卵泡液中sRAGE、Vit D和TNF-α的含量与卵母细胞质量的相关性研究

目的探讨卵泡液(FF)中可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)、维生素D(Vit D)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平对卵母细胞质量的影响。方法纳入2021年6月至2022年8月于联勤保障部队第九○○医院生殖中心就诊行IVF-ET治疗的不孕女性(12例)的81个卵母细胞的FF样本,通过ELISA法检测单个FF中sRAGE、Vit D和TNF-α的含量。根据卵母细胞成熟情况、D3胚胎发育情况、囊胚发育情况进行分组,分析各组间卵泡直径、卵泡体积、FF中的sRAGE、Vit D和TNF-α的含量差异;进一步分析sRAGE、Vit D和TNF-α三者之间的相关性及其与临床指标的相关性。结果成熟卵母细胞组中卵泡的直径、体积、FF的sRAGE和Vit D水平显著高于不成熟卵母细胞组(P均<0.05),优质胚胎组、优质囊胚组中FF的sRAGE、Vit D水平均显著高于非优质胚胎组(P均<0.05);FF中sRAGE、Vit D水平与卵母细胞成熟度、胚胎发育情况等指标均存在正相关关系(P均<0.05)。成熟卵母细胞组、优质胚胎组和优质囊胚组中FF的TNF-α水平显著低于不成熟卵母细胞组、非优质胚胎组和非优质囊胚组(P均<0.05),FF中TNF-α水平与卵母细胞成熟度、胚胎发育情况、囊胚发育情况等指标均有负相关关系(P均<0.05)。FF中sRAGE与Vit D水平显著正相关(P<0.001);FF中sRAGE、Vit D水平与TNF-α水平显著负相关(P<0.001)。结论不孕患者FF中sRAGE、Vit D及TNF-α水平可能影响卵母细胞质量,将其作为胚胎筛选指标,并结合胚胎形态学评分,可能提高对胚胎着床能力判断的准确性,为临床不孕患者的诊疗提供新思路。

宫腔镜检查在体外受精-胚胎移植治疗中应用相关研究

宫腔镜检查越来越多地运用于辅助生殖技术助孕治疗中,以期能提高助孕治疗的妊娠率。黏膜下子宫肌瘤、宫腔粘连、子宫内膜息肉及子宫纵隔等子宫腔疾病经过宫腔镜手术治疗后,能提高患者的妊娠结局被大家广泛认可,但宫腔镜手术运用于首次体外受精-胚胎移植和反复种植失败类型患者能否提高其妊娠率仍有较大争议。本文对不同体外受精-胚胎移植人群行宫腔镜检查后的妊娠结局的相关研究进行综述。

人类稀少精子冷冻方法研究进展

随着经济社会的不断发展、环境的污染和人民生活压力的逐渐增加,外界对生育能力的不良影响也逐渐加大,特别是男性的生育能力明显下降。国外学者综合过去开展的185项精液分析数据统计显示,从1973年到2011年期间,欧美地区的男性精液精子含量下降了52%,从每毫升精液含有大约9900万个精子,下降到大约每毫升4700万个精子。

改良快速冷冻载体冻融人类稀少精子的实验研究

目的探讨人类稀少精子冷冻改良快速冷冻载体的实验研究,为重度少弱精子症患者的精子冷冻保存提供参考。方法2018年12月至2019年8月,在联勤保障部队第九〇〇医院生殖中心就诊的男性不育症患者:根据精液质量分为正常精液组和少弱精液组,每个实验样本选取3份精液分别进行充分混合,将混合精液稀释至浓度为(1~2)×10~6/ml,实验共计选取81份正常精液标本混匀稀释形成27个正常精液样本,选取54份少弱精液标本混匀稀释形成18个少弱精子样本。根据不同的冷冻载体各分3组进行精子冷冻:薄片精子冷冻管组(A组),麦管微量体积冷冻组(B组),改良快速冷冻载体组(C组),均采用商品化精子冷冻试剂1∶1混匀,熏蒸法后快速冷冻。比较3种载体冷冻复苏后,精子的活动力、存活率、DNA碎片指数和正常形态变化、精子顶体酶活性等指标变化,以评估改良快速冷冻载体的冷冻效率及安全性。统计学方法采用t检验、ANOVA分析、LSD多重比较。结果正常精液组的3种冷冻方法都会造成精子质量下降。正常精液组的C组的复苏后精子活动力、存活率均高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。正常精液组:C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C 3组复苏后精子正常形态率均低于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.05)。少弱精液组:A、B两组复苏后精子DNA碎片指数均高于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.01);C组精子DNA碎片指数高于冷冻前,但差异无统计学意义(P=0.068),C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C 3组冷冻精子复苏后正常形态率均低于冷冻前,差异无统计学意义(P>0.05)。正常精液组:冷冻前精子顶体酶活性为(123.6±12.8)IU/10~6个精子,复苏后A、B、C 3组顶体酶活性均有下降,分别为(74.7±15.6)、(84.7±13.5)、(91.2±16.2)IU/10~6个精子,差异有统计学意义(F=37.896,P<0.001),从对于精子顶体影响看,B、C组优于A组,差异有统计学意义(P=0.043、P=0.001)。结论改良快速冷冻载体对于稀少精子冷冻保存有一定优势,值得进一步探讨研究。

精子鞭毛多发形态异常患者KLHL10基因突变分析

目的 探寻精子鞭毛多发形态异常患者的致病基因。方法 通过全外显子组测序(WES)对患者样本进行检测,分析可能的致病基因;运用扫描电镜和透射电镜观察患者精子超微结构;通过定量聚合酶链反应(qPCR)分析精子中目的基因mRNA表达水平;通过PubMed、中国知识基础设施工程(CNKI)等数据库检索目的基因突变相关临床病例。结果 在本研究征集的患者中检测到一个KLHL10基因杂合突变:c.317C>T(p.Pro106Leu),透射电镜结果表明患者精子鞭毛结构缺失或紊乱,未能找见轴丝中典型“9+2”结构。qPCR结果提示患者精子KLHL10 mRNA表达水平降低,只有正常对照组的一半,而与KLHL10相互结合的泛素连接酶CUL3(Cullin-3)的mRNA表达量却较正常对照升高2.5倍。结论 本研究报道了精子鞭毛多发形态异常患者KLHL10基因C.317C>T突变,该突变位点首次报道可能通过单倍体剂量不足引起精子形态异常。

不同遗传类型多囊肾病的辅助生殖助孕策略

目的探讨不同遗传类型和临床表现的多囊肾病(PKD)合并不孕症患者,通过辅助生殖技术或胚胎植入前遗传学检测(PGT)获得子代的策略选择。方法回顾2016—2021年中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院生殖医学中心共8例多囊肾病或多囊肾隐性基因携带者的临床资料,分析其基因检测结果及相应的辅助生殖助孕结局。结果5例明确为常染色体显性遗传性多囊肾(ADPKD)基因诊断,1例未明确基因诊断,2例明确为常染色体隐性遗传性多囊肾(ARPKD)基因诊断,其中有6例选择植入前单基因检测(PGT-M)或植入前非整倍体检测(PGT-A)助孕,另2例仅选择卵胞质内单精子显微注射(ICSI)助孕。结论致病基因诊断明确的ADPKD患者,可考虑选择PGT-M技术干预PKD家族遗传,ARPKD患者建议行PGT-M助孕获得健康子代;致病基因诊断不明确PKD患者,无PGT-M应用适应证,建议加强孕期产检及产前筛查。

圆头精子症患者的致病基因变异分析4例

目的对4例圆头精子症患者的致病基因进行分析,明确其遗传学病因。方法选取2017年6月至2020年9月在中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院被确诊为圆头精子症的4例患者作为研究对象,采集其精液和血液样本,进行精子浓度、活力、存活率、形态等常规检测以及精子顶体抗原CD46免疫荧光检测,提取外周血样基因组DNA进行全外显子组测序(WES),对疑似致病变异通过Sanger测序进行验证。结果WES检测显示4例患者均携带DPY19L2基因变异,其中患者1~3携带DPY19L2基因纯合缺失,Sanger测序显示患者3在重组断裂点区域BP2存在断裂,通过非等位基因同源重组造成DPY19L2基因完全缺失。患者1存在第2~22外显子纯合缺失,患者2存在第14~15外显子纯合缺失,患者1和2的缺失既往未见文献报道,患者4为DPY19L2基因杂合缺失,且3′UTR区存在罕见的纯合缺失。结论DPY19L2基因变异可能导致的圆头精子症的发生,其方式符合常染色体隐性遗传,同时也符合基因组病的特点。