干扰hsa_circ_0023404通过miR-153对肝癌细胞HCC9204增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响

目的研究环状RNA(circRNA)hsa_circ_0023404是否通过微小RNA(microRNA)-153影响肝癌细胞HCC9204增殖、侵袭、迁移和凋亡。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定39例肝癌组织中hsa_circ_0023404和miR-153的表达。将肝癌细胞HCC9204分为si-NC组(转染si-NC),si-hsa_circ_0023404组(转染si-hsa_circ_0023404),miR-NC组(转染miR-NC),miR-153组(转染miR-153模拟物),si-hsa_circ_0023404+anti-miR-NC组(共转染si-hsa_circ_0023404和anti-miR-NC),si-hsa_circ_0023404+anti-miR-153组(共转染si-hsa_circ_0023404+miR-153抑制剂)。应用CCK-8法、平板克隆实验、流式细胞术、Western印迹和Transwell法分别测定细胞增殖、集落形成、凋亡、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin蛋白表达及细胞侵袭、迁移。生物信息学预测与双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0023404和miR-153靶向关系。结果肝癌组织中hsa_circ_0023404高表达,miR-153低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组相比,si-hsa_circ_0023404组细胞HCC9204的miR-153表达量、抑制率、凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白表达量明显增加,集落形成数、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达量、迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。miR-153组细胞HCC9204的抑制率、凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白表达量较miR-NC组高,集落形成数、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达量、迁移细胞数和侵袭细胞数较miR-NC组低,差异有统计学意义(P<0.05)。si-hsa_circ_0023404+anti-miR-153组细胞HCC9204的抑制率、凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白表达量明显低于si-hsa_circ_0023404+anti-miR-NC组,集落形成数、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达量、迁移细胞数和侵袭细胞数明显高于si-hsa_circ_0023404+anti-miR-NC组(P<0.05)。结论hsa_circ_0023404在肝癌组织中高表达,干扰hsa_circ_0023404通过靶向miR-153,抑制肝癌细胞HCC9204增殖、侵袭、迁移,并诱导其凋亡。

LncRNA HOTTIP靶向miR-411-3p对高糖高胰岛素诱导的视网膜病变细胞增殖、迁移及新生血管形成的影响

目的探讨长链非编码(Lnc)RNA HOXA远端转录本(HOTTIP)靶向miR-411-3p对高糖高胰岛素(HG+HI)处理人视网膜内皮细胞HRECs增殖、迁移和血管形成的影响。方法选取38例糖尿病视网膜病变(DR)患者(DR组)和健康志愿者(control组)玻璃体体液样本;用25 mmol/L葡萄糖(HG)+100 nmol/L胰岛素(HI)处理HRECs,将HRECs细胞分为NC组、HG+HI组、si-NC+HG+HI组、si-LncRNA HOTTIP+HG+HI组、miR-NC+HG+HI组、miR-411-3p+HG+HI组、anti-miR-NC+si-LncRNA HOTTIP+HG+HI组、anti-miR-411-3p+si-LncRNA HOTTIP+HG+HI组;逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA HOTTIP和miR-411-3p表达水平;Western印迹检测相关蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移能力;双荧光素酶报告实验检测LncRNA HOTTIP和miR-411-3p的靶向关系。结果与control组比较,DR组中LncRNA HOTTIP表达水平明显升高,miR-411-3p表达水平明显降低(P<0.05)。与NC组比较,HG+HI组HRECs中LncRNA HOTTIP表达明显升高,miR-411-3p表达明显降低,基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、血管内皮生长因子(VEGF)A蛋白表达、细胞A值及迁移细胞数明显增加(P<0.05);LncRNA HOTTIP低表达或miR-411-3p上调明显降低HRECs中MMP2、MMP9、VEGFA蛋白表达、细胞A值及迁移细胞数(P<0.05);LncRNA HOTTIP靶向调控miR-411-3p表达(P<0.05),下调miR-411-3p明显逆转LncRNA HOTTIP低表达对HG+HI处理HRECs增殖、迁移和血管腔形成的影响(P<0.05)。结论LncRNA HOTTIP低表达通过靶向上调miR-411-3p影响HG+HI处理HRECs增殖、迁移和血管腔形成。