蛋白激酶C和蛋白酪氨酸激酶介导脂多糖及细胞因子诱导大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮的生成(英文)

采用Sprague Dawley大鼠胸主动脉中膜、外膜和培养的血管平滑肌细胞 (VSMCs)作材料 ,鉴定不同类型的血管组织经炎性介质刺激后其一氧化氮 (NO)的产生来源 ,阐明蛋白激酶C (PKC)和蛋白酪氨酸激酶 (PTK)介导大鼠VSMCs生成NO的调控机制。大鼠VSMCs经脂多糖 (LPS)和细胞因子 (TNF α ,IL 1β)处理后 ,以剂量依赖方式促进NO释放。采用WesternBlot证实经刺激的VSMCs伴有iNOS表达上调。进一步实验表明PKC和PTK参与LPS和细胞因子诱导NO生成的胞内信号转导。用PKC抑制剂H7与VSMCs共培育 ,H7能明显减少LPS、TNF α和IL 1β诱导细胞NO的形成。白屈菜赤碱亦可抑制NO的生成 ,但HA10 0 4对VSMCs的NO生成无抑制作用 ,提示PKC参与NO的生成与调控。PTK抑制剂genistein和tyrphostinAG18均能抑制由LPS、TNF α和IL 1β引发VSMCs释放NO ,同时伴iNOS蛋白表达下调 ,而PKC抑制剂不能阻断iNOS的表达。上述观察结果提示 ,PKC介导LPS和细胞因子诱导细胞合成NO可能是通过iNOS翻译后加工 ;