小檗碱对糖尿病db／db小鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响及机制研究

目的探讨小檗碱对糖尿病／胰岛素抵抗模型db／db小鼠骨骼肌蛋白质代谢及肌萎缩蛋白Fbox-1（Atrogin-1）表达的影响。方法db／db小鼠为研究对象，以野生型为对照组。予小檗碱（5mg·kg-1·d-1）腹腔注射3周，观察体重和食量；3周末处死，分离胫骨前肌和腓肠肌。胫骨前肌冰冻切片行层黏连蛋白免疫组化染色，荧光显微镜下观察并拍照，测量肌纤维横截面积并计算肌纤维面积分布图；同位素[14C]．苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成，[3H]-酪氨酸释放率分析检测肌肉分解代谢；Northern印迹检测腓肠肌Atrogin-1和肌环指蛋白1（MurF-1）转录水平，Western印迹检测蛋白翻译水平。结果小檗碱能明显降低db／db小鼠血糖水平[（18．55±3．79对26．32±4．02）mmol／L，P〈O．01]，降低脂肪重量[（2．75±0．30对3．77±0．52）g，P〈O．05]，使胫骨前肌的肌重／胫骨长度比值及肌纤维横截面积下降，肌纤维面积分布图明显左移；小檗碱使野生型小鼠和db／db小鼠的蛋白质合成率下降18％～22％；蛋白质分解率升高24％～26％，使肌肉特异性的Atrogin-1、MurF-1转录和翻译水平增高，同时使真核转录因子3调节亚基（eIF3-f）蛋白水平降低。结论小檗碱具有降糖降脂作用，但可引起骨骼肌蛋白质合成下降，促进蛋白质分解代谢，加剧糖尿病的骨骼肌消耗，其机制与上调Atrogin-1和MurF-1表达，同时下调eIF3-f有关。