突细胞(DC)表面共刺激分子CD80、CD86的表达变化,探讨温阳补肾方对哮喘小鼠脾脏树突细胞的免疫调控机制。方法 30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西药结合组,每组6只。除正常组外,余组建立小鼠哮喘模型,并予以相应的干预措施。各组小鼠肺组织切片进行苏木精-伊红染色后观察炎症反应;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IL-4、IFN-γ、ECP的含量;取各组小鼠脾脏组织分离树突细胞,经过DC培养,扫描电镜观察DC形态,用流式细胞仪(FACS)分析各组小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达量。结果模型组小鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润。与正常对照组比较,模型组小鼠IL-4、ECP水平上调,INF-γ水平下调,CD80、CD86阳性表达率上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组可下调血清IL-4、ECP的水平(P<0.01);与中药组和西药组比较,中西医结合组疗效最佳,IL-4、ECP差异有统计学意义(P<0.05)。中药组和中西医结合组可上调INF-γ表达水平(P<0.01);各治疗组可下调树突细胞表面CD80、CD86的表达水平(P<0.05);与中药组和西药组比较,中西医结合组疗效最佳,其CD80、CD86的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论温阳补肾方可以抑制哮喘小鼠气道的炎症反应,调节Th1及Th2免疫失衡,与地塞米松有协同效应,其下调脾脏树突细胞的表达是温阳补肾方治疗哮喘的一个重要机制。

温肾方对哮喘小鼠ILC2相关分子表达的影响

目的研究温肾方对哮喘小鼠2型固有淋巴样细胞(ILC2)相关分子表达的影响。方法 30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(NC)、IL-33组、西药组(PRE)、温肾方组(WSF)、中西医结合组(CO),每组6只。除正常对照组外,其余4组用IL-33(每40μl含0.4μg)滴鼻,连续6天,第7天开始隔天滴鼻,持续1周。西药组(醋酸泼尼松1.125 g/kg)、温肾方组(温肾方9 g/kg)和中西医结合组(温肾方加醋酸泼尼松)均在滴鼻前1 h灌胃给予相应药物干预,共15天。采用HE染色观察各组肺组织的形态和炎症细胞的浸润情况;以ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13细胞因子的表达;采用荧光定量PCR检测肺组织中RORα的表达情况。结果①与正常对照组比较,IL-33组小鼠肺组织黏膜皱襞增厚,炎性细胞明显浸润,温肾方组、西药组和中西医结合组均可明显降低炎性细胞的浸润。②与正常对照组比较,IL-33组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13的表达水平明显升高(P<0.001),温肾方组、西药组和中西医结合组均可以明显下调小鼠BALF中IL-4、IL-5、IL-13的表达水平,与IL-33组比较差异有统计学意义(P<0.01)。③与正常对照组比较,IL-33组可明显上调小鼠肺组织中ILC2的RORαmRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.001);温肾方组、西药组和中西医结合组均可以明显下调小鼠肺组织RORα的mRNA表达,与IL-33组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论温肾方能减轻小鼠气道炎症细胞的浸润,缓解哮喘炎症;并可下调ILC2分泌相关的细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的表达和ILC2特异性转录因子RORαmRNA的表达。