对短期来华美国大学生的汉语教学调查及教学策略探讨

文章通过调查部分美国大学来华短期留学生,从课堂教学、作业和测试三个方面探讨适合美国大学生短期汉语教学的有效方法,并给出了具体的教学建议。

通过废水监测新冠疫情——基于废水的流行病学方法介绍

自2019年新冠肺炎在全球暴发以来,通过收集废水观察人群新冠肺炎病毒感染状况和发展趋势,被称为基于废水的流行病学方法,受到多个国家和地区的广泛关注。该方法包括5个步骤:废水标本收集、病毒浓缩、病毒核酸提取、定量RT-PCR检测、监测结果分享。该方法可用于人群新冠暴发疫情的早期预警、观察疫情的分布和发展趋势、估计人群新冠肺炎感染率、了解新冠肺炎病毒在人群中的变异规律及同时监测多种疾病的人群感染状况。废水监测可以和新冠临床监测方法同时使用,是临床新冠监测的很好补充。

目标序列捕获及平行测序在临床耳聋基因诊断中的应用

目的利用目标序列捕获(Targeted sequence capture)、生物编码(Barcode)及大规模平行测序(Massivelyparallel sequencing,MPS)技术,对遗传性耳聋患者进行分子病因学研究,探索低成本、多基因、多样本的耳聋基因检测在临床应用的可行性。方法利用Illumina测序平台对来自解放军总医院聋病分子诊断中心88例(来自61个家系)具有明确家族史且常见耳聋基因检测阴性的耳聋患者,以及8例阳性对照患者进行42种基因的目标序列捕获、Barcode和MPS,并对测序结果进行生物信息学分析。结果利用上述方法在88个个体中大于一人入组家系中发现了10个家系8个基因(TECTA、DFNA5、CDH23、USH1C、MYO7A、POU3F4、SLC26A4、EYA4)14个位点的致病性突变。准确验证了8个阳性对照。大于一人入组家系的致病基因检出率明显高于单人入组家系。结论高通量测序的发展为遗传性耳聋的诊断带来了巨大的机遇。目标序列捕获、Barcode、MPS的结合进一步提高了测序的准确性、降低了测序成本,同时生物信息学的进步,将促进低成本、多基因、多样本的临床耳聋基因检测成为可能。

小剂量激素对类风湿性关节炎患者的远期疗效

目的系统评价小剂量糖皮质激素(<15mg/d)治疗类风湿性关节炎的远期疗效以及安全性。方法检索小剂量糖皮质激素治疗类风湿性关节炎的随机临床试验结果。用Revman4.2软件对入选的文献进行Meta分析。结果最终纳入14项研究,Meta分析结果:临床有效率的合并OR值为1.50,95%CI:1.18～1.92,P=0.001;骨关节有效率的合并OR值为0.87,95%CI:0.66～1.55,P=0.32;小剂量激素对Sharp评分影响的合并OR值为-5.84,95%CI:-6.73～-4.95,P<0.000 01;对骨质侵蚀分数影响的合并OR值为-4.34,95%CI:-4.63～-3.99,P<0.000 01;对关节狭窄分数影响的合并OR值为-1.03,95%CI:-1.31～-0.75,P<0.000 01;对健康评定问卷(HAQ)评分和握力比较差异无统计学意义。结论小剂量糖皮质激素治疗类风湿性关节炎远期疗效较好且不会引起不良反应。

121例原发性IgA肾病的临床与病理及相关性分析

目的:了解IgA肾病患者的临床表现及其病理类型、损害程度,并探讨其相关性。方法:对经肾活检证实为原发性IgA肾病的121例患者的资料进行回顾性分析。结果:121例中男55例,女66例,平均年龄(33.33±10.59)岁;临床表现以尿检异常型最常见,为50例(占41.3%),其次是高血压型25例(占20.7%)及大量蛋白尿型21例(占17.3%);肾脏病理类型多样,Hass分级以Ⅲ级为主(占47.9%);伴新月体形成39例(占32.2%),伴肾小管损害91例(占75.2%),伴有血管病变23例(占19%),免疫复合物的沉积以IgA+IgM+C3型比例最高为48例(占39.67%),IgM沉积总计达77例(占63.63%)。结论:IgA肾病的临床表现和病理类型多样,存在着一定的相关性但不完全一致,要综合临床表现并早期行肾活检以明确肾脏病理诊断。

我国脑血栓患者家系凝血因子Ⅸ基因SNP9的检测

目的 探讨凝血因子 基因在第六外显子 2 3384- 2 3387bp存在单核苷酸多态性 (SNP9)在我国北方人群脑血栓发病机制中的作用。方法 应用聚合酶链反应 -限制性片断长度多态性 (PCR- RFL P)的方法 ,检测 2 0例脑血栓患者和他们家系及 6 0例正常健康对照组凝血因子 第六外显子 2 3384- 2 3387bp多态性分布。结果 2 0例脑血栓患者和 40例他们的家系成员 ,在 Mn II酶切后 ,可见 30 7bp片断基因类型全部是 A。正常 6 0例健康对照组基因多态性基因型也显示为 A,而在阳性对照可见 A、G和 AG。结论 在这一等位基因位点脑血栓家系和正常人群基因多态性基因型均为 A型。这一位点基因对我国脑血栓患者的作用机制有待于进一步探讨。

HJ-1-CCD与MODIS数据的NDVI比较分析

利用辐射传输模型对HJ-1-CCD数据进行大气校正并反演出植被指数,和MODIS标准产品数据进行对比,并对典型区域的结果相关性和差异性进行了统计分析。结果显示:①当下垫面为相对均一的地表时,如耕地、有植被覆盖的山地、水体等,两传感器反演出的植被指数相关性(r)和相对差异分别为耕地(0.74,10%)、山地(0.69,12%)、水体(0.78,5%);②当下垫面为较为复杂的地表时,如建筑用地(含居民住宅区)等,两传感器的相关性(r)仅为0.58、相对差异达到18%;③在估算小范围区域且地表覆盖较为复杂的下垫面植被指数时,HJ-1-CCD因其相对较高的空间分辨率,能有效减弱混合像元的影响,进而提供更加丰富的植被指数信息。

组织因子siRNA表达载体的构建及其抑制人神经母细胞瘤细胞组织因子表达的研究

目的:构建组织因子(TF)特异性小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察其对人神经母细胞瘤细胞TF表达的影响。方法:分子生物学方法构建TFsiRNA-pSUPER表达载体,限制酶切予以初步筛选,基因测序进行证实。以脂质体Lipo-fectamine2000介导转染人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC。以WesternBlotting检测TF表达。结果:所构建TFsiRNA-pSUPER表达载体经基因测序证实。SK-N-MC细胞高表达TF,TFsiRNA-pSUPER表达载体转染48h后,TF表达水平与转染pSUPER质粒的对照细胞相比显著降低,呈剂量依赖性。结论:人神经母细胞瘤SK-N-MC中TF异常高表达,本研究构建的TFsiRNA表达载体可在SK-N-MC中特异性下调TF表达,可作为干预TF表达、研究其非凝血功能的有效手段。

快速构建蛋白质结构域克隆库的方法

对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律 .为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆 ,首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列 ,利用国际上现有的共享资源IMAGE(IntegratedMolecularAnalysisofGenomesandTheirExpression)克隆为PCR模板 ,解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题 .利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率 ,从而快速高效地构建了包括 6 0个SH2结构域的克隆库 .克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的载体上 。

一种测定饲料中氯羟吡啶残留的快速电化学检测方法

为探索检测氯羟吡啶等广谱抗球虫药物快速、灵敏的检测方法,本文采用玻碳电极为工作电极,建立了伏安法检测氯羟吡啶的电化学行为。结果表明:氯羟吡啶在1.45 V处具有氧化峰电流,检测的线性范围为1.7×10-7mol/L至2.3×10-5mol/L,检测限为1.4×10-8mol/L,回收率达93.7%。当玻碳电极用Nafion-二茂铁修饰后,可显著提高检测的特异性及灵敏度,使检测下限达1.8×10-9mol/L。同时本文就不同支持电解质溶液、pH值、断路富积时间对测定结果的影响及修饰电极的再生等进行了详细的探讨。

电场耦合高效液相色谱柱改善极性芳烃分离的研究

从燃烧的煤和油中排放出来的极性污染物,包含有多种含氮、氧和硫的极性多环芳烃(PAH),这些极性组分比非极性组分常具有更强的致癌和致突变性。目前,正相高效液相色谱(NP-HPLC)常被用来分离分析这类极性组分。 但是,要提高这些极性组分分离的选择性,现大多采用梯度洗脱的方法。也就是改变流动相极性的方法。本文介绍了一种高压电场耦合色谱柱的新方法。

实验性单纯疱疹性角膜炎的免疫组织化学研究

目的 研究单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV 1)感染后疾病的严重性与宿主遗传因素的关系 ;分析HSV 1感染后小鼠角膜中炎症细胞的亚群分布 ;检测角膜三层细胞中病毒抗原的表达及其临床意义。方法 以单克隆抗体和常规组织学技术作免疫组织化学研究。结果 HSV 1感染后疾病取决于宿主的遗传因素 ,在角膜基质炎中 ,T细胞对引发疾病起主导作用 ,炎症细胞的数量与抗原量相关 ,病毒抗原沉积于角膜三层细胞 ,而BLAB/c中的频率 ( 71%～ 10 0 % )高于C5 7BL/ 6( 11%～ 5 6% )。结论 实验性单纯疱疹性角膜基质炎的严重性取决于宿主的遗传因素 :在引发角膜基质炎过程中 ,T细胞起主导作用 ;基质层为HSV 1最主要沉积场所 。

GJB6基因敲除小鼠耳蜗血管纹超微结构观察

目的观察缝隙连接蛋白30（connexin，Cx30）基因敲除纯合子Cx30（-/-）小鼠（P3、P7、P10、P30、P60、P90）耳蜗血管纹（stria vascularis，SV）超微结构的发育情况，进一步探讨GJB6基因突变导致耳聋的机制。方法选取Cx30（-/-）小鼠P3、P7、P10、P30、P60、P90等6个发育阶段的小鼠，用透射电镜观察耳蜗血管纹超微结构变化情况。结果P3～P90耳蜗血管纹边缘细胞、中间细胞、基底细胞呈现一个由不成熟至成熟的正常发育过程，至P90时均未发现退化性表现或缺失改变。血管纹毛细血管随着小鼠日龄的增加，管腔逐渐变宽，逐渐成熟，高倍镜下见P3、P7、P10时血管内皮细胞结构无明显异常，P30时内皮细胞之间的纤维突起出现疏松，P60时内皮细胞之间出现较大的裂隙，P90时这种改变更加严重，内皮细胞之间出现扩大的细胞间隙。结论 GJB6基因缺陷本身并不影响耳蜗组织血管纹的形态发育和成熟，GJB6缺失引起小鼠出生后逐渐出现的血管纹内皮细胞超微结构的改变导致内皮细胞屏障破坏，可能引起耳蜗内电位缺失，从而造成听力的下降。

人GJB2基因错义突变表达载体构建及鉴定

目的构建6种分别携带GJB2基因错义突变A40G、V37I、L90P、L90V、V84L和W44C的真核表达载体,转染HEK293细胞,建立6种错义突变的稳定表达细胞系。方法以野生型Cx26-EGFP融合蛋白质粒为模板,用Stratagene公司定点突变试剂盒构建错义突变表达载体,直接测序鉴定序列正确性,选取含有突变的载体转染HEK293细胞,G418选择性培养2周,流式细胞仪筛选表达阳性细胞,扩增培养形成稳定表达人Cx26突变的HEK293细胞系。培养细胞用4%多聚甲醛固定,鬼笔环肽和4',6-二脒基-2-苯基吲哚衬染细胞核,荧光显微镜下检测结果。结果6种突变表达载体经过测序,均含有相应突变,无多余突变出现,转染后均可在细胞间形成缝隙连接,呈现绿色荧光。结论成功构建6种携带GJB2基因错义突变的真核表达载体,为进一步研究错义突变致聋原因奠定了实验基础。

雷公藤有效组分WZ_1对肾小球肾炎动物模型的治疗作用及机制探讨

中药雷公藤在我国用于风湿病的治疗已有近千年历史。近年来由于其具有明显的免疫活性,受到国内外学者的关注。目前已从雷公藤全根中鉴定出70余种不同组分。目前所报道的有效成分多为有机溶剂提取物,其毒性较强,影响了进一步使用。我们以传统煎煮的方法从雷公藤根中提取有效成分,

中国脑血栓患者家系凝血因子IX基因SNP9的检测(英文)

目的凝血因子Ⅸ基因在第六外显子23384～23387bp存在单核苷酸多态性(SNP9)。探讨这一单核苷酸的多态性在中国北方人群脑血栓发病机制中的作用。方法应用聚合酶链反应—限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测20个脑血栓患者和他们家系,60例正常健康人群凝血因子Ⅸ第六外显子2338～23387bp多态性分布。结果20例脑血栓患者和40例他们的家系成员,在MnⅡ酶切后,可见307bp片断基因类型全部是A。对照组60例基因多态性基因型也显示为A,阳性对照可见A、G和AG。结论在这一等位基因位点脑血栓家系和正常人群基因多态性基因型均为A型。

循环伏安法快速检测饲料中球虫酯

本实验探讨了检测球虫酯等广谱抗球虫药物快速、灵敏的检测方法,本文采用玻碳电极为工作电极,以伏安法检测了球虫酯的电化学行为。球虫酯在+1.54V处具有氧化峰电流,检测的线性范围为2.5×10-7～3.1×10-5mol/L,检测限为1.6×10-8mol/L,回收率达92.5%。当玻碳电极用Nafion修饰后,可显著提高检测的特异性及灵敏度,使检测下限达2.4×10-9mol/L。同时本实验对不同支持电解质溶液、pH值、断路富积时间对测定结果的影响及修饰电极的再生等进行了详细的探讨。

连接蛋白29在小鼠耳蜗中的表达

目的研究连接蛋白29(connexin 29,Cx29)在小鼠内耳的表达,探讨Cx29突变致聋的原因。方法野生型小鼠耳蜗冰冻切片,用神经丝蛋白(neurofilament,NF)、髓鞘相关糖蛋白抗体(myelin associated glycoprotein,MAG)和神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)抗体与Cx29抗体行双重免疫荧光染色,荧光显微镜观察染色结果。结果Cx29主要表达于位听神经和螺旋神经节细胞髓鞘,MAG与Cx29的共同表达于内耳位听神经处,表达呈圈状;GFAP只在内听道以外的脑干部位表达,与Cx29无共同表达;Cx29形成一个个圈样围绕NF;血管纹处可见Cx29微量表达。结论Cx29在小鼠内耳中大量表达,可能对维持小鼠正常听觉功能起重要作用。

细胞因子和免疫抑制剂对人胚胎心肌细胞HLA抗原表达的影响

我们的实验表明,正常人胚胎心肌细胞(FHC)检测不出人类白细胞抗原(HLA)。激活与未激活的正常人外周血淋巴细胞均能诱导FHC表达HLAⅠ类和Ⅱ类抗原。α干扰素(IFN-α)、白细胞介素1、3、4(IL-1、3、4)以及α肿瘤坏死因子(TNF-α),都能诱导FHC表达HLAⅠ类而不是Ⅱ类抗原。IFN-γ是Ⅰ娄和Ⅱ类抗原的诱导剂。值得注意的是,我们发现IFN-α和TNF-α联合应用时,不仅对Ⅰ类抗原的诱导起增强作用,而且能协同Ⅱ类抗原的表达。环孢霉素A(CsA)和FK-506免疫抑制剂均能抑制Ⅱ类及Ⅰ类抗原的表达。

碳酸镧与醋酸钙治疗维持性透析患者高磷血症的比较研究

目的:探讨新型磷结合剂碳酸镧相对于传统磷结合剂醋酸钙用于治疗维持性透析患者高磷血症的疗效及其对于血管钙化的影响。方法:选取80例终末期慢性肾脏病(CKD)维持性透析高磷血症患者,按随机数字表法分为碳酸镧组和醋酸钙组,检测2组患者服药后1、2、4周及4、8、12个月的血磷、血钙、钙磷乘积水平,并于治疗4周及12个月后检测患者甲状旁腺激素(PTH)水平,比较2组患者短期和1年维持期治疗的疗效。测定2组患者1、4、8、12个月的血管钙化程度,分析碳酸镧对于血管钙化的影响。结果:2组患者的血磷在短期内均下降,前2周2组血磷及钙磷乘积差异不明显,但在第4周碳酸镧组血磷及钙磷乘积均低于醋酸钙组(均P<0.01)。维持1年冶疗后,2组血磷和PTH水平无明显差异,均能有效降低血磷,但碳酸镧组钙磷乘积明显低于醋酸钙组(P<0.01);相比于血透患者,碳酸镧组腹透患者的血磷下降更为明显(P<0.05)。血管钙化程度比较,碳酸镧组出现轻度钙化12例,中重度钙化3例,高钙血症0例,总不良影响率为37.5%;醋酸钙组出现轻度血管钙化14例,中重度血管钙化8例,高钙血症8例,总不良影响率为75.0%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:碳酸镧对于治疗维持性透析患者高磷血症有效,相较于醋酸钙,具有更好的短期疗效,且较少引起高钙血症,更易改善患者的钙磷乘积,其对血管钙化的影响较小。