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H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究
被引量:
1
1
作者
许莹
郭巍
+6 位作者
王世霞
黄文强
张璐
卢山
周建华
相文华
黄祖瑚
《中国医药生物技术》
CSCD
2010年第3期196-201,共6页
目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJ...
目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。
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关键词
流感病毒A型
H3N8亚型
血凝素类
疫苗
DNA
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职称材料
题名
H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究
被引量:
1
1
作者
许莹
郭巍
王世霞
黄文强
张璐
卢山
周建华
相文华
黄祖瑚
机构
南京医科
大学
第一附属医院感染病科
江苏省人民医院中美疫苗中心
中国农业科
学院
哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室
美国麻省大学医学院内科学系
出处
《中国医药生物技术》
CSCD
2010年第3期196-201,共6页
基金
黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD200812)
兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目(NKLVBP200815)
江苏省自然科学基金(BK2006728)
文摘
目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。
关键词
流感病毒A型
H3N8亚型
血凝素类
疫苗
DNA
Keywords
Influenza A virus
H3N8 subtype
Hemagglutinins
Vaccines
DNA
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究
许莹
郭巍
王世霞
黄文强
张璐
卢山
周建华
相文华
黄祖瑚
《中国医药生物技术》
CSCD
2010
1
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